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reaction precipitation et agglutination

Introduction méthode immunochimiques Faculté de médecine d ? Alger ImmuNo Doctr Ilias Ce sont toutes les méthodes se basant sur la mise en évidence du complexe qui se forme lors de la réaction Ag ?? Ac Ces techniques sont utilisées pour détecter et éventuellement quanti ?er soit des antigènes soit des anticorps Caractéristiques très rapide de l ? ordre de quelques secondes réversible LIAISONS NON COVALENTES de faible énerg Ag Ac complex Ag-Ac la loi d ? action de masse est respecté la constante K k k permet de dé ?nir l ? a ?nité d ? un anticorps pour son antigène Quatre types de forces sont mises en jeu plus forte à la plus faible forces électrostatiques ioniques liaisons hydrogènes Liaisons hydrophobes forces de Van der WAALS On mesure l'a ?nité d'un anticorps pour son antigène par la mesure de la somme des forces attractives et répulsives La spéci ?cité de la réaction est due à la complémentarité structurale Elle est très élevée mais pas absolue Si l ? antigène est moléculaire et soluble les complexes Ag Ac forment un précipité Si l ? antigène est particulaire ou cellulaire bactéries hématies billes de latex ? les complexes immuns forment un agglutinat PH Modi ?e l ? état d ? ionisation des groupements de l ? antigène et de l ? anticorps Facteurs in uencent Température Forces ioniques Augmentation de l ? a ?nité avec augmentation de la température Diminution des liaisons Ag-Ac avec l ? augmentation des forces ioniques Détection et dosage de l'Ag Application Détection et titrage de l'Ac Interaction Ag-Ac Doctr Ilias CFaculté de médecine d ? Alger ImmuNo Doctr Ilias Réactions de PrécipiTations Technique de précipitation Antigène est moléculaire et soluble les complexes Ag Ac forment un précipité Observation directe des e ?ets de la réaction Ag-AC visible à l ? ?il nu Les réactions se déroulent en trois étapes Liaison de l ? Ac au déterminant antigéniques Formation d ? un réseau par réarrangement des sites de liaison Agrégation des réseau et formation de précipité visible à l ? ?il nu Caractéristiques Ag soluble Ac précipitine ou Ac polyclonaux Réseau tridimensionnel zone d ? équivalence Lecture - ?il nu turbidimétrie néphélémétrie Précipitation en milieu LIQUIDE Méthode de HEIDELBERGER KENDALL Précipitation milieu GELIFIE Doctr Ilias CFaculté de médecine d ? Alger ImmuNo I Méthode de HEIDELBERGER et KENDALL Doctr Ilias Notion de courbe de précipitation La zone d'équivalence est le point o? la courbe atteint son maximum correspond à la formation d'un réseau Ag-Ac Test de l'anneau ring test C'est un test qualitatif On introduit dans un tube des antigènes et des anticorps et on laisse reposer Ils vont lentement di ?user dans le milieu créant des gradients de concentration Lorsqu'ils sont à l'équivalence c'est-à-dire qu'il y a autant de paratopes que d'épitopes ils forment des complexes et précipitent Applications Véri ?cation après chaque injection D ? allo-imunisation chez l ? animal pour s ? assurer d ? en être dans la bon voie II Précipitation