Remerciez-le!

Remerciez @Admin pour avoir partagé cet document gratuitement, de la manière la plus simple, en partageant sur les réseaux sociaux.

ا لجمهورية الجزائرية الديمقراطية الشعبية RÉPUBLIQUE ALGÉRIENNE DÉMOCRATIQUE ET

ا لجمهورية الجزائرية الديمقراطية الشعبية RÉPUBLIQUE ALGÉRIENNE DÉMOCRATIQUE ET POPULAIRE وزارةالتعليم العالي والبحث العلمي MINISTÈRE DE L’ENSEIGNEMENT SUPÉRIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE Université des Frères Mentouri Constantine Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie جبهعت اإلخوة هنتوري قسنطينت كليت ع ل وم الطبيعت و الحيبة قسن الكيويبء الحيويــت و البيولوجيــب الخلــــويت و الجزيــئــيت Département de Biochimie et Biologie Cellulaire et Moléculaire Mémoire présenté en vue de l’obtention du Diplôme de Master Domaine : Sciences de la Nature et de la Vie Filière : Sciences Biologiques Spécialité : Analyse Protéomique et Santé Intitulé : Schéma D’élaboration d’une Molécule à Visée Thérapeutique et Application Biologique Jury d’évaluation : Président du jury : Mechakra A. (Professeur – UFM Constantine). Rapporteur : Mouas T. N. (Maitre de Conférence B – UFM Constantine). Examinateur : Kitouni R. (Maitre Assistant A - UFM Constantine). Année universitaire 2014 – 2015 Présenté et soutenu par : Le : 22/06/2015 BIOUD Mebarka ET LASSOUED Nihed Remerciements Au terme de ce travail, nous tenons à exprimer tous nos remerciements à DIEU tout puissant, qui en son nom et avec sa protection, nous avons réussi à réaliser ce travail. Nos profonds remerciements vont au Docteur Mouas Toma Nardjes qui a accepté d’encadrer nos travaux, pour tout le temps qu’elle nous a consacré, ses directives précieuses, et pour la qualité de son suivi durant toute la période de notre mémoire. Nous remercions Mme Mechakra A. professeur à l’université Frères Mentouri, Constantine et Mr Kitouni R. maitre-assistant à l’université Frères Mentouri, Constantine, de nous faire l'honneur de juger ce travail. Un merci bien particulier adressé également à Monsieur Khelifi. D, professeur à l'université Frères Mentouri Constantine, pour nous avoir accueillies dans son laboratoire. Nous adressons nos sincères remerciements à tous les professeurs, intervenants et toutes les personnes qui par leurs paroles, leurs écrits, leurs conseils et leurs critiques ont guidé nos réflexions jusqu'à l’obtention du diplôme de master. Nos remerciements vont enfin à nos très chères parents, qui ont toujours été là pour nous, « Vous avez tout sacrifié pour vos enfants n’épargnant ni santé ni efforts. Vous avez donné un magnifique modèle de labeur et de persévérance. Nous vous sommes redevables d’une éducation dont nous sommes fiers ». LASSOUEDNIHED BIOUD MEBARKA Dédicace A ALLAH le tout puissant, le clément et miséricordieux qui a guidé les pas de ma vie, loué soit ALLAH. Je dédie ce travail à la mémoire de ma très chère sœur « SAMIRA » et mes grands-pères, QU’ALLAH le tout puissant, puisse les accueillir dans son vaste paradis. A mes très chers maman et papa raison de mon existence, pour vos sacrifices, votre soutien, votre générosité et votre tendresse. Vous avez toujours été là près de moi pour me soutenir, m’encourager et me guider avec vos précieux conseils. Aucun mot ne saurait exprimer ma grande reconnaissance, ma gratitude et mon profond amour. QU’AALH vous garde et vous procure une bonne santé et une longue vie je vous aime très fort « Maman, Papa ». A ma très chère petite fille « ISRAÀ », a mes très chères sœurs « HIBA, BASMA, SABRINA, KHADIDJA, AMIRA, HADJER » et chers frères « ISKANDER et ABD AZIZ » sans oublier les chers enfants « MAY, ADEM, MAYSSEM et AMIRE, MADJED » je vous aime, et à mes chères grands-mères et toute la famille. A mes chères amies et sœurs « IKRAM, NADIA et IMEN » et à mes meilleurs amies « NIHAD, IMEN, AMINA, ANFEL, ASMA, SARA, INSAF et ROMAISSA » je vous aime toutes. BIOUD MEBARKA Dédicace Au nom de dieu miséricordieux J’aimerais en premier lieu remercier mon dieu Allah, l’unique, le tout puissant et le sachant, qui m’a donné la volonté et le courage pour la réalisation de ce travail. Je dédie ce modeste travail A ma très chère mère Autant de phrases aussi expressives soient-elles ne sauraient montrer le degré d’amour et