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MATÉRIEL ET MÉTHODES Matériel et Méthodes II. MATÉRIEL ET MÉTHODES II.1. Matéri

MATÉRIEL ET MÉTHODES Matériel et Méthodes II. MATÉRIEL ET MÉTHODES II.1. Matériel végétal et extraction du jus brut de pomme de cajou Les pommes de cajou analysées proviennent de Yamoussoukro, capitale politique de la Côte d’Ivoire, région des lacs, située entre la zone forestière et la zone de savanicole. Elles ont été soit récoltées sur les arbres soit ramassées sous les arbres. Les noix ont été séparées minutieusement des pommes afin d’éviter de les blesser. Ces pommes sont constituées de pommes rouges et jaunes (Figure 15). Figure 15 : Les différentes variétés de pommes de cajou. Elles sont transportées dans des paniers à l’usine école pour être transformées (Figure 16). Nettoyées, lavées elles sont désinfectées pendant 30 min avec 100 ppm de chlore actif dans des bacs. Elles sont ensuite rincées avec de l’eau avant d’être broyées. Le broyage est réalisé avec une presse à vis sans fin (Figure 17) dont la référence est ZBK220077-88 LW74d(B) A (Chine). Cette presse a une puissance de 4,4 kW avec une vitesse de rotation de la vis de 1 440 tours.min-1. Afin d’étudier les effets de la pression d’extraction et du temps de conservation des pommes de cajou sur le rendement de production du jus, deux séries d’expériences ont été réalisées. Concernant l’influence de la pression d’extraction sur le rendement de production du jus, la méthodologie a consisté à faire varier la pression d’extraction et à déterminer le rendement de production du jus. Dans le cas de la presse utilisée, la détermination quantitative de la pression s’est avérée impossible. Pour cela des niveaux de pression correspondant à des Matériel et Méthodes 51 degrés d’ouverture entre la vis sans fin et le socle de la presse ont été fixés (Figure 18). Ainsi, trois niveaux de pression ont été étudiés. La première pression correspond une ouverture de 12 mm entre la vis sans fin et le socle de la presse (ouverture de 40%). Elle est la plus faible. La pression intermédiaire correspond à une ouverture de 9 mm (30%). Enfin la pression la plus élevée correspond à une ouverture de 6 mm (20%). Concernant l’étude de l’influence du temps de conservation sur le rendement de production du jus, la méthodologie a consisté à réaliser trois essais dans des conditions différentes. Le premier essai a consisté à récolter des pommes de cajou qui ont été transformées le même jour. Ce jus est nommé J+0h. Dans le deuxième essai, après la récolte les pommes de cajou ont été conservées 14 h à la température ambiante (28 - 30°C) avant de presser le jus. Ce jus est noté J+14h. Enfin le troisième essai a consisté à conserver les pommes de cajou 48 h à la température ambiante (28 - 30°C). Cet échantillon est noté J+48h. Les temps 14 h et 48 h correspondent aux temps nécessaires pour relier l’unité de transformation aux zones de production situées respectivement à 150 km et 400 km. Le jus broyé est stocké dans des récipients de 5 et 10 litres dans une chambre froide à -20°C avant d’être acheminé par voie aérienne à Montpellier, dans les laboratoires du CIRAD pour être analysé. Figure 16 : Schéma d'extraction du jus pulpeux de pommes de cajou. 52 Matériel et Méthodes (a) presse à vis (b) jus pulpeux de pomme de cajou Figure 17 : Presse à vis (a) et jus pulpeux de pomme de cajou (b). Figure 18 : Ouverture entre le socle et la vis sans fin de la presse. II.2. Méthodes analytiques II.2.1. Méthodes d’analyses physico-chimiques Les méthodes d’analyses physico-chimiques utilisées au cours de ces travaux sont résumées dans le tableau 15. 53 Tableau 15 : Méthodes d'analyses physico-chimiques effectuées sur le jus de pomme de cajou. Analyses Notation Unité Méthode Matériel Précision pH pH Unité pH pH métrie pH mètre (ORION modèle 601 A) avec correction de température 0,05 unité pH Acidité titrable AT meq.L-1 Tritimétrie (NF V05-101) NaOH 0,1N avec phénophtaléine comme indicateur coloré Extrait sec soluble ESS g.100g-1 Réfractométrie (NF V05-109) Réfractomètre type Abbe ATAGO avec lecteur digital et correction de température 0,2 g.100g-1 Matière sèche Totale MT g.100g-1 Dessication Etuvage à 50°C pendant 24h puis dessiccation à 60°C sous vide à la pression de 0,2 bar pendant 24 h 1 g.100g-1 Masse volumique ρ kg.m-3 Pesée de 25 ml de jus Fiole jaugé de 25 ml, balance de précision METTLER AE 200 3 kg.m-3 Couleur Lab Unité Lab Colorimétrie Colorimètre Minolta Hunter Lab DP 9600 calibré avec couleur noire puis blanche Viscosité dynamique µ mPa.s Viscosimètre Viscosimètre SEARLE