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Speed ® BIOGRAM Français ...................p. 3 English ...................p.

Speed ® BIOGRAM Français ...................p. 3 English ...................p. 10 2 USAGE IN VITRO UNIQUEMENT BREVET Bio Véto Test Speed® Biogram est un test diagnostic : - pour l’identification des bactéries pathogènes (et levures) responsables des infec- tions bactériennes (et fongiques) dermatologiques, urinaires ou auriculaires, chez le chien et le chat, - pour l’obtention d’un antibiogramme rapide parmi l’arsenal thérapeutique vété- rinaire disponible. Ce test réalisable dans une structure vétérinaire à partir d’un simple prélèvement liquide ou cellulaire, vous propose l’antibiogramme spécifique de l’agent patho- gène bactérien en 24h et l’identification bactérienne en 48 h (fongique en plu- sieurs jours). Cette technologie rapide brevetée prend en compte les effets synergiques ou anta- gonistes des différents agents pathogènes, des facteurs du milieu infecté (antibio- gramme direct) ainsi que la concentration des germes du site infecté (effet inocu- lum). Speed® BIOGRAM est une minigalerie de culture composée de : G 13 puits pour les sensibilités et résistances bactériennes sur 13 molécules anti- biotiques vétérinaires. G 6 puits pour l’identification de la (ou les) bactérie(s) pathogène(s). G 2 puits pour l’identification des levures (Candida/Malassezia). G 3 puits (Brevet BVT) qui vous signalent le délai de lecture pour considérer uni- quement l’antibiogramme de l’agent pathogène et non celui d’un éventuel contaminant. L’un de ces 3 puits se nomme puits IL (Incubation Limite), il est le seul puits à ne pas recevoir le prélèvement. Ce puits contrôle est utilisé comme un signal limitant le temps de lecture de l’antibiogramme. La lecture du puits IL se fait parallèlement à un second puits +/- qui reçoit le prélèvement. Le puits +/- est un puits témoin de croissance des germes dont le virage de couleur correspond à des concentrations bactériennes ≥103 UFC / ml donc à une infection. Les résultats obtenus par Speed® BIOGRAM se lisent puits par puits. Le dévelop- PRINCIPE INTERET CLINIQUE 3 pement bactérien est révélé par un virage de couleur. Il vous indique alors une résistance de l’agent pathogène aux antibiotiques des puits correspondants (pour les 13 puits antibiotiques) et indique le type d’agent pathogène présent (pour les 8 puits d’identification bactérienne). Kit de 5 tests Réf. SB 5 - 5 étuis galeries Speed® BIOGRAM avec étiquette adhésive individuelle - 5 flacons de milieu de conservation - 5 flacons de milieu de culture - 1 flacon de Supplément Staph - 1 flacon d’huile de paraffine - 5 pipettes stériles - 5 supports de galerie pour la BVTuve - 5 feuilles de résultat pour les clients - 1 protocole 1 étuve adaptée (BVTuve) vendue par BVT sur demande. I PRELEVEMENT Tout prélèvement cutané, urinaire ou auriculaire peut être utilisé à la condition qu’il soit obtenu dans des conditions strictes d’asepsie et qu’il ne contient pas d’antiseptiques (Iode, Alcool, Phénol…) ou d’antibiotiques locaux. Sans attendre, déposer le prélèvement délicatement dans le milieu de conserva- tion du kit. Bien homogénéiser le mélange. Vous pouvez conserver ce flacon à T° ambiante (ou pendant 48h entre 4 et 8° C) jusqu’à l’utilisation différée du kit Speed® BIOGRAM. I MANIPULATION 1 - Ouvrir le sachet d’une galerie, inscrire le nom de l’animal et la date sur l‘éti- quette adhésive puis retirer cette étiquette et la coller sur un bord de la galerie pour conserver l’identification des puits. 2 - Prendre un flacon de milieu de culture, déposer à l’aide d’une pipette 3 gouttes de ce flacon dans le puits IL (puits ne recevant pas le prélèvement). 3 - Décharger le prélèvement cellulaire ou 2 gouttes de liquide biologique avec la pipette, dans le milieu de conservation, puis homogénéiser le mélange. 4 - Transférer 4 gouttes du milieu de conservation obtenu après mélange dans le milieu de culture ouvert et homogénéiser. MODE D’EMPLOI PRESENTATION 4 5 - Inoculer les puits de la galerie un par un en déposant 3 gouttes de ce milieu de culture mélangé dans chaque puits, sauf dans le puits IL, à l’aide de la même pipette. 6 - Rajouter dans le puits Staph., 2 gouttes du flacon “ Supp. Staph. ”. 7 - Rajouter 2 gouttes d’huile de paraffine dans chaque puits sauf 2, les puits E. coli et pseudo. 8 - Repositionner l’étiquette adhésive sur la galerie et installer la galerie sur le sup- port en carton prévu. Déposer cet ensemble au centre de la BVTuve branchée, dans le sens transversal pour harmoniser les conditions de T° sur toute la galerie (préférez ce sens au sens longitudinal, parallèle aux 2 bords de la BVTuve). 