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Historique 1 Historique La première description de la méthode de séparation chromatographique est donnée dans le cadre d ? une communication présentée en et a été appliquée en En - la méthode est introduite en pratique dans les laboratoires par Kuhn et El

Historique La première description de la méthode de séparation chromatographique est donnée dans le cadre d ? une communication présentée en et a été appliquée en En - la méthode est introduite en pratique dans les laboratoires par Kuhn et Elederer à Heidelberg en Allemagne En quelques années la chromatographie en phase liquide sur colonne devient une technique rendant possible de nombreuses découvertes concernant di ?érentes disciplines En Reichstein introduit la chromatographie liquide pour séparer des substances incolores Avant les années un petit nombre de méthode chromatographique est utilisé dans les laboratoires Ultérieurement des colonnes ouvertes sont utilisées pour initier l ? introduction de chromatographie liquide à haute performance HPLC dans la séparation des composées chimiques complexes Dé ?nition de la chromatographie La chromatographie est un ensemble de procédés applicables à des mélanges moléculaires ou ioniques basés sur des di ?érences de distribution des solutés entre une phase stationnaire et une phase mobile continue les deux phases étant mises en contact intime et à contre courant ? Les di ?érentes méthodes chromatographiques Les di ?érentes méthodes chromatographiques sont ?? La chromatographie en phase gazeuse CPG ?? La chromatographie sur couche mince CCM ?? La chromatographie en phase liquide CPL ?? La chromatographie liquide à haute performance HPLC ?? La chromatographie en phase supercritique CP ?? Principe de la HPLC Les composés à séparer solutés sont mis en solution d ? abord puis elle sera introduite dans la phase mobile liquide éluant Gr? ce à la répartition sélective des solutés entre la phase mobile et la phase stationnaire chaque soluté est donc soumis à une force de rétention exercée par la phase stationnaire et une Cforce de mobilité due à la phase mobile Suivant la nature des molécules elles interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire dans un tube appelé colonne chromatographique La phase mobile poussée par une pompe sous forte pression parcourt le système chromatographique Le mélange à analyser est injecté puis transporté à travers le système chromatographique Les composés en solution se répartissent alors suivant leur a ?nité entre la phase mobile et la phase stationnaire En sortie de colonne gr? ce à un détecteur approprié les di ?érents solutés sont représentés par des pics L ? ensemble des pics enregistrés est appelé chromatogramme Appareillage Les di ?érentes composantes d ? une chaine HPLC sont présentées sur le schéma suivant ?gure Tous les organes du système sont liés à un microordinateur qui pilote tous les processus Figure Les organes d ? une chaine HPLC L ? appareillage se compose d ? un réservoir contenant la phase mobile d ? un système de pompage d ? un injecteur d ? une colonne chromatographique éventuellement thermostatée d ? un détecteur et d ? un système d ? acquisition des données avec un logiciel pour traiter les signaux C Injecteurs La solution à examiner est introduite dans la phase mobile qui circule en tête de colonne ou à proximité de celle-ci à l ? aide d ? un système d ?