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Cours spectrophotometrie 2018 a tirer

CC Mme Moulahoum A ANuP A Mme Zerrouk F ANuP B Tech LAB SPECTROPHOTOMETRIE UV-VISIBLE Introduction La spectrophotométrie est une méthode analytique quantitative et qualitative permettant la mesure de l ? absorbance ou la densité optique d ? un échantillon en solution l ? absorbance est d ? autant plus importante que la concentration de l ? échantillon est élevée dans les limites de proportionnalité énoncées par la loi de Beert Lambert Chaque échantillon possède une longueur d ? onde d ? absorption qui lui est spéci ?que et dont la densité optique est lu sur un spectrophotomètre préalablement étalonné à cette même longueur d ? onde Principe La capacité qu ? aurait une substance donnée à absorber un faisceau de lumière monochromatique d ? intensité Io ? traversant un trajet optique l ? de cm une partie de cette lumière est absorbée par la substance en solution L ? intensité de lumière transmise I ? transmise est donc inférieure à Io On dé ?nit alors l ? absorbance de la solution A On parle aussi de transmittance dé ?nie par la relation C ? est-à-dire que L ? absorbance est une valeur positive sans unité Elle est d ? autant plus grande que l ? intensité transmise est faible La relation de Beer-Lambert décrit que à une longueur d ? onde ? donnée l ? absorbance d ? une solution est proportionnelle à la concentration des espèces de la solution et à la longueur du trajet optique distance sur laquelle la lumière traverse la solution Ainsi pour une solution limpide contenant une seule espèce absorbante CCC Mme Moulahoum A ANuP A Mme Zerrouk F ANuP B Tech LAB DO est l ? absorbance ou la densité optique de la solution pour une longueur d'onde ? en mol l- est la concentration de l ? espèce absorbante en cm est la longueur du trajet optique en mol- L cm- est le coe ?cient d ? extinction molaire de l ? espèce absorbante en solution Il rend compte de la capacité de cette espèce à absorber la lumière à la longueur d ? onde ? Les conditions d ? application de cette technique Les limites de validité d ? application de la loi de Beert Lambert sont Le domaine de mesure idéal est pour les valeurs de T situées entre et Il faut un faisceau de lumière monochromatique Eviter les phénomènes de ré exion et de di ?raction de la lumière car peuvent fausser la mesure Les phénomènes de uorescence ainsi que d'autres particularités chimiques liées aux espèces absorbantes peuvent interférer La concentration de la solution une solution doit être diluée Plus la densité du soluté est importante plus le faisceau de lumière incident sera réfracté avec une valeur donnée Ainsi la réfraction réduit l'intensité de la lumière transmise et l'instrument indique faussement une absorbance diminuée ou élevée Généralement ce phénomène peut être évité en travaillant avec des concentrations inférieures à mol l- Terminologie en spectrophotométrie UV-Visible Groupement Auxochrome groupement saturés