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Cr tp purification ii final

METTHEY Nathana? lle M TVIA PAVEL Andreea SUCIU Iuliana NACEUR Lynda MEGLOULI Hacène DAHMANE Ismahane TP Puri ?cation II Extraction solide-liquide des composés phénoliques à partir des fruits de caroube I Introduction Le but de ce TP est de déterminer les conditions optimales pour l ? extraction de polyphénols à partir des cosses de caroube Les di ?érents paramètres testés sont l ? agitation la température les solvants le rapport poids de l ? échantillon Volume de solvant et en ?n l ? utilisation de cosses ou de graines Les extraits sont ensuite analysés par les méthodes de Folin et DPPH pour déterminer l ? activité anti-oxydante ainsi que pour mesurer les phénols totaux II Matériels et Méthodes Procédé d ? extraction Nous avons utilisé un système de chau ?age à re ux pour extraire les polyphénols Après avoir pesé une masse d ? échantillon nous l ? avons introduite dans le ballon posé sur le chau ?e-ballon Nous avons ensuite introduit le solvant choisi puis nous avons ?xé la colonne réfrigérante et mis en route l ? alimentation en eau et le chau ?age Nous avons laissé le montage en place une heure à partir du début d ? ébullition puis nous avons laissé refroidir le ballon Nous avons ensuite prélevé mL d ? échantillon que nous avons centrifugé minutes à g et C pour éliminer les molécules non solubles Le surnageant a ensuite été analysé Pour les expériences sur l ? in uence de l ? agitation les solutions n ? ont pas été chau ?ées Matériel CEau Ethanol à Colonne réfrigérante Agitateur magnétique Chau ?e ballon Folin Solution de carbonate de sodium DPPH Verrerie Echantillons testés N Echantill on Graines Solvant Eau Ethanol Eau Ethan ol Eau Eau Eau Ethan ol Eau Eau m éch V solvan t Températ ure Ebullition Ebullition Ebullition Ambiante Ambiante Ebullition Ebullition Ebullition Agitatio V solvant M n mL échantillon g Oui Oui Oui Oui Non Oui Oui Oui Eau EtOH Eau EtOH Techniques d ? analyse ? Matière sèche Cette technique permet de déterminer le rendement de l ? extraction choisie On utilise alors un dessicateur ? Activité anti-oxydante On mesure l ? activité anti-oxydante ou acticité antiradicalaire par la méthode de DPPH Pour ce faire on utilise le DPPH qui est un donneur d ? électron et qui permet de mesurer la capacité d ? un composé à capter des radicaux libres Cette réaction entraine un changement de couleur qui se traduit par un changement d ? absorbance C ? Phénols totaux On utilise la méthode de Folin qui mesure l ? absorption des polyphénols présents On utilise ensuite une courbe étalon établie avec de l ? acide gallique Cette technique permet d ? évaluer la pureté des extraits plutôt la concentration des phénols totaux III Résultats ? Matière sèche Echantillo n Caroube Graine Matière sèche Rendement Rendement matière sèche échantillon matière sèche référence caroube ou graine x Nous pouvons remarquer qu ? avec l ? eau seule le rendement