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Département fédéral de l’intérieur DFI Office fédéral de la santé publique OFSP

Département fédéral de l’intérieur DFI Office fédéral de la santé publique OFSP Manuel suisse des denrées alimentaires 121.1. Dosage du phosphore du lait Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 2/7 Table des matières I Résumé ...............................................................................................................................3 II Description de la méthode.................................................................................................4 1 Principe ................................................................................................................................4 2 Réactifs ................................................................................................................................4 3 Equipement ..........................................................................................................................4 4 Mode opératoire ...................................................................................................................4 4.1 Désagréation ........................................................................................................................4 4.2 Réaction colorée et mesure..................................................................................................5 4.3 Fablissement de la courbe étalon .........................................................................................5 4.4 Essai à blanc ........................................................................................................................5 5 Calcul et expression des résultats ........................................................................................5 6 Appréciation..........................................................................................................................5 7 Bibliographie.........................................................................................................................6 III Chronique des modifications ............................................................................................7 Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 3/7 I Résumé Titre Dosage du phosphore du lait Principe de mesurage Photométrie Numéro de la méthode 121.1. No. Avant 2006 1/8.1 Analyte Phosphore Matrice Lait Abrégé Le lait est soumis à une minéralisation au moyen d'acide sulfurique et de peroxyde d'hydrogène. On dose ensuite le phosphore par pho- tométrie, à 820 nm sur la base du bleu de molybdène obtenu par réaction avec du molybdate de sodium et de l'acide ascorbique comme réducteur. Domaine de mesure – Limite de détection – Limite de détermination – Données de validation Non Commentaires sur la validation – Statut de la méthode Recommandé Dernière modification en 2008 Méthode de base – Remarques Alternative: ISO 9874: Lait - Détermination de la teneur en phosphore total - Méthode par spectrométrie d'absorption moléculaire Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 4/7 II Description de la méthode 1 Principe Le lait est soumis à une minéralisation au moyen d'acide sulfurique et de peroxyde d'hydrogène. On dose ensuite le phosphore par photométrie, à 820 nm sur la base du bleu de molybdène obtenu par réaction avec du molybdate de sodium et de l'acide ascorbique comme réducteur. 2 Réactifs − Acide sulfurique à min. 96 % (1.84 kg/l) − Acide sulfurique 10 N (5 mol/1): laisser couler, sous refroidissement, 278 ml d'acide sulfurique à 96 % dans de l'eau et compléter à 1000 ml. − Peroxyde d'hydrogène: exempt de phosphate à env. 30 g H2O2/100 ml. − Solution de molybdate acide ascorbique : − Solution de molybdate de sodium: dissoudre 12.5 g de molybdate de sodium dihydraté (Na2MoO4 • 2 H2O) dans de l'acide sulfurique 10 N et compléter à 500 ml avec de l'eau. − Solution d'acide ascorbique: dissoudre 5 g d'acide ascorbique dans de l'eau et compléter à 100 ml. Cette solution ne peut pas être conservée. − Peu avant l'emploi, mélanger 25 ml de la solution de molybdate de sodium et 10 ml de la solu- tion d'acide ascorbique et compléter à 100 ml. − Solution étalon de phosphate: sécher pendant 48 heures au moins, dans un dessiccateur conte- nant un desséchant efficace (p. ex. de l'acide sulfurique concentré), env. 1 g de dihydrogéno- phosphate de potassium (KH2PO4); dissoudre dans de l'eau 0.4394 g de phosphate séché et compléter à 1000 ml. 1 ml contient 100 μg de phosphore. − Solution étalon de phosphate diluée: dans un ballon jaugé, compléter à 100 ml avec de l'eau 10 ml de la solution étalon de phosphate. 