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Corrige 2003 1 ?le C Documents and Settings BEDRANE Bureau emd corr Verssion imprimable TECHNIQUES D'ANALYSES BIOLOGIQUES CORRIGÉ EPREUVE DE MOYENNE DURÉE E M D N ANNÉE VERSION IMPRIMABLE - Exercice Une prépara on de Lactate Déshydrogénase LDH est u lisée

?le C Documents and Settings BEDRANE Bureau emd corr Verssion imprimable TECHNIQUES D'ANALYSES BIOLOGIQUES CORRIGÉ EPREUVE DE MOYENNE DURÉE E M D N ANNÉE VERSION IMPRIMABLE - Exercice Une prépara on de Lactate Déshydrogénase LDH est u lisée dans l ? expérimenta on suivante On cons tue une série de essais dont la composi on est la suivante Essai n H O Solu on étalon ml Prépara on de LDH ml Réac f du Biuret ml Absorbance mesurée après min Concentra on de la solu on étalon mg ml Trajet op que cm Quelle est la concentra on en protéines dans la prépara on de LDH Réponse la concentra on en protéines de la prépara on enzyma que est de mg ml - La LDH catalyse la réac on Pyruvate NADH H - - - Lactate NAD sur Dans la cuve d ? un spectrophotomètre on introduit ml d ? un tampon adéquat contenant du pyruvate et du NADH H en concentra ons saturantes On ajoute l de la prépara on de LDH précédemment u lisée Comment varie l ? absorbance jus ?er votre réponse Réponse L ? absorbance varie en fonc on de la longueur d ? onde u lisée Jus ?ca on L ? absorbance décro? t lorsqu ? on u lise la longueur d ? onde spéci ?que du co-facteur NADH H L ? absorbance est maximum correspondant à la concentra on ini ale du NADH H présent dans le tube à essai tube n au temps t On suit la varia on d ? absorbance en fonc on du temps elle est égale à min- Le coe ?cient d ? absorbance molaire de NADH H est de M- cm- a Donner la dé ?ni on du coe ?cient d ? absorp on molaire et sa rela on avec l ? absorbance Réponse Le coe ?cient d ? ex nc on molaire est caractéris que de la substance à doser Sa valeur est constante pour une solu on donner La valeur de l ? absorbance est égale au coe ?cient d ? ex nc on molaire pour une concentra on molaire de la solu on étudier C ?le C Documents and Settings BEDRANE Bureau emd corr b Calculer la quan té de NADH transformée en min Réponse nmole de NADH transformée en min Exercice Dans un protocole opératoire nécessitant une déprotéinisa on il est indiqué de centrifuger min à tours min Sachant que l ? on u lise un rotor dont le rayon de centrifuga on est de mm calculer la valeur de l ? accéléra on en mul ple de g Quelle serait la valeur de l ? accéléra on centrifuge si on u lise un autre rotor de rayon de centrifuga on égale à cm Quelle conclusion en rez vous Réponse Environ g et g l ? accéléra on augmente avec le rayon de centrifuga on Exercice Une solu on d ? acide sulfurique a les concentra ons suivantes Densité degré de pureté en masse