Haake VT 550 dans bain thermostaté à 35 °C 0,2 mPa.s Solides insolubles en suspension SIS g.100g-1 Centrifugeuse SYGMA 2-15 Centrifugation à 3000 g pendant 15 min, rinçage puis pesée du culot après égouttage et étuvage à 60°C sous vide pendant 24 h 1g.100g-1 Turbidité NTU Turbidimétrie Turbidimètre Hanna LP 2000 Matériel et Méthodes II.2.2. Méthodes Biochimiques II.2.2.1. Dosage des polyphénols totaux Les polyphénols sont déterminés par la méthode de Georgé et al (2005) au spectrophotomètre à une longueur d’onde de 760 nm. Cette méthode consiste à prélever 3 g d’extrait auxquels 7 ml d’acétone sont ajoutés. Le mélange est agité durant 5 min puis filtré sur du papier filtre. Pour le dosage de Folin, 75 µl d’extraits filtrés sont prélevés auxquels 425 µl d’eau distillée sont ajoutés. Ensuite 500 µl d’extrait sont prélevés et additionnés à 3 500 µl d’eau distillée. 2 ml de ce mélange sont déposés sur une cartouche OASIS. Après séparation, une solution aqueuse contenant les polyphénols est obtenue. Pour le dosage, 500 µl de la solution aqueuse sont prélevés et dosés par la méthode de Folin. Le dosage proprement dit de Folin consiste à ajouter aux différents échantillons, 2,5 ml de réactif de Folin-Ciocalteu (dilué au 1/10ème) et à incuber le mélange durant 2 min exactement. Après les 2 min, 2 ml de carbonate de sodium (75g/l) sont ensuite ajoutés et incubés immédiatement à 50°C pendant 15 min. Les tubes sont refroidis à l’eau froide et l’absorbance spécifique est déterminée rapidement à 760 nm par un spectrophotomètre UV 7200 (CECIL INSTRUMENTS, Royaume Uni). Les blancs sont réalisés avec 75 µl d’acétone mélangés à 425 µl d’eau distillée d’une part et avec 500 µl d’eau distillée d’autre part. II.2.2.2. Vitamine C La teneur en acide ascorbique est mesurée par la méthode de titration au 2,6- dichlorophénolindophénol (2,6-DCPIP). La méthode consiste en une réduction du 2,6-DCPIP et en une oxydation de l’acide ascorbique en acide déhydroascorbique. Elle permet donc une détermination de la teneur en vitamine C sous sa forme réduite (acide ascorbique). Une fois que l’oxydation de l’acide ascorbique est terminée, le 2,6-DCPIP sert d’indicateur coloré et sa présence en solution donne une couleur rose caractéristique (AOAC, 1984). Pour la préparation de la solution d’acide métaphosphorique / acide acétique, 30 g d’HPO3 solide sont dissouts dans 80 ml d’acide acétique et 240 mL d’eau distillée. Le volume est ensuite porté à 1 000 mL par ajout d’eau distillée. Comme l’acide métaphosphorique se transforme lentement en H3PO4, la solution obtenue est conservée une semaine au maximum dans un réfrigérateur à 4°C. Concernant la solution de 2,6 DCPIP, 250 mg de sel de 2,6 DCPIP sodium sont dissouts dans 250 mL d’eau distillée contenant 210 mg de carbonate de sodium (NaHCO3) puis sont 56 Matériel et Méthodes mélangés vigoureusement. Le volume est ensuite porté à 1 000 mL par ajout d’eau distillée, puis filtré avant d’être conservé au réfrigérateur à 4°C. Quant à la solution standard d’acide ascorbique, 50 mg d’acide ascorbique sont pesés avec précision et dilués avec de la solution acide métaphosphorique/acide acétique dans une fiole jaugée de 50 mL protégée de la lumière. Pour le dosage, 2 mL de solution standard sont dosés avec le 2,6-DCPIP de même que 2 mL de l’échantillon. II.2.2.3. Dosages des éléments minéraux Les minéraux sont dosés par spectrophotométrie d’émission atomique par plasma à couplage inductif (ICP) après élimination de la matière organique et de la silice. Pour la préparation de l’échantillon, 500 mg de matériel végétal préalablement lyophilisés sont introduits dans une capsule en platine. La capsule est placée dans un four dont la température est progressivement augmentée jusqu’à 500°C puis maintenue ainsi pendant 2 h. Un pallier est effectué aux alentours de 200°C jusqu’à la fin du dégagement de fumées. Après refroidissement, les cendres sont humectées avec quelques gouttes d’eau puis 2 ml de HCl 6 N sont ajoutés. Après évaporation à sec, 2 ml de HCl 6 N sont rajoutés à nouveau. L’ensemble est laissé en contact 10 min puis filtré dans une fiole jaugée de 50 ml. Le filtre contenant le résidu est alors calciné à 500°C. 1 à 2 ml d’acide fluorhydrique sont alors ajoutés sur les cendres puis évaporés sur plaque chauffante. La silice contenue dans les cendres est ainsi volatilisée sous forme de SiF6. Le résidu est repris par 1 ml de HCl 6 N puis filtré dans la même fiole de 50 ml. Après avoir ajusté avec de l’eau au trait de jauge, la solution est homogénéisée par agitation. Pour le dosage uploads/Industriel/ materiel-et-methodes.pdf