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Pos ag hiv 1 CERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION Pages DE L ? Ag HIV Applicable le Code P Version Sign val Nom Rédigé par JOFACK BERTHOL Véri ?é par MBEP Christian Validé par Dr ATEBA Ghislaine Date Signatures OBJECTIFS ET PORTÉE a Obje

CERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION Pages DE L ? Ag HIV Applicable le Code P Version Sign val Nom Rédigé par JOFACK BERTHOL Véri ?é par MBEP Christian Validé par Dr ATEBA Ghislaine Date Signatures OBJECTIFS ET PORTÉE a Objectif La réalisation du test de l ? anticorps HIV permet de déterminer si le système immunitaire d ? un patient développe les anticorps spéci ?ques aux antigènes du virus de l ? hépatite b Personnes concernées Personnel de l ? unité des ELISA Domaine d ? application Unité des ELISA RÉFÉRENCES Fiche d ? utilisation du réactif antigène HIV HUMAN TACHES AUTORISATIONS ET RESPONSABILITÉS T? ches Réalisation du test Validation du test Personnes autorisées Responsables Personnels de l ? unité des ELISA JOFACK BERTHOL Personnels de l ? unité des ELISA MBEP Christian et le responsable technique CCERIMED ANALYSES BIOMEDICALES PROCÉDURE DE REALISATION Pages DE L ? Ag HIV Applicable le Code P Version Sign val PRINCIPE Le principe du dosage de l ? antigène HIV repose sur l ? ELISA sandwich double détection d ? antigène et d ? anticorps Des antigènes recombinants spéci ?ques au VIH ainsi que les anticorps monoclonaux dirigé contre l ? Ag p du VIH sont ?xés dans les puits de microtitration au cours de l ? incubation les anticorps spéci ?ques et antigènes présent dans l ? échantillon se ?xent aux antigènes immobilisés ainsi qu ? au conjugué formant des complexes doubles antigène- anticorps ces complexes sont marqués en ajoutant le conjugué après le cycle de lavage pour l ? élimination des composants non ?xés le TMB est ajouté une coloration bleu se forme et vire au jaune à l ? ajout du stop L ? intensité de la coloration est proportionnelle à la concentration d ? Ac- VIH Ag-VIH dans l ? échantillon PROTOCOL DE REALISATION DU TEST ?? PREPARATION DE LA SOLUTION DE LAVAGE Elle se fait en diluant la solution Wash bu ?er avec de l ? eau distillée fraichement préparée NB Ramener les réactifs à température ambiante au moins min avant utilisation ?? MODE OPERATOIRE Ajouter ul du WCON- dilué au dans les puits du control négatif positif et échantillon Ajouter ul du CN CP et l ? échantillon dans les puits recouvrir d ? un ?lm protecteur adhésif et incuber min à c Diluer WCON- au et ajouter ul de la solution diluée dans les puits recouvrir d ? un ?lm protecteur adhésif et incuber min à c Laver fois avec la solution de lavage régler le combis Wash à ul de solution par puits Diluer le SUBSTRAT au et ajouter ul de la solution diluée dans les puits recouvrir d ? un ?lm protecteur adhésif et incuber min à - c à l ? abri de la lumière Ajouter ul du Stop - Lire à nm de densité optique dans les - min qui suivent l ? ajout du stop Si les puits sont doublés ou triplé toujours faire la moyenne des DO pour avoir la