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doi:10.1684/abc.2013.0866 443 Pour citer cet article : Nguyen-Khoa T, Borgard J

doi:10.1684/abc.2013.0866 443 Pour citer cet article : Nguyen-Khoa T, Borgard JP, Miled R, Rota M. Dosage des chlorures sudoraux par potentiométrie directe sur cartouche à usage unique (analy- seur Spotchem®, Elitech-Arkray) : comparaison des résultats à ceux obtenus par coulométrie et par la mesure de la conductivité. Ann Biol Clin 2013 ; 71(4) : 443-8 doi:10.1684/abc.2013.0866 Article original Ann Biol Clin 2013 ; 71 (4) : 443-8 Dosage des chlorures sudoraux par potentiométrie directe sur cartouche à usage unique (analyseur Spotchem®, Elitech-Arkray) : comparaison des résultats à ceux obtenus par coulométrie et par la mesure de la conductivité Sweat chloride measurement using direct potentiometry: Spotchem® (Elitech-Arkray) evaluation and comparison with coulometry and conductivity Thao Nguyen-Khoa1 Jean-Pierre Borgard2 Ryad Miled2 Michèle Rota2 1 Service de biochimie, Hôpital universitaire Necker-Enfants Malades AP-HP , Paris, France <thao.nguyen-khoa@nck.aphp.fr> 2 Service de biochimie, CHI Créteil, Créteil, France Article rec ¸u le 19 septembre 2012, accept´ e le 15 octobre 2012 Résumé. Le dosage des ions chlorures (Cl-) sudoraux est une étape clé du diagnostic de la mucoviscidose. La technique coulométrique est validée dans ce cadre par les recommandations internationales. L’objectif de notre étude consiste à comparer sur le même échantillon, les résultats du dosage des ions Cl- sudoraux par potentiométrie directe sur cartouche à usage unique (SpotchemTM EL SE-1520, Elitech-Arkray) à ceux obtenus par coulométrie (chloridomètre Sherwood 926S, Dutscher). Sur 99 des 139 échantillons étudiés, nous avons aussi mesuré la conductivité (Sweat CheckTM 3100, Elitech) pour compléter notre table de correspondance entre cette dernière (mmol/L Equivalent NaCl) et le dosage des ions Cl- (mmol/L Cl-). La linéarité des techniques s’étend de 10 à 120 mmol/L. Les coefﬁcients de variation intra- et inter-séries sont < 5 %. La comparaison des 139 résultats (régression de Passing - Bablock), [Spotchem] = 1,026 [chloridomètre] + 1,8 ; r = 0,996, met en évidence une dif- férence (p < 0,001). Après correction par les facteurs de cette régression, seuls 6 couples de valeurs (4,6 %) présentent un écart supérieur de ± 5 mmol/L Cl-. La mesure de la conductivité est fortement (p < 0,576) corrélée aux mesures en coulométrie (r = 0,959) et en potentiométrie directe (r = 0,965) et avec une relation linéaire entre les seuils décisionnels de 30 à 60 mmol/L Cl-. Les dosages des ions Cl- sudoraux utilisant le SpotchemTM satisfont aux critères analy- tiques des recommandations internationales. La technique est standardisée, simple et rapide. Sa grande praticabilité rend le test de la sueur indépendant de l’utilisateur et permet d’envisager une utilisation étendue aux services cliniques concernés. Mots clés : test de la sueur, potentiométrie directe, mucoviscidose, dépistage néonatal Abstract. Sweat chloride (Cl-) measurement is a key step for the diagnosis of cystic ﬁbrosis. The coulometric technique is validated in this context by international guidelines. The aim of our study was to evaluate the assay for sweat Cl- ions using direct potentiometry on disposable cassette (SpotchemTM SE EL-1520, Elitech-Arkray) by comparing results to those obtained on the same sample, by coulometry (Chloride analyser Sherwood 926S, Dutscher). To complete our table of correspondence between the results of Cl- ions and sweat conductivity (Sweat CheckTM 3100), conductivity has been also achieved for Tirés à part : T. Nguyen-Khoa Copyright © 2022 John Libbey Eurotext. Téléchargé par Mlle aya boufama le 13/06/2022. 444 Ann Biol Clin, vol. 71, n◦4, juillet-août 2013 Article original 99 of the 139 sweat samples studied. Linearity of each technique performed extends from 10 to 120 mmol/L. The coefﬁcients of variation within and bet- ween runs are < 5%. Comparison of 139 results (Passing - Bablock regression) shows a signiﬁcant difference (p < 0.001): [Spotchem] = 1.026 [Chloride ana- lyser] + 1.8, r = 0.996. After correction with regression factors, only 6 pairs of values (4.6%) had a difference greater than ± 5 mmol/L). The results of conduc- tivity measurement is strongly correlated with those of Cl- ions (r = 0.959 for Chloride analyser and 0.965 for Spotchem; p = 0.576) with a linear relationship between the decision thresholds from 30 to 60 mmol/L Cl-. Sweat Cl- deter- minations using SpotchemTM analyser meet the criteria required by analytical recommendations. The technique is standardized, easy to perform and fast. Its good practicability makes the sweat test independent to operator and allows point-of care use. Key words: sweat test, chloride, selective electrode, cystic ﬁbrosis, newborn screening Le test de la sueur est un examen indispensable à l’établissement du diagnostic de mucoviscidose [1]. Il consisteàdéterminerlaconcentrationd’ionschlorures(Cl-) (exprimée en mmol/L