9 - Utiliser la BVTuve dans une pièce où la T° est contrôlée et homogène (idéal entre 20 et 25 ° C). I LECTURE 1 - Lecture antibiogramme : commencer la lecture du profil antibiotique dans les 18 à 24 heures, au moment du virage de couleur du rouge au jaune du puits IL. Le puits IL vire au jaune et le puits témoin de pousse +/- vire de l’incolore au rouge. Ce virage du puits +/- est caractéristique d’une infection pour une concen- tration de bactéries pathogènes ≥à 103 UFC/ml, dans ce cas la lecture du profil antibiogramme peut être effectuée. 5 Grille antibiotiques de Speed® BIOGRAM Molécules Antibiotiques Amoxicilline Clindamycine Amoxicilline + Ac. clavulanique Fluméquine Céfalexine Spiramycine Enrofloxacine Gentamicine Marbofloxacine Néomycine Difloxacine Polymixine B Doxycycline 6 2- Lecture de l’identification bactérienne et fongique : entre 24 et 48h, lire les puits individuellement pour identifier les virages de couleur et la pousse bacté- rienne. Seul le puits Malassezia ne peut se lire qu’au delà de 3-5 jours d’incuba- tion. Les lectures d’associations sont possibles. Les levures Candida et Malassezia ne montrent pas de profil antibiotique sur la galerie. 7 I INTERPRETATION A chaque lecture du profil de sensibilité et de résistance de la bactérie recherchée, une feuille de résultats vous permet de les recenser pour transmettre l’ensemble de l’antibiogramme au propriétaire de l’animal, associé à votre choix de traitement. Les antibiotiques sont adaptés à des indications précises, dermatologiques, uri- naires ou topiques auriculaires, qu’il faudra choisir selon les résultats de l’antibio- gramme et le type de prélèvement. Pendant la lecture des puits, il est préférable de laisser la galerie sur la BVTuve. Si le puits témoin de pousse +/- ne vire pas au rouge en 18-24 heures d’incubation, laisser incuber 18 à 24h de plus pour confirmation de l’absence totale de germes pathogènes dans le prélèvement. Le kit est stable à 4-8 ° C pendant 14 mois à partir de la date de fabrication (voir date de péremption sur l’étiquette du kit). Il est conseillé de laisser l’ensemble des réactifs et la galerie au moins 15 min à T° ambiante avant utilisation et de vérifier le fonctionnement de la BVTuve au préalable. Il est déconseillé d’utiliser les fla- cons de réactifs de lots différents. Tous les lots sont libérés après contrôle qualité, ils sont conformes aux spécifica- tions requises pour ce test in vitro. STABILITE - CONSERVATION RECOMMANDATIONS 8 (1) PAPIEROK G., LESAINE C., “L’antibiogramme directement à partir d’un prélè- vement, intérêts et limites”, La RICAI (23e Réunion Interdisciplinaire de Chimiothérapie Anti-infectieuse), 4-5 déc. 2003, Paris. (2) MADIN F., “Nouvelles techniques d’analyses microbiologiques rapides utili- sables par et pour le praticien”, congrès CNVSPA Nov. 1995 (3) MADIN F., “A propos d’une otite érythématocérumineuse”, Action vétérinaire N° 1377, 15-18, 11 Oct. 1996. (4) PAPIEROK G. et coll., “The first standardized test for the determination of anti- biotic activity against bacteria in private veterinarian clinic”, 2nd Congress of the Federation of European Companion Animal Veterinary Associations (FECAVA), 27- 29 Oct. 1995, Bruxelles, Belgique. BIBLIOGRAPHIE 9 USE IN VITRO ONLY Bio Veto Test Patent Speed® Biogram is a diagnostic tool for the identification of pathogenic bacteria (and yeasts) responsible of dogs and cats dermatological and bacterial (and fun- gus) infections, and urine or auricular infections. It allows obtaining a quick antibiotic susceptibility testing among the veterinarian therapeutic antibiotics available. This test, realizable in a veterinarian structure, is obtained directly from a liquid or a cellular sample. Within 24 hours, it suggests you the specific antibiotics to use for the pathogen bacterial agent, and identifies the bacteria within 48 h (fungus in several days). This rapid patented technology takes into account the synergistic or antagonist effects of the different pathogen agents, of the infected environment factors (direct antibiogram) and the concentration of the infected site germs (inoculum effect) Speed® BIOGRAM is a micro-tray culture containing: - 13 wells for sensitivities and bacterial resistance for 13 veterinarian antibiotic molecules. - 6 wells for the identification of the pathogen(s) bacteria. - 2 wells for the identification of yeasts (malassezia / candida) - 3 wells (BVT Patent) which points out the reading delay to consider the pathogen agents’ antibiogram (and not the antibiogram of an eventual non pathogen agent) One of these 3 wells is called I.L well (Incubation Limit), it is the only well that doesn’t receive the sample. This control well is considered as a signal, which limits the reading time of the antibiogram. I.L well reading is made concurrently to a second +/- well, which receive the sample. +/- Well is a reference solution for the uploads/s3/ speed-biogram.pdf