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Devoir 8 02 ? Principe gel ?ltration La chromatographie par ?ltration sur gel dite aussi chromatographie d'exclusion - di ?usion est une technique qui permet une séparation simple et rapide des molécules solubles dans l'eau ou certains solvants organiques

? Principe gel ?ltration La chromatographie par ?ltration sur gel dite aussi chromatographie d'exclusion - di ?usion est une technique qui permet une séparation simple et rapide des molécules solubles dans l'eau ou certains solvants organiques en fonction de leur taille donc de leur masse molaire Un gel est constitué par un empilement de grains poreux Le grain est formé par l'enchevêtrement de macromolécules linéaires reliées entre elles par voie chimique de façon à former un réseau à trois dimensions aux mailles plus ou moins serrées selon le degré de réticulation De nombreux gels sont maintenant disponibles les gels de dextranes les gels de polyacrylamide les gels d'agarose ils sont choisis en fonction des contraintes expérimentales Chaque gel est caractérisé par un domaine de fractionnement qui est fonction de la grosseur des mailles du réseau et donc de la réticulation Au- dessus d'un poids moléculaire donné appelé limite d'exclusion toutes les molécules sont traitées par le gel de la même façon il n'y a plus chromatographie ? Rechercher exemples d'enzymes utilisées dans le milieu industrielle rôle dans le processus de fabrication à conna? tre Nom enzyme Protéases excrétées par les bactéries Cellulases et ligninases Amylases Type d ? industrie Détergents biologiques Industrie du carburant biologique Industrie de l'amidon Rôle dans le processus de fabrication à conna? tre Pré-trempage et applications liquides directes pour enlever les taches des vêtements d'origine protéique Hydrolyse de la cellulose dans les sucres fermentables lors de la production d'éthanol à partir de la cellulose Récupération des résidus de lignine Convertissent l'amidon en glucose et di ?érents sirops Convertit le glucose en fructose pour produire des sirops à partir de féculents Ces sirops ont des propriétés adoucissantes et des valeurs calori ?ques plus basses que le saccharose pour le même niveau de douceur ? - Méthode d' immobilisation Rétention mécanique d ? enzymes dans une région de l ? espace avec maintien de l ? activité catalytique pour une utilisation répétée ou continue L ? immobilisation des enzymes induira une catalyse hétérogène ? Savoir schématiser les di ?érentes méthodes d'immobilisation d'enzyme C C ? Savoir décrire en ou phrases les méthodes d'immobilisation Pouvoir citer pour chaque méthode ses avantages et inconvénients Méthode Sans liaisons covalent entre enzyme et support Avec liaisons covalent entre enzyme et support Sous nom Con ?nement Fibres creuses Gels Description Inclusion dans la membrane de ?bres creuses Inclusion dans un gel en bille Inclusion Fibres Inclusion dans des n ?uds de ?bres Encapsulation Inclusion dans une membrane capsule de rétention Avantages Facile à préparer grande stabilité Fixation covalente Fixation de l ? enzyme par une liaison covalente sur un support Rétention forte de l ? enzyme stabilité grande Avec support préexistant Fixation non covalente Adsorption Les enzymes sont retenues à la surface d ? un support insoluble par établissement Très grande facilité de mise en ?uvre Possibilité de d ? interactions régénérer le support secondaires par désorption et entre les groupes remplacement de fonctionnels de l ? enzyme l ? enzyme et du