d’affection que j’éprouve pour toi. Tu m’as comblé avec ta tendresse et affection tout au long de mon parcours. Tu n’as cessé de me soutenir et de m’encourager durant toutes les années de mes études, tu as toujours été présente à mes côtés pour me consoler quand il fallait. En ce jour mémorable, pour moi ainsi que pour toi, reçoit ce travail en signe de ma vive reconnaissance et ma profonde estime. Puisse le tout puissant te donner santé, bonheur et longue vie afin que je puisse te combler à mon tour. A mon très cher Père Aucune dédicace ne saurait exprimer l’amour, l’estime, le dévouement et le respect que j’ai toujours eu pour toi. Rien au monde ne vaut les efforts fournis jour et nuit pour mon éducation et mon bien être. Ce travail est le fruit de tes sacrifices que tu as consentis pour mon éducation et ma formation. Que mon père accepte à cette occasion, mes hommages comme gage de mon profond amour, et ma reconnaissance jamais interrompue, « je t’aime papa ». A mon cher frère « Mohamed El Amine » et ma petite très chère sœur « Meriem » A mon cher fiancé « Fares » qui m’a beaucoup encouragé dans cette étude A la mémoire de mes grands- parents, Qui ont toujours été dans mon esprit et dans mon cœur, je vous dédie aujourd’hui ma réussite. Que Dieu, le miséricordieux, vous accueille dans son éternel paradis. A mes chères grands-mères, Que ce modeste travail, soit l’expression des vœux que vous n’avez cessé de formuler dans vos prières. Que Dieu vous préserve santé et longue vie. A tout ma famille du côté paternel et maternelle Sans oublier mes très chères sœur et amies « Rym et Ferdaous » et mes fidèles amis :Mebarka,Narimen, Oumeima, Imen, Anfel, Amina et Sara. LASSOUED NIHED SOMMAIRE Sommaire I Sommaire ……………………………………………………….…………..……………...........I Abréviations…………………………………...………………….………………………...……IV Liste des figures …………..………………………………….…………………….....................VI Liste des tableaux..………………..…………………………………………...….....………......IX Introduction …………………………………...……………..…………… …….………………1 CHAPITRE I : REVUE BIBLIOGRAPHIQUE 1. L’élaboration des molécules à visée thérapeutique 1.1. Définition……………………………………………………………………...…….……. .3 1.2. Technique mise en œuvre…………….…………………………..…….……….……….…3 1.3. Les critères de la synthèse .…………….…………………………..…………...…..….…..4 1.4. Conception de médicament………………….………………..……..…….............…...…..4 1.4.1. Les différentes approches usitées au cours du temps ……………….…...….….…4 1.4.2. Les approches actuelles …........................................................................................6 1.4.3. Les approches rationnelles……………………………………………..…………..6 1.4.4. Les approches par criblage à haute débit ………………………………………….7 1.4.5. Les approches par chimie combinatoire …………………….………...………….7 1.5. Les phases de la conception des médicaments……………………….……………….……7 1.5.1. La phase de recherche et découverte ……………………………………….……..8 1.5.2. La phase de développement …………………………………………….…………8 1.5.3. La phase clinique ………………………………………………………...………..8 1.5.4. La phase de mise sur le marché ………………………………….………………..9 2. Le ferrocène 2.1. Historique ………………..………………………………….…….…….………..……......9 2.2. Structure ……………………………………………...………………………....…….….10 2.3. Synthèse ……………………………..……………………………….…..….…………....11 2.4. Propriétés physico-chimiques …………………………………………...………….….…12 2.5. Applications biologiques …………………………………………...………………...…..12 3. La fonction hydrazone 3.1. Généralité……………………………………..………………………...……….…….….13 3.2. Synthèse…………………………………...……………...……………………………….13 3.3. Propriétés structurales ………………………...………………………..………..……….15 3.4. Applications biologiques des hydrazones …………………………………..……………16 3.4.1. Activité anti-mirobienne …………………………………….………………….16 3.4.2. Activité anti-inflamatoire ……………………………..….……………...……..19 3.4.3. Activité anti-oxydante………………………………………………………….21 Sommaire II 3.4.4. Activité anti-VIH ………………………………………………..……….…....22 4. La molécule 2,2-diméthyl méthyléne hydrazine férrocéne 4.1. Structure …………………………………...…………….…………….……...………….23 4.2. Synthèse ………………………………………………………..………………….....…...24 5. Méthodes d’analyses chimiques 5.1. Purification……………………………………………………..……………..……..…….26 5.1.1. Chromatographie liquide sur colonne (CC)………………….….………...…....