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Introduction 11 Rapport de TP chromatographie COSIS MASTER CHIMIE ORGANIQUE AU SERVICE DE L ? INDUSTRIE ET DE LA SANTE SEMESTER Rapport des travaux pratiques de chromatographie CHAOU Chaimaa Encadré par Mr ROMANE ABDERRAHMANE Préparés par ELMOUSAOUI Souka

Rapport de TP chromatographie COSIS MASTER CHIMIE ORGANIQUE AU SERVICE DE L ? INDUSTRIE ET DE LA SANTE SEMESTER Rapport des travaux pratiques de chromatographie CHAOU Chaimaa Encadré par Mr ROMANE ABDERRAHMANE Préparés par ELMOUSAOUI Soukaina Année universitaire CRapport de TP chromatographie COSIS I Introduction Les méthodes HPLC représentent l ? outil de séparation chromatographique le plus courant à l ? échelle analytique ou préparative La transition entre la chromatographique en colonne et l ? HPLC s ? est faite gr? ce à la possibilité de fabriquer des particules de très faible taille - m et de granulométrie homogène qui permettait de réaliser des colonnes très e ?caces impliquant la nécessité d'employer des pompes à haute pression pour pousser les solvants et des tubes résistants pour y mettre les phases stationnaires II Principe de la technique La Chromatographie Liquide Haute Pression ou Haute Performance Est une technique permet de séparer d ? identi ?er et de quanti ?er un ou plusieurs composés qui peuvent être dissous dans un liquide à des concentrations aussi faibles que l'état de traces quelques ppm Les composés à séparer solutés sont mis en solution dans un solvant Ce mélange est introduit dans un solvant ou éluant cela représente la phase mobile Suivant la nature des molécules elles interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire maintenue en place dans un tube appelé colonne chromatographique Cette colonne est ?xée dans un four o? les conditions de température sont déterminées par avance Le mélange à analyser est injecté dans le système chromatographique puis transporté au travers du système chromatographique gr? ce à une pompe à haute pression Les composés en solution se répartissent alors suivant leur a ?nité entre la phase mobile et la phase stationnaire En sortie de colonne gr? ce à un détecteur approprié les di ?érents solutés sont caractérisés par un pic Les analytes qui ont le moins d ? a ?nité avec la phase stationnaire ou une plus grande quantité d'interactions avec la phase mobile quitte la colonne plus rapidement L ? ensemble des pics enregistrés est appelé chromatogramme CRapport de TP chromatographie COSIS Figure principe de fonctionnement de l ? HPLC Les résultats sont connus Les produits sont d ? autant plus longs à sortir que la colonne est longue et large Les pics sont d ? autant plus ?nsque les billes de silice sont petites et régulières et que les chaines alkyles qui les tapissent sont longues les produits sortent d ? autant plus vite que la température le débit et la proportion de solvant organique sont élevés Les cases colorées en blanc sont modi ?ables et les valeurs ?gurant dans les cases bleues résultent d ? un calcul Les solvants organiques utilisés sont Acétonitrile Méthanol Les concentrations des produits tout comme leur coe ?cient de réponse appelé epsilon CRapport de TP chromatographie COSIS III Résultats i In uence de la longueur de la colonne En variant respectivement les longueurs de et cm on obtient les trois chromatogrammes A B et