Remerciez-le!

Remerciez @Admin pour avoir partagé cet document gratuitement, de la manière la plus simple, en partageant sur les réseaux sociaux.

1 APOLIPOPROTEIN B Cette notice contient des informations relatives à l'utilisa

1 APOLIPOPROTEIN B Cette notice contient des informations relatives à l'utilisation du dosage Apolipoprotein B sur les analyseurs ARCHITECT c Systems. Faire attention aux modifications - Révision d’octobre 2012 Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas strictement respectées. Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott sur www.abbottdiagnostics.com. fr APOLIPOPROTEIN B 9D93 B9D9D2 G0-1447/R03 Légende des symboles utilisés Contient de l’azide de sodium. Au contact d’un acide, dégage un gaz très toxique. Réactif 2 Mandataire au sein de la Communauté européenne Référence Identifie les produits à utiliser en association Numéro de série Code Article International Consulter les instructions d’utilisation Informations requises uniquement pour les Etats-Unis d’Amérique Fabricant Dispositif médical de diagnostic in vitro Suffisant pour Numéro de lot Conserver à Produit au Japon Date de péremption Réactif 1 DENOMINATION APOLIPOPROTEIN B DOMAINE D'APPLICATION Le dosage Apolipoprotein B (ApoB) est utilisé pour la détermination quantitative de l'Apolipoprotein B dans le sérum ou le plasma humain. RESUME ET EXPLICATION DU TEST Les lipides synthétisés dans l'intestin ou dans le foie doivent être transportés vers les tissus et dans les organes afin de pouvoir remplir leurs différentes fonctions métaboliques. Etant donné le caractère hydrophobe des lipides neutres, des triglycérides et des esters du cholestérol, les lipides ne pourraient être transportés et distribués par le plasma sans une certaine forme d'adaptation hydrophile. Les lipides sont transportés au moyen d'une série de structures micellaires connues sous le nom de lipoprotéines et constituées d'une monocouche externe de protéines (Apolipoproteins) et de lipides polaires, et d'un noyau interne de lipides neutres. L'Apolipoprotein B est le constituant protéique majeur de toutes les lipoprotéines autres que le HDL. Il en existe deux formes principales : ApoB48 et ApoB100. L'ApoB48 est synthétisée dans l'intestin et est présente sur les chylomicrons ainsi que sur leurs remnants. L'ApoB100 est synthétisée dans le foie et est présente sur les VLDL, IDL et LDL. La structure de l'ApoB48 est la même que celle du domaine N-terminal (48 %) de l'ApoB100. La biochimie de base et l'importance clinique de l'ApoB ont toutes deux fait l'objet de recherches importantes. C'est pourquoi, une grande quantité d'informations a été rassemblée concernant sa synthèse, son incorporation dans les lipoprotéines et le potentiel athérogène des lipoprotéines contenant de l'Apolipoprotein B telles que le VLDL et le LDL.1 Le LDL qui contient une copie unique de la molécule d'ApoB100, transporte les lipides dans les cellules en se liant à des récepteurs LDL présents à la surface de la plupart des cellules. L'accumulation des lipides intracellulaires en excès peut entraîner des maladies vasculaires athérosclérotiques. Des défauts génétiques au niveau du récepteur LDL lui-même sont également responsables d'hypercholestérolémie familiale pouvant entraîner une athérosclérose précoce.2 De nombreuses études ont démontré l'utilité diagnostique des analyses d'Apolipoprotein. Un groupe international de chercheurs a affirmé que “l'ApoB s'est avéré être un meilleur indicateur que le cholestérol LDL pour la prédiction des risques d'accidents vasculaires et de la progression des maladies vasculaires lors d'une série d'études épidémiologiques prospectives”. En ce qui concerne le rapport ApoB/ApoA-I, ce groupe affirme que le rapport ApoB/ApoA-I fournit plus d'informations sur les risques cardiovasculaires que les indicateurs conventionnels : cholestérol total/HDL-C, LDL-C/HDL-C ou non-HDL-C/LDL/C.3 La détermination de l’ApoB constitue une aide dans le diagnostic d’une maladie des artères coronaires précoce, de l'hyper-β-lipoprotéinémie et de l'hypo-β-lipoprotéinémie.4 PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE Le dosage ApoB est un dosage immunoturbidimétrique qui consiste à mesurer l'augmentation de la turbidité de l'échantillon provoquée par la formation de complexes immuns