RECHERCHE D’HEMOLYSINE ALPHA ET BETA CHEZ LES DONNEURS DE SANG AYANT SUBIT UNE

RECHERCHE D’HEMOLYSINE ALPHA ET BETA CHEZ LES DONNEURS DE SANG AYANT SUBIT UNE TRANSFUSION SANGUINE INDRODUCTION GENERALE Le système de groupe sanguin ABO est caractérisé par les anticorps sériques naturels. Il existe, en plus et en réponse à certains stimuli, des anticorps immuns encore appelés hémolysines en raison de leur pouvoir hémolysant. Chez les donneurs de sang, ces hémolysines peuvent induire des hémolyses parfois importantes lorsque le sang est transfusé en compatible non iso-groupe. Nous avons voulu situer le taux des hémolysines dans notre population afin de prédire de l’intérêt de la systématisation de leur recherche chez tous nos donneurs de sang. Les anticorps sériques naturel sont constamment présent et correspondent aux antigènes absent a la surface des hématies. Elles sont dites réguliers, de nature IgM dont l’optimum thermique est de 4o C. Cependant il existe des anticorps anti érythrocytaires anti A et anti B dite irréguliers, donc immun qui proviennent soit de l’allo immunisation (cas de poly transfusion non iso groupe et de grossesse ABO incompatible), ou encore hétéro immunisation.(cas des vaccination). Ces anticorps immun sont responsables de la destruction complet du complément d’où l’action hémolysant. On parlera donc ainsi d’hémolysine. Ces dernières sont caractérisées par un maximum d’activité à 37°C et sont surtout de 1. PROBLEMATIQUE 1.1. Contexte et justification de la recherche La distribution et la fréquence des antigènes érythrocytaires dépendent de la population. La transmission des caractères génétiques des groupes sanguins suit les règles de génétique mendélienne. Les individus polytransfusés du groupe O peuvent développer des anticorps irréguliers de type IgG qui sont capable de lysés les hématies lors d’une incompatibilité. Contrairement aux anticorps anti A et anti B naturels, les anticorps immuns sont fortement hémolysants car ils sont capables de déclencher la cascade complète du complément. On parle ainsi d’hémolysines. Ces dernières sont caractérisées par un maximum d’activité à 37°C et sont surtout de nature IgG. C’est pourquoi, ces anticorps doivent être recherchés dans le cadre du diagnostic d’inclusion ou d’exclusion devant une transfusion sanguine dans le système ABO incompatible. 1.2.Problème de l’étude Les antigènes A et B ne sont pas présents uniquement à la surface des globules rouges, mais aussi sur de nombreuses autres cellules. Le système ABO est considéré principalement comme un groupe tissulaire. Le développement d’anticorps immuns anti-A ou anti-B chez un individu peut etre produit : - soit par allo-immunisation par voie transplacentaire lors d’une grossesse antérieure ou après une transfusion ; - soit par hétéro-immunisation après contact avec des agents de l’environnement portant les substances A et B ou ayant une communauté antigénique avec ces substances. Ce dernier processus d’hétéro-immunisation explique pourquoi la maladie hémolytique peut aussi bien se développer chez une femme primipare que multipare. Il se pose donc le problème des facteurs de risques associés à la présence et au titre élevé d’hémolysines. 1.3. Questions de recherche - Quelles sont la fréquence et le titre des hémolysines anti-A et anti-B chez les donneurs de sang camerounais à l’hôpital Saint Luc de Mbalmayo? - Quels sont les facteurs de risque associés à la présence d’hémolysines et à un titre élevé ? 1.4.Objectifs de la recherche 1.4.1. Objectif général Déterminer la fréquence et le titre des hémolysines anti-A et anti-B chez les donneurs camerounaises du groupe O à l’hopital Saint Luc de Mbalmayo. 1.4.2. Objectifs spécifiques - déterminer la fréquence des antigènes érythrocytaires dans les systèmes de groupes sanguins érythrocytaires ABO et Rhésus chez les donneurs. - Déterminer la fréquence et titrer les hémolysines anti-A et anti-B chez les donneurs. - Identifier les facteurs de risque associés à la présence des hémolysines et à un titre élevé. - Diminuer les incidence hémolytique. - Montre l’importance d’une recherche systematique des hemolysine avant une transfusion sanguine. 1.5. GENERALITES Aucune étude n’a encore été faite sur l’ampleur de l’allo-immunisation chez la femme en période du post-partum dans cet hôpital. Les résultats obtenus permettront de connaitre la fréquence de cette affection et les facteurs de risques associés à l’allo-immunisation dans le système ABO d’une part, le risque potentiel d’apparition de la maladie hémolytique chez les enfants de ces mères d’autre part. Pour mieux comprendre le thème de cette recherche intitulé dépistage et titrage des hémolysines anti-A et anti-B chez les donneurs.il nécessaire de définir et d’analyser les différents cmot cles de cette recherche; il s’agit de : - Titrage : Le titrage est une technique de dosage utilisée en chimie analytique afin de déterminer la concentration d'une