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Sterilisation et preparation des milieux de culture

République Algérienne Démocratique et Populaire Ministère de l ? Enseignement Supérieur et de la Recherche scienti ?que Université Saad Dahleb Blida Faculté de science de la nature et de la vie M Nutrition et diététique humaine Microbiologie des aliments appliquée TP Stérilisation et préparation des milieux de culture Réalisé par Amdegha Mounir Groupe CIntroduction La stérilisation est l'opération qui consiste à éliminer les micro-organismes d'un objet et ce de manière durable En microbiologie le but de la stérilisation est d'une part de ma? triser les microorganismes introduits dans le milieu d'étude et d'autre part d'éviter la contamination du milieu extérieur et des personnes Il existe deux grands moyens de Stérilisation La chaleur La ?ltration Les micro-organismes exigent pour leur croissance des aliments Ces aliments leur sont fournis au laboratoire par des milieux nutritifs ou milieux de culture Pour permettre le développement des microbes le milieu doit Contenir tous les aliments nécessaires en quantité su ?sante et en proportion relative convenable le milieu doit être nutritif et équilibré Avoir un pH une pression osmotique une viscosité des caractéristiques physicochimiques compatibles avec la vie microbienne Comme les besoins nutritionnels des microorganismes et les conditions de leurs développements sont très variés il n'existe évidemment aucun milieu universel sur lequel tous les microbes soient capables de se multiplier Toutefois certains milieux conviennent au développement d'une grande variété de germes microbiens le choix de tels milieux repose sur la connaissance de l'habitat naturel et de la physiologie alimentaire du groupe de germes que l'on désire cultiver Les milieux sont soit liquides soit solides On utilise fréquemment la gélose ou agar-agar un polymère de sucre tiré d'une algue rouge Elle ne constitue qu'un support du milieu de culture Capable d'absorber à fois son poids d'eau la gélose forme une gelée qui se liqué ?e à - en refroidissant cette gelée demeure en surfusion jusqu'à - et prend une masse aux températures inférieures La gélose est généralement incorporée aux milieux liquides à la dose de à Les milieux solides présentent un grand intérêt en Microbiologie Ils permettent lorsque la technique d'ensemencement est convenable le développement des germes en colonies apparentes isolées les unes des autres provenant en principe de la multiplication d'un seul germe clone et à partir desquelles peuvent être obtenues des cultures pures But de TP S'initier à la manipulation aseptique à l ? organisation du poste de travail et aux techniques de stérilisation Connaitre les di ?érents types de milieux de culture utilisés en microbiologie S ? initier avec les techniques de préparation des milieux de culture Les méthodes de stérilisation I La stérilisation par la chaleur La chaleur détruit les bactéries et les spores On distingue les procédés à chaleur sèche ? ou humide ? Chaleur sèche Ca Flambage Le passage dans la amme bec BUNSEN de la surface de matériel non in ammable assure une parfaite stérilisation On stérilise de cette façon les ?ls de platine et les pipettes Pasteur Zone de stérilité d ? un bec bunsen B Four pasteur C'est