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Methode danalyse Chapitre IV Electrophorèse Introduction L'électrophorèse est une méthode d ? analyse et de séparation de particules chargées électriquement par migration di ?érentielle sous l'action d'un champ électrique Selon la nature de particules on

Chapitre IV Electrophorèse Introduction L'électrophorèse est une méthode d ? analyse et de séparation de particules chargées électriquement par migration di ?érentielle sous l'action d'un champ électrique Selon la nature de particules on distingue L ? ionophorèse les particules chargées sont des ions minéraux ou organiques cations minéraux acides aminés esters boriques d ? oses esters sulfuriques d ? oses L ? électrophorèse proprement dite les particules chargées sont des macromolécules portant des groupements ionisables protéines et les charges sont dues à l ? ionisation des radicaux portés par la molécule géante La cataphorèse les particules qui migrent sont neutres et la charge est acquise par adsorption d ? ions étrangers II-Distribution des charges sur une macromolécule La charge d ? une macromolécule polymère protéine ? etc attire des petites ions de signe contraire dans la phase liquide qui l ? entoure Il en résulte une double couche électrique Modèle de Helmholtz Double couche électrique selon Helmholtz CSi l ? on considère que la surface S ? du solide macromoléculaire porte des charges électriques fortement liées les petits ions positifs attirés par la couche de charge négative se disposent en une surface S ? ? chargée positivement et parallèle à S ? Cette théorie permet d ? expliquer le phénomène d ? électro-endosmose le champ électrique provoque le déplacement du liquide en sens inverse de celui dans lequel le solide se déplace s ? il était libre Les charges ne forment pas une couche assimilables à une surface mais attirées selon les forces de coulomb d ? une part et soumises à l ? agitation moléculaire d ? autre part elle se distribue en une couche di ?use résultant de l ? équilibre de ces deux phénomènes III- Mobilité électrophorétique Scalaire ? Sous l ? action d ? un champ électrique ? la micelle collo? dale se déplace avec une vitesse v v ? ? ? mobilité électrophorétique La mobilité électrophorétique d ? une particule est représentée par sa vitesse de migration dans un champ unitaire ? ?v ? ? ? ? ? v en cm s et ? en V m ? en cm s- V- Par convention ? est précédé du signe de la charge portée par la particule Soit une particule de charge q ? force de coulomb force de frottement Lorsque f F le mouvement de la particule est uniforme dont la vitesse est v vitesse de migration Si l ? on assimile la protéine à une sphère N B Le coe ?cient de viscosité dépend de la température coe ?cient de viscosité v vitesse de la particule r rayon de la sphère CDe cette relation la mobilité d ? une particule migrant dans un champ uniforme dépend de ? Sa charge q ? ?Le rayon r ? ?La viscosité ? La mobilité est une caractéristique de chaque particule il est donc possible d'e ?ectuer une séparation en se basant sur cette propriété III- mesure de la mobilité des particules L ? électrophorèse libre en veine