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Ccm et application en medecine

Mardi juin Bechir Djazouli Mahamat i Bios L INTRODUCTION GÉNÉRALE CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE ET APPLICATION EN La chromatographie est une technique de séparationMdEeDsEsCuIbNstEances chimiques mélange homogène liquide ou gazeux qui repose sur des di ?érences de comportement entre une phase mobile courante et une phase stationnaire ou phase ?xe On peut classer les méthodes chromatographiques d'après la nature des phases utilisées ou celle des phénomènes mis en oeuvre dans la séparation Selon la technique chromatographique mise en jeu la séparation des composants entra? nés par la phase mobile résulte soit de leur adsorption et de leur désorption successives sur la phase stationnaire soit de leur solubilité di ?érente dans chaque phase Phase mobile et phase ?xe La phase mobile en chromatographie peut être soit un gaz chromatographie en phase gazeuse la phase mobile est alors appelée gaz vecteur ou gaz porteur soit un liquide chromatographie sur papier couche mince ou colonne la phase mobile est alors appelée éluant La phase ?xe peut être solide ou liquide Les solides silice ou alumine traitées permettent la séparation des composants des mélanges gr? ce à leurs propriétés adsorbantes Ils peuvent être employés comme remplissage d'une colonne chromatographie par gravité et chromatographie à haute performance ou HPLC ou étalés en couche mince sur une plaque de verre d'aluminium ou sur une feuille de matière plastique chromatographie sur couche mince ou CCM La phase ?xe peut aussi être constituée par un liquide imprégnant un support solide ou encore par une cha? ne carbonée ?xée sur un support phase gre ?ée Ainsi en chromatographie sur papier la phase ?xe est formée par l'eau que les molécules de cellulose du papier adsorbent alors qu'en chromatographie en phase gazeuse elle est constituée d'un liquide peu volatil et thermiquement stable imprégnant un granulé poreux Chromatographie sur couche mince CCM Principe de la CCM CLa chromatographie sur couche mince s'e ?ectue généralement sur une ?ne couche de silice phase stationnaire déposée sur un support Le mélange à étudier est ensuite posé à l'aide d'un capillaire à environ cm du bord puis placé dans une cuve contenant l'éluant Le niveau de l'éluant devant être en dessous du produit déposé La cuve de chromatographie est ensuite refermée par un couvercle Pour une meilleure séparation on peut placer un papier ?ltre sur toute la hauteur de la cuve Celui-ci se charge de solvant par capillarité ce qui permet une meilleure saturation de la cuve L'éluant migre sur la plaque de silice par capillarité et entra? ne les composés du mélange étudié Si les vitesses de migration des composés sont di ?érentes ils seront séparés La plaque de chromatographie est ensuite lue directement si les composés sont visibles ou placé sous une lumière UV Ils peuvent également être révélés en pulvérisant une solution d'acide sulfurique puis chau ?é dans une étuve Des plaques avec révélateurs à la uorescéine sont également disponible Placées sous la lumière UV les taches apparaissent sans avoir besoin d'avoir recours à un révélateur Ne pas oublier de tracer le