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http://www.arnobio2.com Arnaud Delahaye Galerie API RapiD 20E Principe : La gal

http://www.arnobio2.com Arnaud Delahaye Galerie API RapiD 20E Principe : La galerie API RapiD 20E est constituée d’une galerie de 20 microtubes contenant les substrats déshydratés pour la mise en évidence d’activités enzymatiques ou de la fermentation de sucres. La suspension bactérienne répartie dans les tubes dissout les substrats. Les métabolites produits au cours des 4 heures d’incubation sont mis en évidence par des réactions colores spontanées ou révélées par l’addition de réactifs. La lecture de ces réactions se fait à l’aide du Tableau de lecture et l’identification est obtenue à l’aide du tableau d’identification. Technique : • Préparation de la galerie : Réunir fond et couvercle d’une boîte d’incubation et répartir de l’eau dans les alvéoles pour créer une atmosphère humide. Déposer stérilement la galerie dans la boîte d’incubation. • Préparation de l’inoculum : Faire une suspension bactérienne, dans une ampoule de NaCl 0,85% Medium ou dans un tube d’eau distillée physiologique, de turbidité égale à celle de l’étalon 0,5 Mcfarland. • Inoculation de la galerie : - Introduire la suspension dans les tubes de la galerie en éviter la formation de bulles. - Pour le caractère CIT, déposer deux gouttes de suspension. - Pour les autres caractères, seuls le tube doit être rempli. - Pour les caractères LDC, ODC, URE, remplir les cupules d’huile de paraffine. - Incuber 4 heures à 37°C Lecture : Après incubation, la lecture de la galerie doit se faire en se référant au Tableau de Lecture. Réaliser les tests nécessitant l’addition de réactifs : voir tableau de résultats. http://www.arnobio2.com Arnaud Delahaye Identification : • Avec le tableau d’identification : Comparer les réactions notées sur la fiche de résultats avec celle du tableau ; • Avec le catalogue analytique : Les tests sont regroupés en groupe de 3, et une valeur (1,2 ou4) est indiquée pour chacun. Additionner à l’intérieur de chaque groupe les nombres correspondants aux tests positifs. On obtient un nombre 7 chiffres qui sert de code d’identification. • Avec un logiciel d’identification. http://www.arnobio2.com Arnaud Delahaye Tableau de lecture de la galerie miniaturisée Api RapiD 20E Tests Substrat Caractère recherché Résultats Négatif Positif ONPG Ortho-nitro-phenyl- galactoside Beta-galactosidase Incolore Jaune LDC Lysine Lysine décarboxylase Jaune/gris Bleu/violet ODC Ornithine Ornithine décarboxylase Jaune/gris Bleu/violet URE Urée Uréase Jaune Rose/violet CIT Citrate de sodium Utilisation du citrate Vert pâle/jaune Bleu-vert/vert PPA Phénylalanine Phénylalanine désaminase Incolore Brun/jaune MNT Malonate Utilisation Jaune Vert à bleu ESC Esculine Β-glucosidase Incolore Gris à noir ARA Arabinose Acidification Bleu Vert à jaune XYL Xylose ADO Adonitol RHA Rhamnose CEL Cellobiose MEL Melibiose SAC Saccharose TRE Trehalose RAF Raffinose GLU Glucose IND Tryptophane Formation d’indole James / immédiat Vert pâle/jaune Rose VP Pyruvate Production d’acétoïne VP 1 + VP 2 / 5-10 mn Incolore rouge Ox Sur papier filtre Cytochrome-oxydase Ox / 5 mn Incolore Violet uploads/s3/ galerie-api-rapid-20e.pdf