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D:\travail\hygiène\hh128 Prélèvements d'environnement dans les établissements de santé : Modes opératoires Juin 2001 D:\travail\hygiène\hh128 AVANT PROPOS Malgré l’absence d’indicateur permettant de mesurer le rôle de l’environnement hospitalier dans la survenue des infections nosocomiales, il est établi que la biocontamination à l’hôpital constitue un risque majeur pour les patients fragilisés ainsi que pour certains lieux où sont pratiqués des soins ou actes invasifs. La maîtrise de cette contamination dont dépend la sécurité des patients a donc été élevée au rang de « vigilance environnementale ». Nous assistons depuis quelques années à une montée en charge de la réglementation dans ce domaine, néanmoins les textes officiels et les recommandations restent souvent imprécis et il demeure difficile de proposer des normes. Le guide des 100 recommandations pour la surveillance et la prévention des infections nosocomiales (CTIN 1999) rappelle que l’hygiène de l’environnement hospitalier s’inscrit dans un cadre préventif et qu’elle se place sous la responsabilité du CLIN de l’établissement. Ce guide régionalement sous l’égide de l’ARECLIN s’appuie sur une recherche bibliographique et sur l’expérience acquise par des microbiologistes et des hygiénistes hospitaliers, il se propose d’apporter une aide méthodologique destinée aux établissements de soins pour la surveillance environnementale. Gilles BEAUCAIRE Christian CATTOEN Thierry LEVENT D:\travail\hygiène\hh128 SOMMAIRE Introduction…………………………………………………………………………………………………………………………………………………..1 Objet Champ d'application Le groupe de travail 1° Le contrôle microbiologique des surfaces Fiche Technique n° 1 : contrôle microbiologique des surfaces………………………………………………..2-3 2° Le contrôle microbiologique du linge Fiche Technique n° 2 : contrôle microbiologique du linge……………………………………………… …..4-5 Plan d’échantillonage : proposition d’une fiche type ………………………………………………………. ……….6 3° Le contrôle microbiologique de l'eau Eaux et usages : typologie…………………………………………………………………………………………………………………7 Fiche Technique n° 3 : contrôle microbiologique de l'eau non filtrée……………………………………..8-9 Fiche Technique n° 4 : contrôle microbiologique de l'eau filtrée……………………………….…………….10-11 Fiche Technique n° 5 : contrôle microbiologique de la désinfection des endoscopes …….12-13 Fiche Technique n° 6 : contrôle microbiologique de l'eau des piscines de rééducation …….14-15 Fiche Technique n° 7 : recherche de Legionella dans une eau ………………………………………………….16-17 Fiche Technique n° 8 : contrôle microbiologique des eaux d'hémodialyse……………………………… 18-19 Fiche technique n° 9 : contrôle microbiologique pour la pratique de l’hémo(dia) filtration 20-21 4° Le contrôle microbiologique de l’air Fiche technique n°10 : Le contrôle microbiologique de l’air …………………………………….. ……………. 22-23 Fiche technique n°11 : risque aspergillaire – surveillance de l’environnement ……………………….24-25-26 5° Lexique Glossaire des milieux de culture utilisés dans les modes opératoires……………………………………..27-28-29 6° Annexe 1 : les germes de l’hospitalisme 30 Annexe 2 : Recherche d’une Legionella dans une eau selon la norme NFT 90-431 : le mode opératoire 31 D:\travail\hygiène\hh128 1° Introduction Un groupe de travail de microbiologistes issus du réseau des microbiologistes de l'ARECLIN (Association Régionale des CLIN du Nord Pas de Calais) en partenariat avec l'Institut Pasteur de Lille a réfléchi sur la gestion et la maîtrise du risque infectieux lié à la biocontamination de l'environnement dans les établissements de santé. Ce groupe a établi une liste de protocoles sous forme de fiches techniques relatives à la surveillance microbiologique de l'environnement hospitalier. Un des objectifs est de proposer une standardisation des techniques de prélèvement et d'analyses, rendant possible l'interprétation des résultats de chaque établissement au sein d'un observatoire régional d'hygiène hospitalière. 2° Objet : Chaque protocole précise les modalités de prélèvement, les aspects méthodologiques et les critères d'interprétation. Le prélèvement est effectué hors présence humaine, si possible. Chaque protocole sera actualisé régulièrement, en fonction de l'évolution du cadre réglementaire et des éventuelles réflexions du réseau des microbiologistes. 3° Champ d'application : Le protocole est à appliquer par toute personne impliquée dans la surveillance microbiologique de l'environnement hospitalier. 4° Circuit de diffusion : • Microbiologistes • Médecins hygiènistes • Infirmier(e)s hygiènistes • Techniciens de laboratoire • Président du CLIN • ARIH (Association Régionale des Infirmières Hygiénistes) • ARECLIN Pharmacien 5° Groupe de travail Laurence BOUILLET Michèle CAILLAUX Sylvie HENDRICX Christiane KREMBEL Thierry LEVENT Françoise MARSY Betty MORIN Jean Gabriel PAUL Dominique TRIVIER Anne VACHEE Biologiste - CH de VALENCIENNES Biologiste - CH de TOURCOING Biologiste - CH de DOUAI Médecin Hygièniste - ULIN CHRU de LILLE et Institut Pasteur de Lille Médecin Hygièniste - CH de MAUBEUGE Institut Pasteur de LILLE Institut Pasteur de LILLE Biologiste - CH de BOULOGNE SUR MER Médecin Hygièniste - CH de LENS et Groupe AHNAC Biologiste - CH de ROUBAIX Avec la participation de : Sylvie MEMBRE Pharmacien - CH de DUNKERQUE Colette SAVAGE, Biologiste, CHRU de LILLE Catherine COIGNARD, Biologiste, CH de Tourcoing Edith MAZARS, Biologiste, CH de Valenciennes 1 D:\travail\hygiène\hh128 CONTROLE MICROBIOLOGIQUE DES SURFACES N° de Fiche :1 Version :1 Date : Juin 2001 Pagination :1/2 1° Objet : Quantifier voire qualifier la flore microbienne pour une surface donnée. 