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FICHE MÉTHODE 17 Effectuer une CCM Vidéo La chromatographie sur couche mince (C

FICHE MÉTHODE 17 Effectuer une CCM Vidéo La chromatographie sur couche mince (CCM) permet de séparer les espèces chimiques contenues dans un mélange liquide et aussi de les identifier par comparaison. ➊ Préparation de la plaque ➋ Dépôt des espèces chimiques ➌ Élution ligne de dépôt éluant capillaire solution à analyser plaque ligne de dépôt éluant capillaire solution à analyser plaque éluant ligne de dépô front du solvan plaque Découper une plaque de chromatogra- phie à la bonne dimension (le vérifier dans une cuve vide). Y tracer au crayon une ligne de dépôt très légère à environ 15 mm de son bord inférieur ainsi qu’une marque pour chaque dépôt. Avec un capillaire, déposer sur la ligne de dépôt une microgoutte de chaque solution à analyser. Le diamètre des taches ne doit pas dépasser 3 mm. Si les espèces sont révélées par la lampe UV, vérifier qu’elles sont visibles avant élution. Introduire la plaque dans la cuve. Les dépôts ne doivent pas tremper dans l’éluant. Refermer et laisser la migration s’effectuer le plus loin possible (ou jusqu’à ce que l’éluant arrive à environ 15 mm du bord supé- rieur de la plaque). ➍ Séchage de la plaque ➎ Révélation ➏ Lecture du chromatogramme éluant ligne de dépôt front du solvant plaque diiode + sable éluant ligne de dépôt front du solvant plaque diiode + sable 1 2 espèce de référence mélange ligne de dépôt front de l’éluant même espèce chimique Dès la sortie de la plaque de la cuve à élution, marquer au crayon le niveau atteint par le front du solvant sur la plaque. La laisser sécher à l’air pendant quelques minutes éventuellement sous une hotte aspirante. Choisir un mode de révélation en liai- son avec les propriétés de l’espèce que l’on veut révéler : diiode (schéma- tisé ici), lampe UV ou révélateur plus spécifique. Entourer les taches qui sont appa- rues. Le chromatogramme est prêt. Lecture verticale : lorsqu’un dépôt se sépare en plusieurs taches, l’échantillon testé est un mélange. Lecture horizontale : sur une même plaque, une même espèce chimique présente dans des dépôts différents migre à la même hauteur. uploads/Politique/ impo-ertan-nnt.pdf