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Intro manuel de lab 1 Manuel de laboratoire Ce cahier contient des informations

Intro manuel de lab 1 Manuel de laboratoire Ce cahier contient des informations générales associées au travail de laboratoire, des informations spécifiques sur l’instrumentation et les réactifs utilisés, ainsi que les protocoles et questions guides prélaboratoires. Il est donc une référence nécessaire pour votre préparation prélaboratoire et complétion adéquate du cahier de laboratoire. Notez que les tableaux présents dans les protocoles seront mis à votre disposition en version électronique sur LÉA afin de les coller dans votre cahier de laboratoire. 2 Table des matières CAHIER DE LABORATOIRE 5 CONTENU 5 TRAVAIL ASSOCIÉ AUX LABORATOIRES 6 DESCRIPTION DES RUBRIQUES DU CAHIER DE LABORATOIRE 7 CONSIGNES ESSENTIELLES 10 AIDE-MÉMOIRE DES RUBRIQUES 11 LÉGENDE DES ANNOTATIONS (CODE D’ERREUR) 11 BARÊME DE CORRECTION DU CAHIER DE LABORATOIRE 12 CAHIER SIMDUT 13 DIRECTIVES POUR LA REMISE DES FICHES 19 RAPPORT DE LABORATOIRE 20 FONCTION DU RAPPORT DE LABORATOIRE 20 CONTENU 20 LES TITRES 20 INTRODUCTION 22 RÉSULTATS 22 DISCUSSION ET CONCLUSION 23 PARAMÈTRES DU RAPPORT DE LABORATOIRE 25 MÉDIAGRAPHIE 25 LABORATOIRE 1A – MICROPIPETTES 26 NOTIONS THÉORIQUES 26 PROTOCOLE 1A 33 ORGANIGRAMME 1A 34 PRÉLAB 1A 35 ANNEXE 1A.1 – FICHE TECHNIQUE DES MICROPIPETTES 37 ANNEXE 1A.2 – LES BALANCES 39 LABORATOIRE 1B – COURBE DE DOSAGE 40 AVANT LE LABORATOIRE 40 PRÉPARATION D’UNE COURBE D’ÉTALONNAGE ET QUANTIFICATION D’UN INCONNU 40 CAPSULE 40 PROTOCOLE 1B 41 PRÉLAB 1B 43 ANNEXE 1B.1 – LE NETTOYAGE DE LA VERRERIE EN BIOCHIMIE 44 ANNEXE 1B.2 – PH ET EFFET TAMPON 45 ANNEXE 1B.3 – INITIATION À LA SPECTROPHOTOMÉTRIE 49 ANNEXE 1B.4 – LA DROITE D’ÉTALONNAGE 54 Intro manuel de lab 3 LABORATOIRE 2 – CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE – TAMIS MOLÉCULAIRE (EN ÉQUIPE) 56 NOTIONS THÉORIQUES : TAMIS MOLECULAIRE 56 PROTOCOLE 2 58 PRÉLAB 2-6C 59 LABORATOIRE 3 – HYDROLYSE ET IDENTIFICATION DE GLUCIDES (EN ÉQUIPE) 60 THÉORIE 60 I– MONOSACCHARIDES OU OSES 60 II– OLIGOSACCHARIDES OU OLIGOHOLOSIDES 61 III– POLYSACCHARIDES OU POLYHOLOSIDES 62 IV– TESTS BASÉS SUR LA FORMATION DE FURFURAL 62 V– TESTS BASÉS SUR LES PROPRIÉTÉS RÉDUCTRICES DES GLUCIDES 63 VI– TESTS AU LUGOL (IODURE DE POTASSIUM) 64 VII– HYDROLYSE DES LIAISONS GLYCOSIDIQUES 65 LA NOTIONS DE TÉMOIN DANS LES EXPÉRIENCES SCIENTIFIQUES 66 PRÉCISIONS SUR L’ORGANISATION DU LABO 68 PROTOCOLES 3 69 PRÉLAB 3 71 TABLEAUX PRÉLAB 3 72 TABLEAUX LAB 3 73 LABORATOIRE 4 – DOSAGE DU GLUCOSE (INDIVIDUEL) 75 PROTOCOLE DE SIGMA DIAGNOSTICS 75 CONSIGNES SUPPLÉMENTAIRES 90 LABORATOIRE 5 – EXTRACTION ET SÉPARATION DES LIPIDES (INDIVIDUEL) 92 LABO 5A) EXTRACTION DES LIPIDES 92 PRINCIPE 92 PROTOCOLE 5A 92 PRÉLAB 5A 93 LABO 5B) CHROMATOGRAPHIE DES LIPIDES (EN DÉMONSTRATION) 94 PRINCIPE 94 PROTOCOLE 5B 97 PRÉLAB 5B 101 ANNEXE 5.1 – MIGRATION DES ÉTALONS PAR CCM 103 LABORATOIRE 6 – DOSAGE DE L’OVALBUMINE (2H + 30MIN + 3H) 105 6A – DOSAGE DES PROTEINES TOTALES DU BLANC D’ŒUF (INDIVIDUEL) 105 6B – PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L’ELECTROPHORESE (COMBINE AU LABO 7, PORTION INDIVIDUELLE ET PORTION EN EQUIPE) 106 6C – ÉLECTROPHORÈSE