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Td milieux de culture et ensemencements

Milieux de culture et Techniques d ? ensemencement I-Introduction Avec la découverte des milieux de culture on est passé du simple examen microscopique à l ? isolement des bactéries sur des milieux permettant leur croissance et par la suite leur identi ?cation biochimique et en ?n l ? étude de leur sensibilité aux antibiotiques II-Dé ?nition et composition d ? un milieu de culture Les milieux de culture utilisés en bactériologie sont des milieux contenant les éléments nécessaires et en quantité su ?sante à la survie et à la multiplication des bactéries ils doivent par ailleurs posséder les propriétés physico-chimiques convenant à une culture optimale pH Isotonie Potentiel d ? oxydoréduction La composition d ? un milieu de culture varie elle est choisie en fonction du bute à atteindre et des besoins requis par la bactérie un milieu minimum doit comporter obligatoirement -Une source d ? eau eau distillée -Une source de carbone ou l ? énergie Glucose -Une source d ? azote et soufre -Une source de potassium K et phosphore P -Une source de calcium Ca et magnésium Mg -Une source d ? oligo-éléments sels de cuivres de zinc de cobalt ? etc -Un tampon pH pour maintenir la neutralité du milieu -Les facteurs de croissance et des Vitamines peuvent être rajoutées aux bactéries auxotrophe III-Classi ?cation des milieux de culture Il existe di ?érentes classi ?cations des milieux de culture -Classi ?cation selon la composition a-Milieu complexe empirique naturel La composition de ce milieu n ? est pas bien dé ?nie c ? est le milieu naturel de la bactérie On retrouve des extraits de viande des extraits de levure les peptones Exemple Milieu c ?ur cervelle BHIB Brain Heart Infusion Broth Cb-Milieu semi-synthétique Au milieu complexe sont rajoutées des substances chimiques bien dé ?nit ceci concerne les produits ayant un intérêt pour la bactérie comme les facteurs de croissance Exemple Gélose enrichie au sang de mouton c-Milieu synthétique La composition est parfaitement dé ?nie tant en quantité qu ? en qualité Ce sont des milieux utilisés dans la mise en évidence d ? une réaction enzymatique précise Exemple Milieu de Ferguson -Classi ?cation selon la consistance a-Milieu liquide Exemple Milieu de Clark et Lubs Bouillon d ? enrichissement b- Milieu solide ou gélosé C ? est un milieu liquide solidi ?é par addition d ? agar à une concentration de à Agar Substance extraite d ? algues marines et qui possède la propriété de ?xer une grande quantité d ? eau d ? o? la géli ?cation Exemple Milieu de Chapman TSI c-Milieu semi-liquide semi- solide ou faiblement gélosé La concentration en Agar est plus faible que celle du milieu gélosé elle est comprise entre - Exemple Milieu Mannitol mobilité MEVAG -Classi ?cation selon l ? utilisation a-Milieux usuels ou de base Permettent la culture de bactéries non exigeantes Exemple Gélose nutritive et bouillon nutritif b-Milieux enrichis Contiennent les composants indispensables aux bactéries mais qu ? elles ne peuvent synthétiser on parle de bactéries exigeantes Exemple