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Procalcitonine FS – Page 1 844 7318 10 03 00 Avril 2020/2 Procalcitonin FS* (Procalcitonine FS*) Présentation Référence Composition du kit 1 7318 99 10 598 320 (2 x 160) sur cobas c 510 1 7318 99 10 930 R1 2 x 18 mL + R2 2 x 6 mL Emploi Prévu Réactif de diagnostic in vitro pour la détermination quantitative de la procalcitonine (PCT) dans le sérum et le plasma sur systèmes photométriques. Intérêt Clinique La septicémie est un dysfonctionnement d'organe mettant la vie en danger causé par une réponse immunitaire de l'hôte non régulée à l'infection. Elle répresente un problème de santé mondial et l'une des principales causes de décès dans le monde, touchant environ 48,9 millions de personnes chaque année. [1-3] Le diagnostic et le traitement précoces de la septicémie demeurent un grand défi dans les unités des soins intensifs. La procalcitonine (PCT), précurseur thyroïdien de la calcitonine, est un polypeptide de 116 acides aminés avec un poids moléculaire d'environ 13 kDa. Sous des conditions physiologiques, la PCT est exclusivement synthétisée par des cellules C thyroïdiennes et se décompose en trois fragments, terminal N, calcitonine et catacalcin. [3-8] Les concentrations sériques de la PCT chez les individus sains sont très faibles (< 0,05 ng/mL). En réponse aux infections systémiques microbiennes et à la septicémie, la PCT est ubiquitairement exprimé dans de multiples tissus par stimulation par des cytokines inflammatoires ou des endotoxines bactériennes et peut augmenter jusqu'à 1000 ng/mL. [5-8] Méthode Test immunoturbidimétrique renforcé par des particules. Détermination de la concentration de PCT par mesure photométrique de la réaction antigène-anticorps entre les anticorps contre le PCT humain liés aux particules de polystyrène et le PCT présent dans l'échantillon. Réactifs Composants et Concentrations R1: TRIS pH 6.5 0.1 mol/L R2: TRIS pH 9.0 0.1 mol/L Anticorps polyclonaux (de chèvre) liés de manière covalente au polystyrène contre le PCT humain Conservation et Stabilité des Réactifs Les réactifs sont stables jusqu’à la fin du mois de la date de péremption indiquée, conservés entre +2 °C et +8 °C en évitant toute contamination. Ne pas congeler les réactifs et les conserver à l'abri de la lumière. Avertissements et Précautions d’Emploi 1. Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (0,9 g/L) comme conservateur. Ne pas avaler ! Eviter le contact avec la peau et les muqueuses. 2. Réactif 2 contient de la matière animale. Manier le produit comme potentiellement infectieux selon les précautions universelles et de bonne pratique de laboratoire. 3. Dans de très rares cas, des spécimens de patients souffrant de gammapathie peuvent produire des valeurs faussées [9]. 4. Merci de vous référer aux fiches de sécurité et prendre les précautions nécessaires pour l’utilisation de réactifs de laboratoire. Pour le diagnostic, les résultats doivent toujours être exploités en fonction de l’historique médical du patient, des examens cliniques ainsi que des résultats obtenus sur d’autres paramètres. 5. Uniquement à usage professionnel. Gestion des Déchets Se référer aux exigences légales nationales. Préparation du Réactif Le réactif est prêt à l’emploi. Matériels Nécessaires Equipement général de laboratoire Spécimen Sérum ou plasma recueilli sur héparine Stabilité [10, 11] : 24 heures de +20 à +25 °C 5 jours de +2 à +8 °C 14 jours à –20 °C Une seule congélation. Eliminer les échantillons contaminés. Mode Opératoire Des applications adaptées aux systèmes automatisés sont disponibles sur demande. Paramètre de base sur cobas c 501 Longueur d’onde 660 nm Température 37°C Mesure 2 point end (2 points final) Echantillon/calibrant 10 µL Réactif 1 120 µL Réactif 2 40 µL Ajout réactif 2 Cycle 35 (~300 s) Absorbance 1 Cycle 41 (~350 s) Absorbance 2 Cycle 70 (~600 s) Calibrage RCM Note: Pour des procédures adaptées, calculer les volumes d'échantillon, du calibrant et des réactifs de manière appropriée et respecter exactement le minutage. Calcul La concentration de la PCT dans les échantillons inconnus est calculée par une courbe d'étalonnage à l'aide d'un modèle mathématique approprié tel que RCM ou spline. La courbe d'étalonnage est tracée avec six calibrants de concentrations différentes, y compris une valeur zéro basée sur une matrice. Stabilité de la calibration : 4 semaines Calibrants et Contrôles TruCal PCT de DiaSys est recommandé pour la calibration. Les valeurs du calibrant TruCal PCT ont été établies dans une comparaison de méthode entre la Procalcitonine FS et un test disponible dans le commerce sur Roche cobas e 411. Chaque laboratoire établira la procédure à suivre si les résultats se situent en dehors des limites de confiance. Référence Présentation TruCal PCT 1 7310 99 10 082 