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INTRODUCTION Le développement embryonnaire est la transformation de la cellule

INTRODUCTION Le développement embryonnaire est la transformation de la cellule œuf en embryon, ce dernier acquérant finalement la capacité de mener une vie autonomie. Chez la poule, il commence dès la fécondation dans l’infundibulum jusqu’à l’éclosion. L’objectif de ce TP est de maitriser les techniques d’incubation, et d’éclosion des œufs de poule au laboratoire, de suivre et de décrire les différentes étapes de leur développement. Sachant que le développement de l’œuf de poule dure 21 jours, à travers ce TP nous allons décrire l’évolution et les modifications des éléments dans l’œuf depuis le premier jour l’incubation jusqu’à l’éclosion de l’œuf. MATERIELS ET METHODES I. MATERIELS 3630 œufs incubés Un incubateur Un bac pour la dissection Une pince fine Un mire œuf II. METHODES REGLAGE DE L’INCUBATEURS Un incubateur est un dispositif permettant de maintenir des œufs dans un environnement qui permet leur développement. L’œuf pour se développer a besoin de chaleur, d’air, d’humidité et de mouvements que sera chargé de lui fournir l’incubateur. Il est équipé de plateaux blancs (bac à incubateur) sur lesquels sont disposés les œufs dont les petits bouts orientés vers le bas ; d’éclosoire (bac jaune) dans lequel sera recueillit les poussins. L’incubateur se chargeait de retourner automatiquement les œufs toutes les heures avec un angle de 900 pour éviter l’adhésion des membranes embryonnaires et de la Figure1 : photo de l’incubateur Coquille au stade précoce de l’incubation puis permettre à l’embryon de prendre la bonne position pour l’éclosion au Stade avancé de l’incubation. Notons cependant que les œufs ne sont pas retournés les 2 premiers jours et les 2 derniers jours de l’incubation. Pendant les 18 premiers jours de l’incubation, la température était réglée à 37.70C avec une humidité de 55% ; du 19ième au 21ième jour d’incubation, elle a été ramenée à 37.40C avec une humidité de 60% à cause de l’exothermie des œufs. L’aération constitue le moyen de renouveler constamment l’air au sein de l’incubateur ; la ventilation quant à elle consiste à rendre homogène la température dans les moindres recoins de l’incubateur. DISSECTION Elle à été pratique à chaque séance d’observation. A chaque séance de TP avant toute dissection, on mire les œufs pour séparer les œufs fécondés des œufs non fécondés. Les œufs fécondés présentent deux phases (claire et sombre) alors que les œufs non fécondés présentent une seul phase claire. Apres mirage on procède à la dissection : A l’aide d’une pince fine, on casse l’œuf avec délicatesse par le gros bout en enlevant la partie démilitant la chambre à air. L’œuf ainsi ouvert, on peut observer l’intérieur et ensuite verser le contenu dans le bac pour une meilleure observation. RESULTATS ET INTERPRETATIONS Nous avons effectué six séances d’observations : les 4è, 7è, 11è, 14è, 20è et 21è jours d’incubation. Nos observations ont débutés au 4è jours d’incubation mais bien avant ça, il s’est produit des évènements qu’il ne faut pas négliger. Au premier jour, on a la mise en place du nœud de hensen suivi de la formation du feuillet mésodermique et du tube neural ; au jour 2, on a le début de la formation du cœur qui commence à battre à partir de la 42è heures d’incubation et le début de la formation de l’oreille interne et au jour 3 on a le début de la pigmentation de l’œil.  Au jours 4, la dissection nous a permis d’observer la membrane coquillière externe blanchâtre, une chambre à air étroite (car l’œuf contient beaucoup d’eau)( figure 2), une membrane coquillère interne transparente laissant voir les capillaires sanguin et un cœur qui bat(présence de vie)(figure2). Après avoir enlevé la membrane coquillère interne et verser avec délicatesse le contenu de l’œuf, on observe une quantité abondante d’albumen liquide mélangé au vitellus à cause de la fragilité de la membrane vitelline ; l’albumen visqueux ; un réseau de capillaire sanguin convergeant vers le cœur ; un embryon en forme de croissant avec les yeux noirs au niveau de la partie céphalique (figure3). Notons que les annexes embryonnaires ne sont pas parfaitement visibles au jour 4. La coquille reste vide après avoir versé tout le contenu de l’œuf dans le bac. Figure 2 :dissection de l’oeuf Figure 3 : Après avoir versé le contenu de l’oeuf  Au jour 7, la dissection de l’œuf nous a permit d’observer la membrane coquillière externe blanchâtre avec une augmentation du volume de la chambre à air par rapport au jour 4 à cause de la perte en eau de l’œuf à travers les pores de la coquille ; la membrane coquillaire interne qui s’est épaissie et qui laisse toujours voir les capillaires sanguins(Figure 4). Après avoir enlevé la membrane coquillaire interne, on constate que le réseau de capillaires sanguins est plus dense et plus visible qu’au jour 4 (figure 5) et après avoir versé avec délicatesse le contenu de l’œuf, on constate que les quantités d’albumen et du vitellus ont diminués par rapport au jour 4 (Figure 7) ;cette diminution du vitellus est due à la perte d’eau alors que celle de l’albumen est due au fait qu’une partie ait servit de nutriment pour l’embryon.Contrairement au jours 4 où le vitellus était mélangé à l’albumen liquide,on distingue nettement à ce jour ces deux éléments.Cela s’explique par le fait que la membrane vitelline est devenue un peu plus rigide mais elle s’est difficillement rompue et on a eu un mélange entre vitellus et Capillaires Coquille Embyon Cœur qui bat Albumen dense Membrane vitelline Embryon Albumen liquide mélangé au vitellus Chambre à air étroite albumen liquide dont la coloration est moins jaunâtre. les autres annexes embryonnaires( amnios ; complexe chorio-allantoidien) qui n’étaient pas visibles au jour 4 sont maintenant parfaitement visibles (Figure 7). L’amnios qui entoure l’embryon est remplie avec le liquide amniotique dont le rôle est de protéger l’embryon ; le sac allantoidien lui joue un rôle important dans la respiration, l’absorption calcique et le stockage des déchets. Après avoir déchiré l’amnios(Figure 8), on observe l’embryon avec la partie céphalique bien dévéloppée laissant voir les ébauches de l’encéphale( lobe olfactif, tubercule bijumaux, lobe optique, cervelet, bulbe rachidien) ; des yeux plus gros q’au jour 4 ; l’apparition des ébauches du cou, des ailes, des pattes et du croupion.Notons qu’une partie de l’albumen dense est restée collée à la coquille(Figure 6). Figure 4 : membrane coquillière interne Figure 5 : capillaires sanguins Figure 6 : Albumen dense resté Plus épaisse plus dense collé à la coquille Figure 7 : Après avoir versé le contenu de l’œuf Figure 8 : Embryon hors de l’amnios Sac vitellin Albumen liquide Membrane chorio-allantoïdienne Embryon dans l’amnios Albumen dense Ebauche du bec Yeux Ébauche des membres  La dissection nous a permis d’observer au jour 11 une membrane coquillère externe plus blanchâtre et une augmentation du volume de la chambre à air par rapport au jour 4 à cause de la déshydratation de l’œuf ; La membrane coquillère interne est devenue opaque (figure 9). Après avoir enlevé cette membrane, on observe l’albumen liquide et un réseau de vaisseaux sanguins plus dense qu’aux jours précédents (Figure 10). On verse ensuite délicatement le contenu de l’œuf (Figure 12) et on observe la sortie successive de l’albumen liquide, de l’amnios contenant le liquide amniotique dans lequel beigne l’embryon, du vitellus contenu dans la membrane vitelline dont la paroi est parcourue par la membrane chorio-allantoïdienne, et de l’albumen dense de couleur jaune-clair. Les volumes des réserves (albumen, vitellus) ont diminué alors que l’amnios et son contenu ont augmenté de volume par rapport au jour 7. Le vitellus est devenu plus visqueux et a perdu un peu plus sa coloration. Le sac vitellin est devenu plus rigide car cette fois on n’a pas de mélange entre albumen et vitellus. Pour mieux observer l’embryon, on déchire la paroi de l’amnios et on libère l’embryon (Figure 13). Ce dernier ressemble plus à un poussin qu’aux jours précédents. En effet on a le développement du bec avec l’apparition d’une excroissance à son bout appelée diamant (ce denier va permettre au poussin de casser la coquille lors de l’éclosion) ; La partie céphalique a commencé à s’ossifier ; l’apparition de paupières au niveau des yeux ; l’oreille externe est bien visible ; la tête est séparée du tronc par un cou bien différencié. L’embryon a aussi des ailes bien formées et des pattes bien articulées portant chacune des duvets et 4 doigts avec des griffes. On note déjà l’apparition de l’anus sous le croupion et la présence de duvets sur le corps de l’embryon. Notons qu’après avoir versé le contenu l’œuf, une partie de l’albumen visqueux et de l’allanto-chorion sont restés coller à la coquille (Figure 11). .  Figure 9 : Membrane coquillière Figure 10 : Réseau de capillaires Figure 11 : Albumen et allanto- chorion Interne opaque sanguins plus dense collés à la coquille  Lors de la dissection au jour 14, on observe la membrane coquillière externe plus dure, l’augmentation du volume de la chambre à air, la membrane coquillière interne plus opaque qu’au jour 11(figure14); lorsqu’on enlève uploads/Litterature/ introduction-repare.pdf