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B44 microbio l2sv cours 5 2019 20

II- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE II - La détermination du niveau de l'activité antimicrobienne Essentiel pour une thérapie appropriée ? Estimation de l ? agent et de la dose thérapeutique appropriés ? Méthodes de dilution ? En milieu liquide bouillon ?? méthodes de micro- ou macro-dilution - Tubes puits de milieu antibiotique C croissantes - Inoculation avec une population standard de l'organisme testé Incubation CMI - Transfert d'un échantillon des tubes puits sans croissance dans un milieu frais dépourvu d'antibiotique liquide ou sur milieu solide Incubation CML ou CMB Après incubation Antibio g mL Après incubation CMI g mL CML g mL CMB CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE Détermination de la CMI Test en macro-dilution g mL M Archambaud g mL g mL CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE Détermination de la CMI Test en micro-dilution Microplaque puits CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE Détermination de la CMI et de la CML ou CMB Transfert d ? un échantillon sur milieu solide puis incubation CMI mg L CML mg L http www nios ac in media documents dmlt Microbiology Lesson- pdf CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE M Archambaud CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE ? Méthodes de dilution ? En milieu solide gélose méthode de référence - Antibiotique incorporé dans le milieu gélosé - Inoculation avec ?? souches Incubation CMI souches testées g mL CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE ? Méthodes de dilution ? En milieu solide gélose Détermination de la CMI Inoculateur à têtes multiples appareil de Steers ? Plus de souches ensemencées par bo? te CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE ? Méthodes de dilution ? En milieu solide gélose Détermination de la CMI CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE ? Méthode de di ?usion la méthode des disques méthode de Kirby-Bauer Principe simple - Disque imprégné d ? ATB placé sur gélose inoculée préalablement - Di ?usion radiale de l ? ATB dans la gélose ? gradient de concentration - Incubation - Halo clair si inhibition de croissance ? Mesure de l'activité antibactérienne des antibiotiques antibiogramme standard Diamètre du halo fonction de la - Sensibilité de la souche - Concentration de l ? inoculum bactérien - Solubilité et vitesse de di ?usion de l'antibiotique ? Comparaison directe de ATB impossible ? Standardisation des paramètres - Nature et quantité de milieu - Concentration de l'inoculum - Diamètre du disque et quantité d'antibiotique sur le disque ? Lecture des résultats de l ? antibiogramme possible droites de concordance CII- LA CHIMIOTHERAPIE ANTIMICROBIENNE ? Droites de concordance ou droites de régression pré-établies - Par des laboratoires spécialisés - Dans des conditions standardisées - Avec ? une centaine de souches de sensibilités ?? ? au moins genres ?? Diamètre du halo en mm mesuré par méthode de di ?usion Droite de concordance établie pour l'amoxicilline avec un disque chargé à g CMI log en g mL déterminée par méthode de dilution Pour un antibiotique donné En théorie dans les conditions standards on obtient En pratique résultats qualitatifs car ? CMI d ? une souche en fonction du diamètre du halo ? Niveau de résistance S