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Chap4 sterilisation Chapitre VI Stérilisation I Introduction La destruction des microorganismes ou stérilisation est indispensable lors de la préparation du matériel et des milieux destinés aux manipulations ainsi qu'avant le lavage ou l'élimination du ma

Chapitre VI Stérilisation I Introduction La destruction des microorganismes ou stérilisation est indispensable lors de la préparation du matériel et des milieux destinés aux manipulations ainsi qu'avant le lavage ou l'élimination du matériel et des milieux utilisés Dans le premier cas il est indispensable d'utiliser des méthodes qui ne sont pas susceptibles de gêner la prolifération ultérieure des germes étudiés on utilise essentiellement des méthodes physiques Dans le deuxième cas il sera possible d'utiliser des méthodes plus variées et à e ?et plus durable méthodes physiques ou chimiques Il faut opposer la stérilisation qui est la destruction totale des germes à la désinfection qui est une destruction plus grossière La loi de destruction des microorganismes est de type logarithmique Le nombre d'individus tués est lié à la population et au temps d'exposition Du fait de la loi de destruction il est nécessaire de réduire au maximum le nombre de germes présents avant stérilisation par l'emploi de matériel propre et peu pollué de stériliser pendant un temps relativement long de véri ?er la destruction des germes d'établir et d'utiliser éventuellement un barème de stérilisation II - STÉRILISATION PAR LES MÉTHODES PHYSIQUES A - STÉRILISATION PAR LA CHALEUR - LE FLAMBAGE Il est basé sur l'emploi du bec Bunsen Cette méthode est utilisée pour la stérilisation extemporanée pour utilisation immédiate du matériel de manipulation extrémité de l'? se extérieur des pipettes Pasteur et pipettes graduées col des tubes Cà essai tubes contenant des milieux de culture erlenmeyers et acons divers étaloirs Il est à noter que le bec Bunsen réglé avec une amme bleue la plus chaude crée une zone de stérilité d'un diamètre d'environ cm par ascendance de l'air de cette zone Toutes les manipulations d'ouverture de tubes et bo? tes de culture d'ensemencement devront être réalisées dans ce diamètre Pour que cette zone soit e ?ectivement stérile les courants d'air et déplacements de personnes sont à proscrire - LE FOUR PASTEUR C'est un four - étuve à air chaud et sec Il est utilisé pour la stérilisation de la verrerie vide tubes à essai bo? tes de Pétri tubes à culture et bouchons pipettes Pasteur et récipients divers La verrerie à stériliser doit être propre et parfaitement sèche éventuellement bouchée avec du coton et emballée dans du papier solide Elle est alors disposée à l'intérieur du four et subit un chau ?age de minutes à heure à - C ou heures à C ce qui a pour but d'éviter le brunissement du coton Le matériel ainsi stérilisé sera laissé dans l'étuve jusqu'à son refroidissement complet puis stocké à l'abri des poussières Pour ces opérations compte tenu des températures relativement élevées il est conseillé d'utiliser le plus possible de la verrerie de type pyrex - L'AUTOCLAVE C'est un appareil très performant qui est indispensable dans une unité de microbiologie Il est utilisé pour stériliser les milieux de culture neufs ou souillés mais peut également stériliser tout autre matériel de microbiologie CLe chau ?age a lieu sous pression de vapeur d'eau à