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Proteines recombinantes Master I Biochimie App Module Biochimie et Biotechnologies Cours SNV-Adrar III Production de protéines recombinantes en système acellulaire Industrialisation et réglementation Introduction Le système de production de protéine par s

Master I Biochimie App Module Biochimie et Biotechnologies Cours SNV-Adrar III Production de protéines recombinantes en système acellulaire Industrialisation et réglementation Introduction Le système de production de protéine par synthèse acellulaire est une technique développée pour la première fois en Il a été utilisé majoritairement comme outil de recherche sur les mécanismes de synthèse de protéines et dans le domaine de la protéomique C ? est une technique complexe utilisant la machinerie transcriptionnelle et traductionnelle de la cellule a ?n de produire une protéine particulière à partir d ? une information génétique spéci ?que Ce système a été très peu utilisé en tant que méthode de production de protéines thérapeutiques à l ? échelle industrielle à cause de son faible rendement et des forts coûts associés à son fonctionnement Mais les recherches e ?ectuées ces quinze dernières années ont permis de développer cette technique et de l ? amener à un niveau de maturité comparable à celui des systèmes cellulaires actuellement utilisés en industrie III Historique Les grandes dates du développement de la synthèse de protéines par système acellulaire première utilisation de lysats cellulaires destruction de membranes cellulaires pour synthèse protéique premier système acellulaire utilisant un message exogène ARNm ou polyribonucléotides synthétiques Niremberg et Matthaei premier système couplé de transcription traduction utilisant de l ? ADN et non de l ? ARNm DeVries et Zubay première utilisation d ? ARN polymérase exogène pour synthèse protéique Roberts and al premier Continuously Fed Cell-Free CFCF Spirin Science - premier Continuous-Exchange Cell-Free CECF Alakhov and al Brevet première commercialisation de kits de surexpression utilisant le système CECF RTS Roche diagnostics BOUZEKRI A CMaster I Biochimie App Module Biochimie et Biotechnologies Cours SNV-Adrar III Système acellulaire La technique de production de protéines recombinantes par système acellulaire est en constante évolution depuis En e ?et plus la technologie avance plus on entrevoit l ? énorme potentiel de cette technique et les possibles applications qui en découlent La multitude de facteurs sur lesquels il est possible de jouer montre que la recherche est encore loin d ? avoir atteint les limites du système Figure Etapes clés de la technique de production de protéines en acellulaire Les premiers systèmes acellulaires étaient utilisés uniquement dans le but de traduire l ? ARNm en protéine Avec l ? évolution de la technologie de plus en plus de chercheurs ont développé des techniques permettant d ? utiliser l ? ADN comme matériel génétique Mais selon le type de cellule utilisée a ?n de produire le lysat le couplage de ces phases pourra être possible E coli ou impossible et intéressant ou pas selon la quantité à produireet le type de protéines attendu On appelle alors couplés ? les systèmes permettant de produire la protéine en une seule étape à partir de l ? ADN La majorité des systèmes acellulaires procaryotes appartiennent à cette catégorie les étapes de transcription et de traduction étant couplées chez les procaryotes Les ARNm des organismes eucaryotes nécessitant une maturation post-transcriptionnelle les techniques acellulaires eucaryotes passent