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Ldc odc adh1 pdf ère STL Fiche technique n RECHERCHE DE LDC ODC DECARBOXYLASES ET ADH DIHYDROLASE Intérêt La recherche des enzymes - LDC lysine décarboxylase - ODC ornithine décarboxylase - ADH arginine dihydrolase est d ? une grande importance pour l ? i

ère STL Fiche technique n RECHERCHE DE LDC ODC DECARBOXYLASES ET ADH DIHYDROLASE Intérêt La recherche des enzymes - LDC lysine décarboxylase - ODC ornithine décarboxylase - ADH arginine dihydrolase est d ? une grande importance pour l ? identi ?cation des bactéries de la famille des Enterobacteriaceae bacille gram - oxydase - et d ? autres bacilles Gram - Composition milieu semi-synthétique Composant Arginine ou Lysine ou Ornithine Extraits de levure Glucose en faible quantité Pourpre de bromocrésol NaCl pH Quantité g L Rôle Lecture d ? un caractère biochimique Apport de facteurs de croissance vitamines ? Source de carbone et d ? énergie Indicateur de pH Maintien de l ? isotonie Principe Les enzymes ADH LDC et ODC catalysent respectivement la décarboxylation de l ? arginine de la lysine et de l ? ornithine présent dans le milieu ? cette dégradation aboutit à la formation de produits basiques l ? alcalinisation du milieu est révélée par un virage de l ? indicateur de pH le pourpre de bromocrésol à sa teinte basique violette NH R - CH COO - H ? décarboxylase e- dihydrolase R-CH -NH amine CO C ère STL Fiche technique n On opère en milieu anaérobie et contenant une faible concentration de glucose ? l ? acidi ?cation due à l ? utilisation du glucose et l ? anaérobiose sont des conditions favorables à la synthèse des décarboxylases ? dans un premier temps la bactérie dégrade le glucose entra? nant ainsi une acidi ?cation ? dans un second temps si elle possède l ? enzyme correspondante elle utilise l ? arginine ou la lysine ou l ? ornithine entra? nant une alcalinisation du milieu Ensemencement Ensemencer le milieu avec une goutte de suspension bactérienne dense Agiter Si le tube n ? est pas plein le recouvrir par de la vaseline stérile a ?n de placer le milieu en anaérobiose Incuber heures à C le bouchon vissé complètement Lecture Observation Interprétation Conclusion Coloration jaune Il y a eu acidi ?cation du milieu liée à l ? utilisation du glucose mais il n ? y a pas eu réalcalinisation Le substrat arginine lysine ou ornithine n ? a donc pas été dégradé La bactérie ne possède pas l ? ADH ou la LDC ou l ? ODC Elle est dite ADH ?? ou LDC ?? ou ODC - Coloration violette Il y a eu acidi ?cation du milieu liée à la fermentation du glucose PUIS il y eu réalcalinisation du milieu liée à la dégradation du substrat arginine lysine ou ornithine par la bactérie La bactérie possède l ? ADH ou la LDC ou l ? ODC Elle est dite ADH ou LDC ou ODC C ?