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Immobilisation des enzymes

Université De JIJEL Faculté des Sciences Département de Biologie Moléculaire et Cellulaire Immobilisation des enzymes réalisé par Boudjelida H Bellal Ch Kaaboub K Année universitaire - proposé par Dr Si ?our M CIntroduction la catalyse par les cellules microbiennes est peu e ?cace en raison de la perte du substrat due au besoin de croissance des microorganismes et de la présence des réactions secondaires gênantes la possibilité d ? extraire des enzymes et de les utiliser pour la conversion du substrat procure des avantages non négligeables quant au rendement et à l ? uniformité du produit Pour compenser les problèmes liés à l ? instabilité et au cout d ? extraction des enzymes en solution On cherche à les immobiliser sur des supports insolubles a ?n de pouvoir les réutiliser après l ? opération et de faciliter leur séparation du produit de réaction obtenu Par ailleurs les enzymes immobilisées se prêtent mieux à leur incorporation dans les réactions ou l ? entrée de substrat à un bout permet de récupérer le produit transformé à l ? autre bout en ux continu CQu ? est ce qu ? une enzyme immobilisée Qu ? elles sont les principales techniques d ? immobilisation Qu ? elles sont les domaines d ? application d ? enzymes immobilisées CChapitre I Généralités sur l ? immobilisation des enzymes CI enzyme immobilisée ? Une enzyme immobilisée est une enzyme liée par des moyens physico-chimiques en surface ou à l ? intérieur d ? un support solide ? On cherche généralement à conserver son activité enzymatique qui a tendance ?? à diminuer après immobilisation du fait de possibles gênes stériques et de limitations dans l ? accessibilité au site actif ?? à augmenter sa stabilité dans le temps CI But et principe d ? immobilisation l ? ultra ?ltration est l ? une des méthodes qui permet la réutilisation d ? enzyme mais il semble que celle qui a donné naissance aux plus grands développements consiste à rendre l ? enzyme insoluble par un traitement physique ou chimique convenable su ?samment doux et sélectif pour éviter une perte trop importante d ? activité biologique ? On peut combiner les deux méthodes pour assurer une meilleure ?xation de l ?enzyme ? La rétention physique ??exploite la grande di ?érence de taille entre l ?enzyme et le substrat ??Elle peut être un réseau une capsule ou une membrane C ? Le traitement chimique se réalise par ?? simple interaction ionique ?? création d ? une vraie liaison covalente présente l ? avantage de stabiliser la protéine et de permettre une utilisation prolongée CI Propriétés d ? enzymes immobilisées ? Propriétés physico-chimiques Une des propriétés importantes et caractéristiques de l ? immobilisation est ?? l ? amélioration de la stabilité dans le temps ?? la résistance vis-à-vis de la dénaturation ? La stabilité de l ? enzyme immobilisée dépend beaucoup du microenvironnement imposé par le support On distingue normalement trois types de stabilité pour une enzyme immobilisée Stabilité de stockage Stabilité