DES PROTÉINES DU BLANC D’ŒUF (EN ÉQUIPE) 107 PROTOCOLE 6A - DOSAGE DES PROTÉINES DU BLANC D’OEUF 112 PROTOCOLE 6B – PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS (COMBINÉ AU LABO 7) 113 4 PROTOCOLE 6C – ÉLECTROPHORÈSE DES PROTÉINES DU BLANC D’OEUF 114 PRÉLAB 6 115 ANNEXE 6C.1 ANALYSE DES RÉSULTATS 116 ANNEXE 6C.2 ILLUSTRATION D'UN GEL LÉGENDÉ ET PROFIL TYPIQUE ATTENDU POUR L'EXPÉRIENCE SUR SDS–PAGE 118 LABORATOIRE 7 – CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE-ÉCHANGE D’IONS (EN ÉQUIPE, MÊME SÉANCE QUE LABO 6B) 119 COLONNE ECHANGEUSE D’IONS 119 PROTOCOLE 7 123 PRÉLAB 7 124 LABORATOIRE 8 – PURIFICATION ET QUANTIFICATION D’ADN 125 DÉMARCHE GÉNÉRALE 125 CAPSULES TECHNIQUES 126 PROTOCOLE 8 126 PROTOCOLE 8A : EXTRACTION DE L'ADN PARTIE 1 126 CETTE PARTIE EST EFFECTUÉE PAR LE TECHNICIEN 126 PROTOCOLE 8B : EXTRACTION DE L'ADN PARTIE 2 126 CETTE PARTIE DÉBUTE VOTRE EXPÉRIENCE 126 PROTOCOLE 8C : ANALYSE DES SOLUTIONS D'ADN PAR SPECTROPHOTOMÉTRIE UV 128 PRÉLAB 8 128 ANNEXE 8.1 128 Intro manuel de lab 5 Manuel de laboratoire, Éléments de biochimie (210-102-AH) Élaboré par Éric Athlan, Dominique Eymery, Chantal Racine(<A11) et Douce Michaud (A17) CAHIER DE LABORATOIRE Étant donné que dans un laboratoire, chaque membre du personnel technique est tenu de garder à jour un cahier de laboratoire, il est indispensable que les étudiants aient une formation à ce sujet. Il est à noter le cahier est un outil, et que les éléments demandés ne constituent pas du travail supplémentaire au laboratoire, mais bien une méthode de travail qui permet d’être plus efficace et de mieux suivre les normes du milieu de travail. Fonctions du Cahier de laboratoire : - Refaire la technique ultérieurement, particulièrement après une longue période d’arrêt - Permettre à un autre membre du personnel de reproduire la même expérience - Permettre au superviseur de rédiger la section « matériel et méthodes » d’une publication scientifique - Retrouver le contenu des échantillons expérimentaux par leur code de numérotation ou d’étiquetage - Faciliter l’identification d’une erreur technique - Permettre de retracer les échantillons affectés par un réactif périmé ou une solution mal préparée. - Régler certains litiges concernant la date et le détail du travail accompli, notamment durant les demandes de brevet Étant donné l’importance légale que peut avoir cet outil, un cahier mal tenu pourrait faire perdre un brevet à la compagnie pour laquelle vous travaillez, et ainsi, vous valoir un congédiement. C’est pourquoi nous souhaitons vous inculquer une grande rigueur dès maintenant afin que la tenue de cahier de laboratoire soit rendu un automatisme pour vous, une fois sur le marché du travail. Ainsi, par analogie, si vous ne respectez pas les normes de base du cahier de laboratoire BPL (avec un peu de droit à l’erreur, quand même!), le congédiement prendra la forme, dans le contexte pédagogique, d’un échec pour l’évaluation du cahier. CONTENU Le contenu exigé au collège est différent de ce qui sera demandé dans un contexte de travail, essentiellement parce que nous vérifierons la compréhension et que nous ferons certaines concessions dans un but pédagogique. De plus, dans un contexte industriel, le cahier de laboratoire peut servir à des fins légales, notamment dans les disputes de brevet, et est donc soumis à des règles beaucoup plus strictes que ce que nous faisons ici. Notez aussi que pour les entreprises soumises aux normes ISO, la tenue du cahier de laboratoire est encore plus règlementée. Le cahier de laboratoire sera corrigé par les pairs à deux moments au cours de la session. Consultez votre plan de cours pour connaître les dates! 