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Les tps amp les tds du module de cytologie

Université Oran Faculté de Médecine Département de Médecine Service d ? Histologie-Embryologie Dr N Belarbi Amar Hamadouche Les Travaux Dirigés Du Module De Cytologie - I- Les Méthodes d ? étude de La Composition Biochimique des Cellules L ? étude de La Composition Biochimique des Cellules Passe Par Deux étapes qui Sont L ? éclatement de La Cellule A ?n de Récupérer des Organites et Puis La Séparation Des Organites Pour étudier Un groupe des Organites - L ? éclatement de La Cellule ? Les Méthodes de Fractionnement Subcellulaire consistent à séparer Les Di ?érents composants cellulaires par Destruction De La membrane Plasmique puis par Désorganisation de La Cellule L ? Homogénat ? Il Existe Plusieurs Techniques qui Permet d ? éclater La Cellule Physiques Ultrasons ou Hautes pressions Chimiques Choc Osmotique Action de Détergents ou d ? enzymes Ou Mécaniques Pistons et Cylindres Comme Le Tube de Potter ? L ? Homogénat est Conservé à C pour La Préservation Maximale des structures et Les Fonctions des Di ?érents constituants cellulaires et Des Enzymes ? Quel Est Le Contenu de l ? Homogénat - Les Noyaux Les Mitochondries Les Lysosomes et Les Peroxysomes - Des Fragments provenant des Ruptures Membranaires La Membrane Plasmique Le Réticulum Endoplasmique L ? Appareil de Golgi Se Refermant Immédiatement pour Donner de Petites Vésicules Fermées Appelées Les Microsomes ? - La Séparation Des Organites a- La Séparation Des Organites Par Ultracentrifugation Di ?érentielle - C ? est Une Série de Centrifugations de plus en plus Longues Et Donnant Des Champs de Gravité de plus en plus élevés pour Fractionner L ? Extrait Initial En Une Série De Culots Et Surnageant - Une Technique Préparatoire Rapide Simple et permettant de Manipuler Des Grandes Quantités de Matériel Sans Donner cependant de Fractions parfaitement pures b- La Séparation Des Organites Par Ultracentrifugation ? La Séparation Des Organites Par Centrifugation Sur Gradient de Densité Préformé Le Protocole - Un Dépôt d ? une Fine Couche de l ? Homogénat à La Surface Du Gradient contenu dans le Tube à Centrifuger Une Solution de Saccharose ou de glycérol dont La Concentration varie de Façon Régulière et décroissante Du bas vers Le Haut du Tube variation Linéaire et continue ou Bien Discontinue et par paliers - La Centrifugation à vitesse élevée Pendant quelques Heures - La Migration Des particules dans Le Gradient jusqu ? à une position d ? équilibre qui correspond à sa densité - L ? Obtention d ? Anneaux le long du Tube centrifugation zonale qui peuvent être Récupérés séparément par Aspiration La Technique Permettant D ? obtenir une séparation des constituants cellulaires en une seule étape D ? un grand degré de pureté Ne Permettant de Manipuler que de Petits volumes de Matériel Biologique ? La Séparation Des Organites Par Centrifugation Sur Gradient de Densité Auto Formé - La Dilution de l ? Homogénat dans une solution concentrée de Chlorure de Césium CsCl - La Centrifugation de cette préparation à plus de g pendant plusieurs Heures -