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LA GALERIE API 20E (travail de R. FERRY CANNES) 1- Présentation de la galerie G

LA GALERIE API 20E (travail de R. FERRY CANNES) 1- Présentation de la galerie Galerie de 20 microtubes prêts à l’emploi permettant de réaliser 23 tests biochimiques afin d’identifier des bacilles Gram – appartenant à la famille des ENTEROBACTERIACEAE. cupule microtube contenant le milieu déshydraté La suspension bactérienne introduite dans le tube dissout les substrats déshydratés. 2- Préparation de l’inoculum Prélèvement d’une souche pure sur GNI 1 seule colonie sur GO 5 mL d’eau distillée stérile isolement Souche pure sur GNI LA GALERIE API 20E 3- Ensemencement de la galerie API 20 E Introduire la suspension bactérienne dans chaque tube à l’aide d’une pipette Pasteur stérile ouverte, pointe appuyée à l’intérieur et sur le côté pour éviter la formation de bulles Pour certains caractères: Remplir le tube de suspension puis recouvrir d’huile de paraffine Pour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S, URE LA GALERIE API 20E Remplir de suspension le tube et la cupule Pour les tests : CIT VP GEL LA GALERIE API 20E 4- Lecture de la galerie API 20 E Après 24h d’incubation à 37°C, dans quelles cupules doit-on rajouter des réactifs ? Napht-1-ol Naphtyl-1- amine Chlorure de fer III 4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests LA GALERIE API 20E + Réactif TDA + Réactif Kovacs + Réactifs VP 1 et 2 + Réactif TDA + Réactif Kovacs + Réactifs VP 1 et 2 Tests négatifs Tests positifs Tests négatifs Tests positifs Après ajout des réactifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR (ici NR +) LA GALERIE API 20E 4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISÉE API 20E Microtube Substrat : Caractère recherché : Révélateur Lecture directe ou indirecte Test (si nécessaire) Résultat - Résultat + ONPG ONPG = Ortho- Nitro-Phényl- Galactoside ADH LDC ODC Arginine Lysine Ornithine CIT Citrate H2S Thiosulfate de sodium URÉ Urée TDA Tryptophane IND Tryptophane VP Pyruvate de sodium GEL Gélatine GLU à ARA = zymogramme Substrat carboné (glucide) NO2 - / N2 Nitrates (NO3) Beta galactosidase Lecture directe Arginine Dihydrolase Lysine Décarboxylase Ornithine Décarboxylase BBT Rouge de Phénol Lecture directe Lecture directe Lecture directe Lecture directe Lecture directe Utilisation du citrate Production d’H2S Uréase Rouge de Phénol Tryptophane désaminase Tryptophanase ou production d’indole production d’acétoïne (hydroxy-3-butanone gélatinase Utilisation de substrats carbonés (glucides) Nitrate réductase BBT Lecture directe Lecture indirecte Ajouter une goutte de réactif chlorure de fer III Lecture indirecte Ajouter une goutte de réactif Kovacs Lecture indirecte Ajouter 1 goutte de VP1 et VP2 Attendre 10 minutes Lecture indirecte Ajouter 1 goutte de NIT1 et NIT2 et zinc éventuellement 5 2 1 5 7 7 3 5 + + - Code n°: 5 215 773 (55) + + 5 5- Identification de la souche Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code Résultats de la galerie : Résultats reportés sur la fiche d’identification LA GALERIE API 20E uploads/s3/ api-20-e 1 .pdf