6 TRAVAIL ASSOCIÉ AUX LABORATOIRES AVANT LE LABORATOIRE – LA PRÉPARATION Le temps disponible pour les séances de laboratoire est limité et les protocoles sont conçus pour des étudiants techniquement novices mais ADÉQUATEMENT PRÉPARÉS. À titre de préparation pour cette séance, vous devrez donc vous assurer de bien préparer votre cahier de laboratoire (voir p.7-10 pour la description du contenu), ce qui consiste à : 1) Rédiger le titre de l’expérience (un complet pour la 1re page du labo, un abrégé ensuite) (voir exemples p.20) 2) Mettre à jour la table des matières 3) Rédiger le but de l’expérience 4) Écrire le nom des paramètres expérimentaux (sans les paramètres supplémentaires comme le pH ou la [ ] qui pourraient varier au labo) qui seront à noter au cours de la séance, en regroupant les solutions ensemble, les instruments ensemble et les poudres ensemble (1re page de gauche). o Il est fortement suggéré de laisser une ligne libre entre chaque paramètre afin de pouvoir adéquatement compléter les informations manquantes. Suivre l’aide-mémoire de la page précédente. 5) Énoncer les principes théoriques associés à la compréhension des instruments ou méthodes utilisés, des réactions chimiques et de leurs résultats attendus, etc. dans la section « Principe » o Les questions « prélaboratoire » sont, la plupart du temps, des guides pour remplir cette section (parfois, il s’agit plutôt de calculs préliminaires ou autre). Consultez les portions théoriques associées à chaque labo pour vous aider à répondre aux questions. o Au début de la session, vous serez dirigés pour faire votre principe (la section prélab). Plus la session avancera, plus vous serez laissés à vous-même pour cette section! 6) Faire un organigramme des opérations o Un organigramme est un assemblage de schémas numérotés reliés par des flèches représentant la séquence des manipulations du protocole. Nul besoin d’être un artiste : un spectrophotomètre peut être représenté par un simple carré identifié « spectro ». o Toute information critique doit être incluse (temps ou température d’incubation, vitesse de centrifugation, etc). Les tableaux et exemples de calculs préalables doivent être intégrés à l’organigramme. o Notez qu’aucun collage de protocole textuel ne sera accepté. De plus, le manuel de laboratoire ne sera pas permis au laboratoire : votre organigramme doit donc être autoportant et clair (compréhensible par n’importe qui!). Au besoin, le protocole de l’enseignante sera disponible pour une brève consultation. o N’oubliez pas d’inscrire la référence du protocole, si ce n’est pas déjà fait (voir exemple déjà fait pour le labo 1). o De plus, un petit espace sous le titre de la rubrique « Organigramme » devra être réservé uploads/Science et Technologie/ manuel-de-laboratoire-h2018.pdf