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energiecellule 5 Thème Énergie et cellule vivante Réactions de la respiration et synthèse d ? ATP Une cellule eucaryote qui possède des mitochondries est capable de réaliser la respiration Cette dernière se traduit par une consommation de glucose et d ? O

Thème Énergie et cellule vivante Réactions de la respiration et synthèse d ? ATP Une cellule eucaryote qui possède des mitochondries est capable de réaliser la respiration Cette dernière se traduit par une consommation de glucose et d ? O et un rejet de CO Travail de ré exion minutes Montrer que la respiration se produit en plusieurs étapes et que celles-ci sont couplées à la synthèse d ? énergie ATP En premier lieu on veut déterminer quel est le substrat utilisé par les mitochondries ce qui nous permettra déjà de proposer une conclusion partielle Pour cela on va isoler des mitochondries Matériel à votre disposition - chou eur - PC interface ExAO sonde à O logiciel Datastudio - Bioréacteur et agitateur magnétique - Solution de tampon phosphate à pH - Solution de pyruvate de sodium à tamponnée à pH - Mortier réfrigéré et pilon bécher entonnoir et support gaze - Pipette mL et propipette Expériences réalisables min Isolement des mitochondries Couper su ?samment de eurs en petits morceaux dans un verre de montre - Les mettre dans le mortier réfrigéré et ajouter mL de solution tampon phosphate pH - Broyer pendant une minute sans sable pour faire éclater les cellules végétales - Ajouter mL de la même solution tampon - Broyer à nouveau s - Filtrer au dessus d ? un bécher sur à épaisseur de gaze On obtient ainsi une suspension impure de mitochondries en ayant éliminé un maximum de débris cellulaires Mesures par ExAO - Verser xx mL de la suspension de mitochondries dans le bioréacteur su ?samment pour éviter la présence d ? air lorsque le bouchon contenant la sonde O sera placé - Lancer l ? agitation comme d ? habitude régler pour que l ? agitateur ne tourne pas trop vite - Introduire la sonde à O dans le bouchon trous placer le bouchon en véri ?ant l ? absence de bulles d ? air rajouter de la suspension dans le cas contraire - Laisser la sonde s ? équilibrer quelques minutes puis lancer la mesure - Au temps t mn injecter mL de glucose M - Au temps t mn injecter mL de pyruvate à g L- tamponné à pH ne pas oublier les repères sur le graphique Production - Graphique légendé et titré inséré dans une page Word si expérience réussie - Analyse graphique complète et comparaison à l ? ExAO sur les levures cellules entières Documents complémentaires les di ?érentes phases de la respiration Quelques informations pour les deux expériences ci-dessous Certains traitements permettent d ? isoler les di ?érentes fractions de la mitochondrie Ces dernières sont placées en présence de pyruvate et ou d ? O et la présence de CO est recherchée Certains composés absorbent di ?éremment les longueurs d ? onde selon qu ? ils sont à l ? état oxydé ou réduit Ainsi R ? H absorbe les longueurs d ? onde à nm alors que R ? ne les absorbe pas La réduction de composés R