espèce chimique en solution (ou titre d'une solution). - Hémolysines anti-A et anti-B : Ce sont des anticorps immuns anti-A et anti-B qui apparaissent chez certains sujets à la suite d’une stimulation antigénique (grossesse ABO incompatible, transfusion des produits dérivés du sang, infections bactériennes, etc.). Ce sont des anticorps de classe IgG qui peuvent passer à travers la barrière foeto-placentaire et provoquer la lyse des hématies fœtales. - Période du post-partum : Le post-partum est la période qui va de l’accouchement jusqu’au retour de couches, c’est-à dire aux premières règles normales ; il est marqué par la disparition progressive des modifications de l’organisme liée à l’état gravidique. Cette période englobe deux phases à risque différentes :  le post-partum immédiat couvrant les 10 premiers jours suivant l'accouchement.  le post-partum tardif est de délai variable, en fonction de l'allaitement ou d'une évolution pathologique. La fin de cette période est marquée par le retour de couches (retour des règles). 2. METHODOLOGIE 2.1. Cadre de l’étude 2.1.1. Type d’étude Pour atteindre les objectifs de cette recherche une étude prospective et descriptive sera menée chez les femmes en période du post-partum et chez leurs enfants (nouveaux-nés). 2.1.2. Période et durée de l’étude Cette étude est prévue s’étendre sur une période de 4 mois, du 01 Septembre 2011 au 31 Décembre 2011. 2.1.3. Lieux de l’étude L’étude se déroulera dans les services d’hématologie et transfusion sanguine et de Gynécologie et Obstétrique du CHU de Yaoundé. 2.1.4. Echantillonnage 2.1.4.1. Taille de l’échantillon En considérant l’hypothèse selon laquelle, la fréquence des hémolysines chez les mères en période périnatale est supérieure à 20%, nous allons considérer P= 20%. En prenant la formule de LORENTZ : 2 2 . . N= Z P q I  avec : N : taille de l’échantillon, P : prévalence des hémolysines anti-alpha et anti-bêta chez les mères en période périnatale, q : 1-p, évènement contraire, Zα : valeur de distribution normale qui correspond à un seuil de précision de 95% (Zα = 1.96), I : erreur sur la précision : 5%, En calculant, trouve : N= (1,96)2. 0.2 (1-0,2)/ (0,05)2= 245,8624 Ainsi, la taille de l’échantillon sera fixée à 246 femmes en période postpartum. 2.1.4.2. Population cible Toute femme en postpartum. 2.1.4.3. Critères d’inclusion - Toute femme ayant accouché il y a moins de 45 jours, - Elle doit être de groupe sanguin O, A et B, 2.1.4.4. Critères d’exclusion - Toute femme primipare, - Toute personne non consentante, - Femme de groupe sanguin AB. 2.2. Matériel et réactifs 2.2.1. Matériel de prélèvement Le matériel nécessaire au prélèvement au cours de cette étude est : - gants à usage unique, - de l’alcool à 70°, - des tubes EDTA pour le groupage ABO et Rhésus, - des tubes secs pour la recherche des hémolysines, - du coton, - un garrot, - des bandes adhésives, - des portoir de tubes, - un conteneur d’objets tranchants. 2.2.2. Matériel d’analyses - 02 pipettes de 20 à 200 µl et de 100 à 1000 µl, - des embouts de 200 µl et des embouts de 1000 µl, - tubes à hémolyse pour suspension, - des stylos à bille, - du papier hygiénique, - de l’eau physiologique. - Incubateur 37°c ou bain-marie, - Poupinel, - Centrifugeuse - Réfrigérateur - Congélateur 2.2.3. Réactifs - Les réactifs utilisés lors de l’étude sont : - les suspensions globulaires d’hématies lavées, - des coffrets de réactifs pour le groupage sanguin ABO et Rhésus, - le sérum dépourvu d’anti-A et d’anti-B pour le complément. 2.3. Procédures 2.3.1. Recrutement des participants Le recrutement des participants se fera au chevet du lit des patientes dans le service de Gynécologie et d’Obstétrique, ainsi que dans la salle de vaccination pour les mères qui reviennent quelques jours après l’accouchement vacciner leurs enfants. Cela se fera à l’aide d’une fiche technique comportant un questionnaire. Ce questionnaire devra contenir entre autres le nom et prénom du patient, l’âge, le sexe, l’ethnie, le nombre de grossesses, le nombre d’accouchements, le groupe sanguin des parents et des enfants, l’âge de l’enfant pour l’essentiel. 2.3.2. Le prélèvement Toute femme remplissant les critères d’inclusion sera prélevée ainsi que son enfant. Les échantillons de sang seront prélevés dans deux tubes pour chaque mère : un tube EDTA pour le groupage sanguin et rhésus et un tube sec pour la recherche d’hémolysines. 2.3.3. Réalisation des tests Les prélèvements seront centrifugés à 3000 trs/min pendant 3 minutes. Le surnageant des tubes secs sera décanté et aliquoté dans les cryotubes et congelé à – 20°C pour la recherche d’hémolysines. 2.3.3.1. Groupages sanguins et Rhésus  Principe La détermination des groupes sanguins est uploads/Histoire/ classe-prepa-projet.pdf

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• Publié le Mai 24, 2022
• Catégorie History / Histoire
• Langue French
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