….....26 5.1.2. Chromatographie liquide sur couche mince (CCM)…………………...….….……....27 5.2. Caractérisation structurale………………………………………..……...………..….……28 5.2.1. Résonance magnétique nucléaire RNM …………………………....…………..…....29 5.2.2. La spectroscopie infrarouge IR …………………………………...….…………..….29 5.2.3. La spectroscopie UV ……………………………………………...…….……....…...30 6. Techniques d'étude de l'activité antimicrobienne 6.1. L’antibiogramme………………………….…………………………….………………...31 6.2. Méthode des puits ou cylindre…………………………...…...........…………....………..31 6.3. Méthode de dilution……………………………………………………………...…..……32 7. Les microorganismes testés…………………………………………………………………….32 7.1. Bactéries Gram (+) …………………….………………………………….……….....…....…32 7.2. Bactéries Gram (-) …………………………………………………………….....………..….33 7.3. Moisissure …………………………………………..……………………...….......……...….34 8. Les antibiotiques utilisés pour l’antibiogramme ……………………………...…………..…...35 CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES 1. Matériel d’étude 1.1. Matériel chimique ……………………………………………………………....…..…..…..37 1.2. Matériel biologique …………………………………………………..………...….……......37 1.3. Matériel de laboratoire …………………………………………….…...……...……….…...38 2. Méthode d’étude 2.1. Purification du DMHF…………………………...………………..……............................38 2.1.1. Chromatographie liquide sur colonne (CC)……………..…...........................……....38 2.1.2. Chromatographie liquide sur couche mince (CCM)……………..………………......39 2.2. Caractérisation structurale du DMHF.……………………………………………………39 2.2.1. Résonance magnétique nucléaire RMN……………………………………….……..39 2.2.2. La Spectroscopie IR …………………………………………….…………….…......40 2.2.3. La Spectroscopie UV ………………………………….……..…...………………....40 2.3. Application biologique du DMHF …………………………………….………………….40 Sommaire III 2.3.1. La technique d’étude de l’activité antimicrobienne du DMHF…………...…...……..40 2.3.2. Préparation des souches ………………………………………………..……..…...…40 2.3.3. Préparation des dilutions…………………………………….………………..…..…..41 2.3.4. Protocole de l’étude de l’activité antimicrobienne du DMHF……………..………....42 2.3.5. L’antibiogramme...………………………………………………………….…...…...42 CHAPITRE III : RESULTATS ET DISCUSSION RESULTATS 1. Contrôle de la pureté de DMHF…………………………………………………..…...………43 1.1. La purification de DMHF par CC …………………………… .……………..…………..43 1.2. Contrôle de la pureté de DMHF par CCM……………………………..….……………...44 2. Caractérisation structurale du DMHF………………………………………………….……….44 2.1. L’analyse par RMN………………………………………………………………….……44 2.2. L’analyse par la spectrophotométrie IR ………………….………………………….…...47 2.3. L’analyse par la spectroscopie UV ………………………………….…………………....48 3. L’évaluation de l’activité antimicrobienne du DMHF…………………………………….......49 4. L’antibiogramme ………………………………………..…………..……..…………………...53 DISCUSSION 1. Purification ………………………………………….………………………………………….56 2. Caractérisation structurale….…………………………………………………………………...56 3. Activité antimicrobienne ……………………………………..………..…..…………………...58 4. Antibiogramme ……………………………………….………………...…...............................59 CONCLUSION GENERALE.……………………………………………....………….………....61 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ………………………………..….………………….....62 ANNEXE ……………………………………………………………........…………………..…..71 Abstract ……………………………………………………………….…..…………………...….75 الملخص ………………………………………………………………………..…………………....76 RESUME. Abréviations IV Abréviations AMC Amoxicillin B Bacillus C6H5 Phenyl C5H4 1, 2,4-Cyclopentatriene C5H5 Cyclopentadienylthalliun CC Chromatographie sur colonne CCM Chromatographie préparative sur couche mince CH2Cl2 Dichlorométhane CHC13 Chloroforme (trichloro-méthan) CH3 Methyl CH3OH Méthanol CMI Concentration minimale inhibitrice CNRS centre national de recherche scientifique Cp Cyclopentadiène CTX Cefotaxime DCM Dichlorométhane DMAF Dimethyle Amine Ferrocène DME 1,2-Dimethoxyethane DMHF 2,2-diméthyl méthyléne hydrazine férrocéne DMSO Diméthylsulfoxide Do Densité optique E. coli Escherichia coli Fc Ferrocène FCCP Cyanure de carbonyle-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone H Hydrogène IPM Imipenème IR Infrarouge J jours K Klebsiella LDA Diisopropylamidure de lithium LC3 uploads/Geographie/ schema-d-x27-elaboration-d-x27-une-molecule-a-visee-therapeutique-et-application-biologique.pdf