DEFINITION Les anticorps anti-nucléaires (AAN) sont des auto-anticorps réagissa

DEFINITION Les anticorps anti-nucléaires (AAN) sont des auto-anticorps réagissant avec divers constituants du noyau cellulaire (ADN, histones, centromères, antigènes nucléaires solubles….). On y associe les anticorps dirigés contre des constituants présents dans le cytoplasme mais provenant du noyau. Plus de cinquante anticorps anti-nucléaires ont été décrits, mais la signification clinique d’un grand nombre d’entre eux n’est pas établie. Les Ac anti-centromères sont des AAN définis par leur aspect particulier en immunofluo- rescence indirecte (IFI). Synonymes : AAN, ANA, Ac anti-noyaux. INDICATION DU DOSAGE Ces anticorps représentent le dépistage indispensable pour le diagnostic des maladies auto-immunes non spécifiques d’organe (ou connectivites ou maladies auto-immunes systémiques) (Tableau 1). Ils sont recherchés devant des signes cliniques plus ou moins spécifiques (arthralgies, sécheresse de la bouche et des yeux, signes cutanés, etc.). Tout résultat d’AAN positif déclenche la réalisation de tests complémentaires (anticorps anti- antigènes nucléaires solubles et anti-ADN natif), visant à préciser la spécificité dépistée en IFI, afin d’obtenir une orientation diagnostique plus précise (fig 1). Tableau 1 : Association clinique des principaux AAN En dehors des connectivites, les AAN peuvent être retrouvés, parfois à titre élevé, dans de nombreuses autres situations pathologiques ou physiologiques : Maladies auto-immunes spécifiques d’organes (hépatites auto-immunes, thyroïdites, etc.) Infections virales Cancers Auto-anticorps Maladie associée (sensibilité %) Anti-ADN natif Lupus Erythémateux Disséminé= LED (80%) Anti-RNP Syndrome de SHARP (100%) LED (25%) Anti-Sm LED (10%) Anti-SSA Syndrome de Gougerot Sjogren (50%), LED (30%) Anti-SSB Syndrome de Gougerot Sjogren (80%), LED (5%) Anti-PCNA LED (3%) Anti-Scl70 Sclérodermie diffuse Anti-centromère Syndrome CREST (80%) Anti-Jo1 Poly-dermatomyosite Anti-Pm/Scl Sclérodermie, polymyosite Anticorps anti-nucléaires et anticorps anti-centromères MÉMENTO BIOLOGISTE MÉMENTO DU BIOLOGISTE DU MÉMENTO DU BIOLOGISTE Affections diverses (vascularites, sarcoïdose, insuffisance rénale) Prise de médicaments inducteurs (bêtabloquants, isoniazide, interféron, minocycline, chlorpromazine, procaïnamide etc…) Age > 60 ans (prédominance féminine). L ’interprétation d’un titre d’anticorps anti-nucléaires positif nécessite donc une confrontation clinico-biologique très étroite, tenant compte notamment des résultats des tests complémentaires, des signes cliniques et de l’âge du patient. METHODES DE RECHERCHE Les anticorps anti-nucléaires sont recherchés par immunofluorescence indirecte (IFI) sur cellules HEP-2 ou HEP-2000. Les résultats sont rendus en inverse de dilution. Conformément à la nomenclature (arrêté paru au JO du 24/04/95), tout dépistage positif d’AAN (≥ au 100e) est suivi d’une recherche quantitative d’Ac anti-DNA natif ainsi que d’un dépistage d’anti- antigènes nucléaires solubles (ENA). Si cette seconde recherche est négative, un titrage des Ac anti-histones peut être effectué. Les principaux aspects de fluorescence nucléaires sur HEp-2000 sont : homogène, moucheté, membranaire, centromère et nucléolaire. Ces différents aspects orientent sur la nature de l’auto-antigène cible (Tableau II), mais ils ne suffisent pas à poser le diagnostic, plusieurs anticorps anti-nucléaires de spécificités différentes pouvant co-exister dans le même sérum. Les aspects de fluorescence cytoplasmiques (suspicion d’anticorps anti-mitochondrie, actine, ribosomes, Jo1, synthétases…), sont confirmés sur triple substrat (foie, rein, estomac) ou par une technique immunoenzymatique adaptée. Tableau II : Principaux anticorps évoqués en fonction de l'aspect sur cellules Hep2000. Figure 1 : Démarche diagnostique de recherche d’AAN Dépistage des anticorps anti-nucléaires en IFI sur cellules Hep-2 / Hep-2000 Aspect de fluorescence Spécificité évoquée Homogène Anti-ADN natif, anti-histone, anti-nucléosome Moucheté RNP, Sm, SSA, SSB, Scl70 Nucléolaire Anti-Pm/Scl, Moucheté M2 de type centromère Centromère Serum au 1/80 POSITIF Titrage Homogène Moucheté Centromère Nucléolaire Cytosquelette Ribosomes Mitochondries CONFIRMATION Recherche de la spécificité des AAN Anticorps anti-ADN natifs Anticorps anti-antigènes nucléaires solubles Fluorescence nucléaire Fluorescence cytoplasmique Caractérisation de la fluorescence NEGATIF MÉMENTO DU BIOLOGISTE - Fréquence = 5 jours / 7 - Délai technique = 1 jour si résultat négatif PRELEVEMENT Sérum Quantité du prélèvement : 1 ml Conservation et transport : à +4 °C. EXPERTISE BIOMNIS Volumétrie quotidienne (AAN dont anti-centromères) : environ 620/jour (Paris : 308/j ; Lyon : 314/j). Qualité des résultats : - Recrutement important qui permet l’observation de tous les aspects des AAN y compris les fluorescences complexes (hétérogènes, mixtes, rares…). - Personnel qualifié et expérimenté pour la lecture des lames en immunofluorescence. - Equipement performant (microscope de dernière génération, technologie Bioplex®: technique de pointe permettant le titrage de tous les anticorps anti-antigènes nucléaires solubles en une seule étape). - Techniques, lames choisies et validées au laboratoire. - Paramètres accrédités COFRAC à Lyon, en cours d’accréditation à Ivry (Anticorps anti- nucléaires, anticorps anti-antigènes nucléaires solubles, anticorps anti-ADN natif). Rapidité des résultats : - Réalisation quotidienne des dosages des anticorps anti-nucléaires qui sont donc rendus à J1 si négatifs et si positifs, le titrage est rendu à J2. - Déclenchement automatique du dosage, sur le Bioplex®, des anticorps anti-antigènes nucléaires solubles et anticorps anti-ADN natif si les anticorps anti-nucléaires sont positifs : donc assurance d’avoir un résultat complet et cliniquement pertinent en 3 jours maximum. Expertise biologique et technique : - Assistance biologique et aide à l’interprétation des résultats. - Conseil à la prescription. - Veille scientifique, collaboration avec les fournisseurs de réactifs, les laboratoires hospitaliers, contacts privilégiés avec les médecins référents en auto-immunité au sein des CHU, participation aux congrès nationaux et internationaux en auto-immunité. - Membre de société savante (Société Française d’Immunologie). EXEMPLE DE COMPTE-RENDUS BIOMNIS Voir feuillets ci-joints. MÉMENTO DU BIOLOGISTE COMPTE-RENDU MÉMENTO DU BIOLOGISTE COMPTE-RENDU MÉMENTO DU BIOLOGISTE COMPTE-RENDU MÉMENTO DU BIOLOGISTE COMPTE-RENDU uploads/Science et Technologie/ fiche-04-ac-antinucleaire.pdf

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• Publié le Jul 24, 2022
• Catégorie Science & technolo...
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