2° Champ d'application : ¾ Surfaces des zones à risque (risque 4 éventuellement 3, hors activité ou en activité) ¾ Surfaces des autres zones, en situation épidémique ou en situation particulière 3° Prélèvements : Le plan d'échantillonnage ¾ Etablir une liste des points critiques (points les plus salissables, les plus manipulés, les plus proches du patient) ¾ A titre indicatif, 8 points pour une salle de bloc opératoire, 5 points pour une chambre La fréquence ¾ Zone à haut risque : 4 fois par an ¾ Autre zone : fréquence à discuter Les modalités Préciser le secteur, le local, la date et l'heure du prélèvement ainsi que le nom du préleveur. Indiquer s'il s'agit d'un secteur en activité ou non, la date et l'heure du nettoyage, le type de nettoyage (courant ou après sortie) et le type de produit utilisé. Le matériel ¾ gélose contact contenant 4 neutralisants (Lecithine, Polysorbate, Thiosulfate de sodium, L-Histidine). ¾ Applicateur ou poids de 500 grammes ¾ Ecouvillon stérile humidifié Le mode de prélèvement Par contact : ¾ A l'aide de Gélose contact maintenue sous une pression de 500 grammes pendant 10 secondes (à l'aide d'un applicateur ou d'un poids de 500 grammes) ¾ Après avoir réalisé le prélèvement, ne pas oublier de nettoyer la surface afin d'éliminer les traces de géloses résiduelles Indirect (écouvillon) : ¾ non recommandé si on peut utiliser la méthode précédente. Cette technique est réservée aux petites surfaces ne permettant pas l’utilisation de gélose contact ou les surfaces absorbantes ou irrégulières ¾ écouvillonner approximativement 10 cm2. Dans les deux cas, transmettre les prélèvements au laboratoire dans les meilleurs délais. 2 D:\travail\hygiène\hh128 4° Le mode opératoire : Celui-ci consiste à rechercher les germes de l'hospitalisme et à dénombrer la flore totale selon la technique suivante : 5° La restitution des résultats et leur interprétation : 5.1 La restitution des résultats : Rendre les résultats en UFC/16cm2. Si plus de 100 colonies ont été comptabilisées, rendre le résultat sous l'intitulé suivant : > 100 UFC/16 cm2. Rendre l'identification des germes de l'hospitalisme accompagnée d'une appréciation semi quantitative. 5.2 Interprétation : L'interprétation de la bio-contamination des surfaces doit être réalisée au regard des valeurs indicatives définies dans le tableau ci-dessous [1] : Hors activité : bio-contamination des surfaces après nettoyage et désinfection : valeurs indicatives Secteurs 1 2 3 4 Surfaces < 5 UFC /cm2 < 2 UFC/cm2 < 0,2 UFC/cm2 < 0,2 UFC/cm2 Alors que les modes opératoires, des prélèvements en activité sont les mêmes qu’hors activité, les critères d’interprétation restent à définir. Annexe : proposition de sectorisation Secteur 1 Risques minimes : Maison de retraite, bureau … Secteur 2 Risques moyens : maternité, psychiatrie, service de long et moyen séjour, consultation externe… Secteur 3 Risques sévères : Pédiatrie, soins intensifs, urgences, salles de travail, médecine, radiologie, hémodialyse, réanimation, exploration fonctionnelle, hématologie, chimiothérapie, bloc opératoire septique et obstétrical, stérilisation centrale, salles d'eau, toilettes, cuisines, biberonnerie… Secteur 4 Très haut risques : Néonatologie, bloc opératoire aseptique, service de brûlés, immunodéprimés, service de greffe, chimiothérapie, oncologie, onco-hématologie… Bibliographie : 2 3 ¾ Les boîtes de contact sont ensemencées sur site. ¾ Si l'on utilise des écouvillons, les décharger dans 1 ml d'une solution neutralisante contenant au moins 3 des 4 inhibiteurs cités dans le tableau ci-dessus. Ensemencer 0,1 ml sur une gélose d'un milieu équivalent à celui de la boîte de contact (PCA, TCS ou TS…). ¾ Incuber 24 h à 37°C et relever la présence ou l'absence de germe de l'hospitalisme. Incuber à nouveau 2 jours à température ambiante de façon à dénombrer la flore totale. ¾ Dénombrer le nombre total de colonies sur les 16 cm2 centraux de la boîte de contact. ¾ Pour les écouvillons, dénombrer le nombre total de colonies et le ramener en densité pour 16cm2. ¾ Identifier les germes de l'hospitalisme par les méthodes standards. [1] Bio-décontamination des surfaces après nettoyage et désinfection. Guide du bio-nettoyage n°5670. [2] Décontamination, bio-nettoyage, désinfection, stérilisation. Guide pratique 2e édition. Editions hospitalières 1995. [3] Contrôles de l’environnement dans les zones à haut et très haut risque infectieux. ASPEC juin 1999 D:\travail\hygiène\hh128 CONTROLE MICROBIOLOGIQUE DU LINGE (articles textiles traités en blanchisserie) N° de Fiche :2 Version :1 Date : juin 2001 Pagination :1/2 1° Objet : Quantifier voire qualifier la flore microbienne pour une unité de surface donnée d'un article textile. 2° Champ d'application : ¾ En blanchisserie, en secteur de finition au niveau de l’expédition ¾ Dans uploads/Philosophie/ prelevements-d-x27-environnement.pdf