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• Principe gel filtration : La chromatographie par filtration sur gel dite auss

• Principe gel filtration : La chromatographie par filtration sur gel dite aussi chromatographie d'exclusion - diffusion, est une technique qui permet une séparation simple et rapide des molécules solubles dans l'eau ou certains solvants organiques, en fonction de leur taille, donc de leur masse molaire Un gel est constitué par un empilement de grains poreux. Le grain est formé par l'enchevêtrement de macromolécules linéaires reliées entre elles par voie chimique de façon à former un réseau à trois dimensions aux mailles plus ou moins serrées selon le degré de réticulation. De nombreux gels sont maintenant disponibles, les gels de dextranes, les gels de polyacrylamide, les gels d'agarose... ils sont choisis en fonction des contraintes expérimentales. Chaque gel est caractérisé par un domaine de fractionnement qui est fonction de la grosseur des mailles du réseau et donc de la réticulation. Au-dessus d'un poids moléculaire donné appelé "limite d'exclusion", toutes les molécules sont traitées par le gel de la même façon, il n'y a plus chromatographie. • Rechercher 3 exemples d'enzymes utilisées dans le milieu industrielle : rôle dans le processus de fabrication à connaître Nom enzyme Type d’industrie Rôle dans le processus de fabrication à connaître Protéases excrétées par les bactéries Détergents biologiques Pré-trempage et applications liquides directes pour enlever les taches des vêtements d'origine protéique Cellulases et ligninases Industrie du carburant biologique Hydrolyse de la cellulose dans les sucres fermentables lors de la production d'éthanol à partir de la cellulose. Récupération des résidus de lignine. Amylases Industrie de l'amidon Convertissent l'amidon en glucose et différents sirops. Convertit le glucose en fructose pour produire des sirops à partir de féculents. Ces sirops ont des propriétés adoucissantes et des valeurs calorifiques plus basses que le saccharose pour le même niveau de douceur. • - Méthode d' immobilisation Rétention mécanique d’enzymes dans une région de l’espace avec maintien de l’activité catalytique pour une utilisation répétée ou continue. L’immobilisation des enzymes induira une catalyse hétérogène. • Savoir schématiser les différentes méthodes d'immobilisation d'enzyme • Savoir décrire en 1 ou 2 phrases les méthodes d'immobilisation + Pouvoir citer pour chaque méthode : ses avantages et inconvénients Méthode Sous nom Description Avantages Inconvénients Sans liaisons covalent entre enzyme et support Confinement Fibres creuses Inclusion dans la membrane de fibres creuses Facile à préparer grande stabilité Régénération difficile de l’enzyme Inclusion Gels Inclusion dans un gel en bille Fibres Inclusion dans des nœuds de fibres Encapsulation Inclusion dans une membrane (capsule) de rétention Avec liaisons covalent entre enzyme et support Avec support préexistant Fixation covalente Fixation de l’enzyme par une liaison covalente sur un support Rétention forte de l’enzyme, stabilité grande Préparation difficile, régénération impossible, coût important Fixation non covalente Adsorption Les enzymes sont retenues à la surface d’un support insoluble par établissement d’interactions secondaires entre les groupes fonctionnels de l’enzyme et du support. Très grande facilité de mise en œuvre Possibilité de régénérer le support par désorption et remplacement de l’enzyme Risque important de désorption Problèmes stériques Mauvaise orientation de l’enzyme : perte d’activité Ionique Liaison métallique Sans support préexistant Réticulation Inclusion : Les enzymes sont retenues à l’intérieur d’une matrice poreuse uploads/Industriel/ devoir-8-02.pdf