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Exemple d’hydrolyse acide : hydrolyse acide de l'amidon • Objectif : Comparer l

Exemple d’hydrolyse acide : hydrolyse acide de l'amidon • Objectif : Comparer les conditions de l'hydrolyse enzymatique à celles de l'hydrolyse acide afin d'introduire le mode d'action des enzymes. • Protocole expérimental : 12 tubes contenant chacun 10 mL d'empois d'amidon à 1 % sont mis au bain marie bouillant.  Au début de l'expérience, 3 mL d'acide chlorhydrique concentré sont versés le plus simultanément possible dans chacun des tubes, sauf dans les deux derniers où l'on mettra 3 mL d'eau distillée. Ces tubes serviront de témoin. Afin de pouvoir réaliser cette étape de la manipulation en quelques secondes, il faut auparavant, préparer 10 tubes séparés avec 3 mL d'acide (H3O+ + Cl-) chacun.  Ensuite, toutes les deux minutes, deux tubes sont retirés du bain marie. Dans l'un on ajoute du réactif de Fehling, la coloration se fait immédiatement car le tube est chaud.  L'autre tube est refroidi sous un filet d'eau du robinet puis le test à l'eau iodée est réalisé en versant quelques gouttes de ce réactif dans le tube. Il est parfois nécessaire de diluer le contenu du tube pour bien voir la nuance de couleur apparue. • Résultats expérimentaux : http://www.didiersvt.com/cd_1s/html/c8/c8a1p2.htm Résultats avec le test à l'eau iodée. Le changement de coloration met ici bien en évidence les composés intermédiaires notamment les dextrines colorées en rouge bordeaux par ce réactif. Résultats avec le test au réactif de Fehling. Ici les colorations intermédiaires sont dues à la synthèse additive des couleurs bleue du réactif de Fehling initiale et orange du précipité rouge brique avec le glucose final. Exemple d’hydrolyse enzymatique : hydrolyse de l'amidon par la maxilase • Objectif : Préciser le rôle de l'enzyme lors d'une réaction d'hydrolyse. • Protocole expérimental : Deux tubes à essai sont placés dans un bain marie à 37 °C comme le montre la photographie ci-dessous. Ils contiennent chacun 15 mL d'empois d'amidon à 1 %. Bain marie réglé sur 37 °C avec les deux tubes à essai o On prélève 2 mL dans chacun des tubes en début d'expérience et un test au réactif de Fehling est réalisé sur les deux prélèvements. o Préparation de la solution de maxilase : dissoudre l'enveloppe d'un cachet de Maxilase acheté en pharmacie en le malaxant sous un filet d'eau. Quand il ne reste que l'intérieur du cachet, broyer celui-ci dans 100 mL d'eau distillée pour obtenir la solution d'enzymes. o Déposer 1 mL de solution de maxilase dans le tube 2 uniquement. o Immédiatement puis toutes les trois minutes, prélever deux à trois gouttes dans chaque tube, les déposer dans les cavités d'une plaquette test, et colorer avec une goutte d'eau iodée. Réaliser ce test pendant 15 à 20 minutes. (résultats photo 1) o En fin d'expérience, refaire le test au réactif de Fehling sur un prélèvement des deux tubes. • Résultats expérimentaux : À gauche en l'absence de maxilase, à droite en présence de maxilase. Résultats du test au réactif de Fehling à la fin de l'expérience. Résultats du test sur le tube 2 en fin d'expérience, à l'eau iodée à droite et au réactif de Fehling à gauche. http://www.didiersvt.com/cd_1s/html/c8/c8a1p2.htm Photo 1 uploads/Finance/hydrolyses-de-l-amidon.pdf