6 x 1 mL TruLab PCT Niveau 1 5 9970 99 10 046 3 x 1 mL TruLab PCT Niveau 2 5 9980 99 10 046 3 x 1 mL Performances Données évaluées sur cobas c 501 Les données exemplaires citées en bas peuvent varier légèrement en cas de conditions de mesure déviantes. Domaine de mesure de 0,2 jusqu’à 50 ng/mL dépend de la concentration du calibrant le plus élevé. Au-delà de cet intervalle, diluer le spécimen 1 + 4 avec de la solution NaCl (9 g/L) et multiplier le résultat par 5. Limite de détection** 0,2 ng/mL Pas d'effet Prozone jusqu'à 1000 ng/mL Procalcitonine FS – Page 2 844 7318 10 03 00 Avril 2020/2 Substance interférente Interférences ≤ 10 % jusqu’à Acide ascorbique 150 mg/dL Bilirubine (conjuguée) 60 mg/dL Bilirubine (non conjuguée) 60 mg/dL Hémoglobine 1000 mg/dL Lipémie (Triglycerides) 1500 mg/dL Facteur rhumatoïde 1000 IU/mL α-CGRP (humain) 10 µg/mL β-CGRP (humain) 10 µg/mL Calcitonine (humaine) 20 ng/mL Céfotaxime 180 mg/dL Dobutamine 22.4 µg/mL Dopamine 26 mg/dL Furosémide 4 mg/dL Imipénem 0.5 mg/mL Noradrénaline (Norépinéphrine) 4 µg/mL Vancomycine 3 mg/dL Pour plus d’information au sujet des interférences, voir Young DS [12]. Précision Intra série (n=20) Échantillon 1 Échantillon 2 Échantillon 3 Moyenne [ng/mL] 0,446 1,98 9,73 CV [%] 6,53 4,17 3,74 Inter série (n=20) Échantillon 1 Échantillon 2 Échantillon 3 Moyenne [ng/mL] 0,500 1,87 9,48 CV [%] 7,34 5,00 3,56 Comparaison de méthodes (n=148) Test x Procalcitonine concurrent Test y Procalcitonine FS de DiaSys Pente 0,919 Ordonnée à l’origine 0,041 ng/mL Coefficient de corrélation 0,983 ** selon CLSI document EP17-A2, Vol. 32, No. 8 Valeurs Usuelles Comme suit [13, 14]: Sérum et plasma : < 0,5 ng/mL Une infection systémique (septicémie) est peu probable. Des niveaux bas n'excluent pas une infection, car des infections localisées (sans signes systémiques) peuvent être associées à des niveaux aussi bas. ≥ 0,5 et < 2 ng/mL Une infection systémique (septicémie) est possible. Le patient doit être surveillé de près. ≥ 2 et < 10 ng/mL Représente un risque élevé de septicémie grave et/ou de choc septique. ≥ 10 ng/mL Septicémie grave ou choc septique, presque exclusivement dus à une infection bactérienne grave. Note: Les niveaux de la PCT peuvent être élevés indépendamment de l'infection bactérienne chez les nouveau-nés (< 3 premiers jours de vie, élévation physiologique) [14-16]. Des taux élevés de la PCT peuvent également se produire chez les patients souffrant de conditions médicales particulières, par exemple un polytraumatisme, une chirurgie majeure et des brûlures graves. [6, 7, 13, 14] Chaque laboratoire devrait vérifier si les valeurs usuelles sont transmissibles à sa propre population patiente et déterminer ses propres valeurs de référence si besoin. Références Bibliographiques 1. Rudd KE et al. Global, regional, and national sepsis incidence and mortality, 1990–2017: analysis for the Global Burden of Disease Study, The Lancet 2020; 395 (10219): 200-211. 2. Singer M et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA 2016; 315(8): 801-810. 3. Fleischmann C et al. Assessment of global incidence and mortality of hospital-treated sepsis. Current estimates and limitations. Am J Respir Crit Care Med. 2016; 193(3): 259– 272. 4. Maruna P, Nedelníková K and Gürlich R. Physiology and genetics of procalcitonin. Physiol Res. 2000; 49(Suppl 1): S57–S61. 5. Christ-Crain M, Müller B. Procalcitonin in bacterial infections- hype, hope, more or less?. Swiss Med Weekly. 2005; 135: 451-460. 6. Becker KL et al. Procalcitonin in sepsis and systemic inflammation: a harmful biomarker and a therapeutic target. British journal of pharmacology 2010; 159(2): 253-264. 7. Becker KL et al. Procalcitonin and the calcitonin gene family of peptides in inflammation, infection, and sepsis: a journey from calcitonin back to its precursors. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 2004; 89(4): 1512-1525. 8. Müller B et al. Ubiquitous expression of the calcitonin-i gene in multiple tissues in response to sepsis. J Clin Endocrinol Metab 2001; 86(1): 396-404. 9. Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. ClinChemLabMed 2007; 45(9): 1240-1243. 10. Gruzdys V et al. Method Verification Shows a Negative Bias between 2 Procalcitonin Methods at Medical Decision Concentrations. The journal of applied laboratory medicine 2019; 4(1): 69-77. 11. Meisner M. Procalcitonin-influence of temperature, storage, anticoagulation and arterial or venous asservation of blood samples on procalcitonin concentrations. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine 1997; 35(8): 597-602. 12. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 5th ed. Volume 1 and 2. Washington, DC: The American Association for Clinical Chemistry Press 2000. 13. Harbarth S et al. Diagnostic value uploads/Sante/ pi-f-pct-2.pdf