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H Y G I È N E Réalisation d’essais de l’adhésion microbienne à la formation de

H Y G I È N E Réalisation d’essais de l’adhésion microbienne à la formation de biofilms A C T I A 2 0 1 5 3 Guide pratique pour la réalisation d’essais d’adhésion microbienne . Actia . 2015 2 Le RMT Actia Chlean Ce guide a été réalisé par les partenaires du Réseau mixte technologique (RMT) Actia Chlean « Conception hygié- nique des lignes et des équipements, et amélioration de la nettoyabilité ». Ce réseau labellisé par le ministère chargé de l’Agro-alimentaire sous l’égide de l’ACTIA réunit dix-sept partenaires sur le plan national, tous experts sur la théma- tique de la conception hygiénique. Coordonné par le CTCPA, ce RMT regroupe des Instituts techniques agro-industriels (Actalia, Adiv, Adria Développement, CTCPA, Ifip - Institut du porc, IFV - Institut français de la vigne et du vin), un partenaire interface (Critt Provence-Alpes-Côte d’Azur), des partenaires techniques (Adrianor, Casimir) et des établissements d’enseignement et de recherche (AgroParisTech, Anses, Énil de Mamirolle, Inra LGPTA, IUT de Laval, lycée agricole de Laval, Oniris, université Lyon 1 - Biodymia). Les objectifs principaux du RMT sont de répondre aux besoins de l’industrie agro-alimentaire en termes de recherche & développement, de formation et de mise à disposition d’outils tels que ce guide de bonnes pratiques. Depuis 2009, le RMT Actia Chlean a abordé trois problématiques. Mise en place de programmes de R&D centrés sur : la biocontamination des surfaces (encrassement, adhésion microbienne et formation de biofilms) ; la conception hygiénique des équipements ; la mise en œuvre du nettoyage et de la désinfection. Diffusion des méthodes et outils d’aide à la décision par : la mise en place d’une encyclopédie évolutive avec contributeurs autorisés sur le principe collaboratif wiki ; la rédaction de guides experts ; l’organisation de transfert d’information au travers de colloques, conférences, séminaires, articles scientifiques et techniques. Contribution à la formation initiale et continue par le développement et la mise à jour de modules portant sur : la maintenance ; le nettoyage et la désinfection en agro-alimentaire ; la qualité. Préface C H L E A N 5 Guide pratique pour la réalisation d’essais d’adhésion microbienne . Actia . 2015 Guide pratique pour la réalisation d’essais d’adhésion microbienne . Actia . 2015 4 Préparation des essais 1. Constitution et gestion d’une souchothèque par congélation.. . . . . . . . . . . . . 13 2. Constitution d’un stock secondaire ou stock de travail. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 3. Préparation de l’inoculum ou de la suspension d’essai.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 a. Réalisation des précultures. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 b. Préparation des suspensions microbiennes. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17 c. Préparation des suspensions de spores. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 4. Préparation des supports solides non poreux.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 a. Protocole de nettoyage... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 b. Conditionnement des supports solides.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 5. Préparation des supports solides poreux.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 a. Exemple du bois.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 b. Exemple du textile. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 Réalisation des essais d’adhésion 1. En conditions statiques.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 a. Contamination par dépôt. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 b. Contamination par immersion. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 c. Contamination par aérodiffusion.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 2. En conditions dynamiques.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31 a. Dispositifs expérimentaux commercialisés. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31 b. Autres dispositifs.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 De l’adhésion microbienne à la formation de biofilms 1. Essais de formation de biofilms en conditions statiques. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35 2. Essais de formation de biofilms en conditions dynamiques.. . . . . . . . . . . . . . . 36 Sommaire 7 Guide pratique pour la réalisation d’essais d’adhésion microbienne . Actia . 2015 Guide pratique pour la réalisation d’essais d’adhésion microbienne . Actia . 2015 6 Sommaire Évaluation de la contamination des surfaces 1. Microscopie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41 2. Mise en culture après décrochage. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43 a. Technique de décrochage aux ultrasons.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43 b. Technique de brossage.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . uploads/Industriel/ actia-guide-hygiene-1.pdf