1 ml contient 10 μg de phosphore. 3 Equipement − Appareil de chauffage (électrique ou à gaz) pour fioles Kjeldahl − Fioles Kjeldahl de 50 ml − Spectrophotomètre avec cuves de 1 cm, pour mesure à 820 nm 4 Mode opératoire 4.1 Désagréation − Peser à 1 mg près 1.5 g de lait dans une fiole Kjeldahl de 50 ml − y ajouter 3 perles de verre et 4 ml d'acide sulfurique à 96 % et chauffer sous la hotte − laisser faiblement bouillir, en évitant une trop importante formation de mousse et une surchauffe locale − dès qu'il n'y a plus de formation de mousse, interrompre le chauffage et laisser refroidir à la tem- pérature ambiante − ajouter soigneusement 2 ml de peroxyde d'hydrogène et chauffer à nouveau; répéter cette opéra- tion jusqu'à l'obtention d'une solution claire et incolore; prendre soin d'agiter précautionneusement de temps en temps pendant le chauffage Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 5/7 − rincer le col du ballon avec env. 2 ml d'eau et chauffer à nouveau jusqu'à complète évaporation de l'eau − faire bouillir ensuite pendant encore 30 minutes pour éliminer toute trace de peroxyde d'hydro- gène − laisser refroidir à la température ambiante et transvaser la solution quantitativement dans un bal- lon jaugé de 100 ml − compléter jusqu'à la marque avec de l'eau et bien mélanger. 4.2 Réaction colorée et mesure − Introduire à la pipette 2 ml de la solution dans un ballon jaugé de 50 ml et la diluer jusqu'à 25 ml − y ajouter 20 ml de solution de molybdate-acide ascorbique, compléter jusqu'à la marque avec de l'eau et bien mélanger − chauffer le ballon pendant 15 minutes à l'eau bouillante refroidir dans de l'eau froide à la tempéra- ture ambiante et, dans l'espace de 1 heure, effectuer la mesure à 820 nm contre un essai à blanc. 4.3 Fablissement de la courbe étalon − Introduire à la pipette dans 5 ballons jaugés de 50 ml 0; 1; 2; 3 et 5 ml de la solution étalon de phosphate diluée, ce qui correspond à 0; 10; 20; 30 et 50 μg de phosphore − diluer avec de l'eau jusqu'à env. 25 ml et ajouter 20 ml de la solution de molybdate-acide ascorbi- que − remplir jusqu'à la marque avec de l'eau, bien mélanger et chauffer pendant 15 minutes dans un bain-marie bouillant − refroidir dans de l'eau froide à la température ambiante et, dans l'espace de 1 heure, effectuer la mesure à 820 nm contre la solution ne contenant que les réactifs (0 ml de solution étalon) − porter graphiquement les valeurs d'absorbance obtenues par rapport aux quantités correspondan- tes de phosphore'. 4.4 Essai à blanc Procéder au dosage intégral à l’exception de la pesée du lait. 5 Calcul et expression des résultats Phosphore, en mg/kg = 50 * a p où a = quantité de phosphore lue sur la courbe étalon, en μg, moins la valeur obtenue pour l'essai à blanc p = pesée de l'échantillon, en g. Les résultats sont exprimés en mg/kg. Lors de dosages parallèles, la différence ne devrait pas dépas- ser 5 mg. 6 Appréciation Tableau 1: Constantes chimiques de différents laits Teneurs Lait de vache Lait de chèvre Lait de brebis Lait de jument Lait ma- ternel Phosphore [mg/kg] 920 1090 1150 540 150 Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 6/7 7 Bibliographie Norme internationale FIL nO 42 B (1986): Lait. Détermination du phosphore total. Méthode d’analyse 121.1. Dosage du phosphore du lait Octobre 1999 Manuel suisse des denrées alimentaires © Office fédéral de la santé publique 7/7 III Chronique des modifications Tableau synoptique Version Commentaires 121.1 Mise à jour en raison du transfert dans la version internet du MSDA uploads/Sante/ dosage-du-phosphore-du-lait.pdf