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Ft emb agar bk056 v6 FICHE TECHNIQUE GELOSE EMB LEVINE CONFIRMATION DE ESCHERICHIA COLI DOMAINE D ? UTILISATION La gélose EMB préconisée originellement par Levine est utilisée pour di ?érencier les entérobactéries notamment Escherichia coli et Enterobacte

FICHE TECHNIQUE GELOSE EMB LEVINE CONFIRMATION DE ESCHERICHIA COLI DOMAINE D ? UTILISATION La gélose EMB préconisée originellement par Levine est utilisée pour di ?érencier les entérobactéries notamment Escherichia coli et Enterobacter aerogenes dans les produits pharmaceutiques les produits cosmétiques les produits alimentaires et les eaux Elle est également utilisée comme milieu de con ?rmation d ? Escherichia coli en cosmétiques La formule-type répond à la composition dé ?nie dans la norme NF EN ISO HISTORIQUE En Holt-Harris et Teague employèrent une association d ? éosine et de bleu de méthylène pour di ?érencier les microorganismes suivant leur aptitude à fermenter ou non le lactose Par la suite Levine modi ?a la formule en supprimant le saccharose et en augmentant la concentration en lactose ce qui permit de di ?érencier aisément Escherichia coli et Enterobacter aerogenes PRINCIPES L ? éosine Y et le bleu de méthylène sont des agents faiblement sélectifs Ils n ? inhibent que partiellement le développement des microorganismes à Gram positif tels que les entérocoques Ces colorants assurent la di ?érenciation entre les germes lactose-positif et les germes lactose-négatif Les coliformes donnent des colonies violettes à brunes tandis que les salmonelles sont incolores transparentes ou ambrées Escherichia coli présente un re et métallique sous lumière ré échie FORMULE-TYPE La composition peut être ajustée de façon à obtenir des performances optimales Pour litre de milieu Peptone pancréatique de gélatine g - Lactose g - Phosphate dipotassique g - Eosine Y g - Bleu de méthylène mg - Agar agar bactériologique g pH du milieu prêt-à-l ? emploi à C ? PREPARATION Mettre en suspension g de milieu déshydraté BK dans litre d ? eau distillée ou déminéralisée Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l ? y maintenir ? Reconstitution g L durant le temps nécessaire à sa dissolution complète ? Stérilisation Répartir en tubes ou en acons min à C Stériliser à l ? autoclave à C pendant minutes Refroidir et maintenir le milieu à - C Bien homogénéiser le acon de façon à oxyder le bleu de méthylène et assurer la mise en suspension homogène du précipité Couler en bo? tes de Petri stériles et laisser solidi ?er sur une surface froide Faire sécher les bo? tes à l ? étuve couvercle entrouvert Rue des Quarante Mines ?? ZAC de Ther ?? Allonne ?? B P ?? Beauvais Cedex ?? France Tél ?? Fax ?? www biokar-diagnostics fr Page sur C MODE D ? EMPLOI Con ?rmation d ? Escherichia coli Cosmétiques NF EN ISO Prélever une colonie caractéristique sur gélose MacConkey et isoler sur la gélose EMB ainsi préparée Incuber à - C pendant à heures NOTE Pour d ? autres applications incuber généralement à heures à C ? Ensemencement En surface ? Incubation à h à - C LECTURE L ? aspect des colonies est le suivant Caractéristiques Microorganismes Colonies violet foncé bombées faiblement con uentes de - mm de diamètre à centre noir étendu à plus des du diamètre Les