Cl-) de la sueur recueillie après une stimulation par iontophorèse à la pilocarpine. Plusieurs techniques sont actuellement disponibles pour réaliser ce dosage [2, 3]. La titrimétrie (Schales et Schales) après recueil de la sueur sur du papier-ﬁltre est consommatrice de temps, et nécessite une solide expérience. La coulomé- trie, mise en œuvre sur des chloridomètres, est reconnue par les recommandations internationales [4-6] comme une technique à visée diagnostique. Ce n’est pas le cas pour la mesure in situ par une électrode sélective (ExsudoseTM TEM Lormont, France). La mesure de la conductivité sudo- rale, qui s’exprime en une autre unité (mmol/L Equivalents NaCl), n’a pas été validée, malgré sa standardisation et sa bonne praticabilité, pour le diagnostic de la mucoviscidose, car elle est le reﬂet de l’ensemble des ions sudoraux [6]. Nous décrivons une adaptation de dosage des ions Cl- sur cartouche à usage unique par potentiométrie directe sur un analyseur utilisé pour le dosage des électrolytes sanguins et urinaires : SpotchemTM EL SE-1520 (Elitech-Arkray, Salon de Provence, France). L’objectif de notre étude consiste à évaluer les qualités analytiques du dosage par potentiométrie directe des ions Cl- sudoraux sur le SpotchemTM [Spotchem]. Nous com- parons sur 139 prélèvements, les résultats obtenus par cette technique à ceux de la coulométrie [chloridomètre] (chlo- ridomètre Sherwood 926S, Dutscher, Brumath, France). Nous avons également mesuré la conductivité sudorale (Sweat CheckTM 3100, Elitech) pour 99 d’entre eux, pour abonder la table de correspondance que nous avons préala- blement décrite dans une étude portant sur 743 échantillons [3]. Matériels et méthodes Population Les tests de la sueur ont été réalisés dans les laboratoires de 2 centres hospitaliers : CHU Necker-Enfants Malades AP-HP Paris (site 1) et CHI Créteil (site 2) concernant 139 patients adressés pour un diagnostic de mucoviscidose (90 d’âge inférieur à 10 ans et 49 de plus de 10 ans, [1 mois - 78 ans]) à raison de 40 patients pour le site 1 et 99 pour le site 2. Stimulation Elle a été réalisée par iontophorèse à la pilocarpine. Le site 1 a utilisé des compresses imprégnées de nitrate de pilocarpine (2 g/L) pour l’anode et de solution d’acide sulfurique 0,01 N pour la cathode et un appa- reil galvanique 255® (ElionTM, Montrouge, France ; www.electro-therapie.com). Le site 2 a utilisé des disques Pilogel® etunstimulateurautomatique3700WebsterSweat Inducer WescorTM (Elitech, Salon-de-Provence, France, www.elitechgroup.com). Recueil La sueur a été recueillie en capillaire Macroduct® (Elitech) pendant 20 à 30 minutes dans les deux sites. Les recueils retenus pour l’étude présentaient un volume de sueur supé- rieur à 50 L. Dosages Le dosage des ions Cl- a été réalisé par les 2 sites sur 139 échantillons par potentiométrie directe (technique étudiée) et par coulométrie. Copyright © 2022 John Libbey Eurotext. Téléchargé par Mlle aya boufama le 13/06/2022. Ann Biol Clin, vol. 71, n◦4, juillet-août 2013 445 Dosage potentiométrique direct des chlorures sudoraux Potentiométrie directe (SpotchemTM EL SE-1520) L’appareil fonctionne avec des cartouches à usage unique contenant des électrodes sélectives aux ions sodium (Na+), potassium (K+) et chlorures (Cl-) permettant la mesure simultanée de ces ions dans le sang, le plasma ou les urines. La prise d’essai de 20 L de sueur est déposée de fac ¸on concomitante à 20 L de solution de référence sur la cartouche à usage unique à l’aide d’une pipette à double pointe. Les résultats, exprimés en mmol/L Cl-, sont disponibles en une minute. Nous avons déterminé un fac- teur de calibration spéciﬁque « sueur » pour le canal Cl- du SpotchemTM. Il a été calculé en fonction des résultats obte- nus avec des solutions de contrôle commerciales fournies par Elitech (résultats en coulométrie), Roche Diagnostics (résultats en potentiométrie indirecte sur Cobas 6000 Roche Diagnostics, Meylan, France) et Elitech-Arkray (résultats en potentiométrie directe). Nous avons remplacé par ce fac- teur celui déﬁni par le fabriquant pour le dosage des ions Cl- dans les urines. Coulométrie (chloridomètre 926STM Sherwood, Dutscher, Brumath, France) Un volume de 20 L de sueur est délivré à l’aide d’une pipette dans 15 mL de tampon combiné acide dans lequel plongent 2 électrodes d’argent et 2 électrodes de mesure. Un courant constant est appliqué entre les électrodes d’argent qui libèrent des ions Ag+ maintenus en suspension dans le tampon par un stabilisateur colloïdal et se combinent aux ions Cl- pour former du chlorure d’argent (AgCl) qui précipite. Quand tous les ions Cl- sont consommés, les ions Ag+ en excès modiﬁent la conductivité du tampon acide, détectée par les électrodes de mesure. Le signal est alors converti en mmol/L Cl-. La mesure de la conductivité (Sweat CheckTM 3100, Eli- tech) réalisée avant les dosages uploads/Management/dosage-des-chlorures-sudoraux-par-potentiometrie-directe-sur-cartouche-a-usage-unique-analyseur-spotchem-elitech-arkray-compara-294855-u.pdf