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Tp n 05 epreuve direct de compatibilite au laboratoire edc

Université Mouloud Mammeri de Tizi-Ouzou Faculté de Médecine Département de pharmacie Laboratoire d ? hémobiologie TP N épreuve direct de compatibilité au laboratoire EDC Introduction L ? EDC au laboratoire des PSL est fondamentale pour la prévention des accidents Immuno- hématologiques de transfusion sanguine C ? est un examen complémentaire de la RAI qui n ? est pas systématique L ? EDC est destinée pour Un receveur possédant un ou plusieurs anticorps irréguliers surtout sils n ? ont pas pu être détectés par la RAI Nouveau né possédant un TCD ou issu d ? une maman allo immunisé Le f ?tus ou patients ayants des phénotypes rares Principe L ? épreuve de compatibilité n ? est qu ? une RAI e ?ectuée sur le sérum du malade qui va recevoir une transfusion en présence de globules rouges des unités de sang à transfuser Elle doit donc s ? e ?ectuer comme la recherche d ? Ac au laboratoire et avec les mêmes garanties techniques Le principe de la méthode est simple A l ? aide d ? une gamme d ? hématies tests détectrice sang du donneur dont la constitution est connue on cherche à dépister puis à identi ?er un anticorps ou un mélange d ? anticorps dans le sérum du patient Matériels et Réactifs Tubes à essai Microplaque Centrifugeuse Eau physiologique à Enzyme papaine Antiglobuline Sérum du malade Techniques L ? EDC doit être réalisé ou moins par les deux tests obligatoires de la RAI TCI et test aux enzymes protéolytiques A Test aux enzymes exemple papa? ne Technique sur tube ? laver le culot globulaire trois fois en solution physiologique ? ajouter à un volume du culot lavé un même volume de papaine et incuber le mélange pendant min dans l ? étuve ? relaver trois fois les hématies traitées à l ? eau physiologique puis préparer une suspension à ? Ajouter à un volume de la suspension un volume de sérum à étudier Laisser incuber min à c ? Lire le résultat de la réaction C Technique sur microplaque Ajouter à un volume d ? hématies papainées deux volumes du sérum du malade et procéder de la même manière que précédemment B Test de Coombs indirect Technique sur tube ? Laver les hématies du culot à l ? eau physiologique puis préparer une suspension à ? Mettre dans un tube un volume de la suspension globulaire avec un volume du sérum à tester ? Laisser incuber h à c et relaver les hématies sensibilisées trois fois à l ? eau physiologique ? Ajouter à une goutte d ? hématies sensibilisées une goutte d ? antiglobuline puis centrifuger à faible vitesse pendant min ? E ?ectuer une lecture macro et microscopique C Test d ? agglutination en milieu salin c Technique sur tube ? Laver trois fois le culot globulaire à l ? eau physiologique puis préparer avec les hématies lavées une suspension à ? Mettre dans un tube une goutte de la suspension et deux gouttes