insolubles lors de l'ajout de l'anticorps anti-ApoB à l'échantillon. L'échantillon contenant l'ApoB est incubé avec un tampon ( ), et le blanc-échantillon est déterminé avant l'addition de l'anticorps anti-ApoB ( ). En présence d'un excès d'anticorps approprié, la concentration en ApoB peut être mesurée en fonction de la turbidité. Méthodologie : Immunoturbidimétrie REACTIFS Kit de réactifs Le kit de réactifs Apolipoprotein B, 9D93-21, contient deux réactifs liquides prêts à l'emploi conditionnés comme suit : 3 x 21 ml 3 x 9 ml Le nombre de tests réalisables par kit est estimé à 243. Ce calcul est fondé sur le volume minimum de réactif dans chaque kit. Composants réactifs Concentration Polyéthylène glycol 30 g/l TRIS 100 mmol/l Antisérum anti-Apolipoprotein B humaine (chèvre) 50 % TRIS 100 mmol/l Composants inactifs : et contiennent de l'azide de sodium comme conservateur (0,1 %). MANIPULATION ET CONSERVATION DES REACTIFS Manipulation des réactifs Si des bulles d'air sont présentes dans la cartouche de réactif, les éliminer à l'aide d'un bâtonnet neuf. Il est également possible de laisser les réactifs reposer à la température de conservation appropriée pour permettre aux bulles de se dissiper. Afin de limiter la perte en volume, ne pas utiliser de pipette de transfert pour éliminer les bulles. ATTENTION : Les bulles d'air présentes dans les réactifs peuvent compromettre la détection correcte du niveau de réactif dans la cartouche, entraînant une aspiration insuffisante du réactif susceptible d'avoir une incidence sur les résultats. Conservation des réactifs Les réactifs non ouverts sont stables jusqu'à leur date de péremption s'ils sont conservés entre 2 et 8 °C. Les réactifs conservés à bord de l'analyseur sont stables pendant environ 57 jours si les résultats des contrôles de qualité répondent aux critères de validation. Si ce n'est pas le cas, se référer au paragraphe CONTROLE DE QUALITE de cette notice. Indications d’altération Une instabilité ou une altération est à craindre si l’on constate des précipités, des signes visibles de fuite, une turbidité importante, une croissance microbienne ou si la calibration ne répond pas aux critères indiqués dans la notice correspondante et/ou dans le Manuel Technique ARCHITECT, ou si les contrôles ne répondent pas aux critères indiqués. MISES EN GARDE ET PRECAUTIONS Précautions d'emploi • • Pour diagnostic in vitro. • Ne pas utiliser les composants au-delà de leur date de péremption. • Ne pas mélanger des composants provenant de kits portant des numéros de lots différents. • Ne pas mélanger de réactif frais avec des réactifs en cours d'utilisation. • ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons humains. Il est recommandé de considérer tous les produits d'origine humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon les règles “OSHA Standard on Bloodborne Pathogens”.5 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 26 ou autres règles de biosécurité en vigueur7,8. • La mise en garde et la précaution suivantes s’appliquent au et au : Contient de l’azide de sodium. EUH032 Au contact d’un acide, dégage un gaz très toxique. Ne se débarrasser de ces produits et de leurs récipients qu'en prenant toutes précautions d'usage. REMARQUE : Se référer au Chapitre 8 du Manuel Technique ARCHITECT pour des informations concernant la manipulation et l'élimination correctes des réactifs contenant de l'azide de sodium. • Des fiches de données de sécurité sont disponibles sur www.abbottdiagnostics.com ou en contactant le Service Clients Abbott. PRELEVEMENT ET MANIPULATION DES ECHANTILLONS Echantillons à utiliser Les échantillons de sérum et de plasma sont appropriés pour cette analyse. Il est recommandé d'utiliser des échantillons prélevés à jeun (> 12 heures).4,9 • Sérum : Utiliser du sérum prélevé selon les techniques standard de ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique avec ou sans gel séparateur. S’assurer que la coagulation est terminée avant d’effectuer la centrifugation. Centrifuger selon les instructions du fabricant des tubes pour garantir la séparation correcte du sérum des globules rouges. La coagulation de certains échantillons, notamment de ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peut durer plus longtemps. Des caillots de fibrine peuvent se former dans ces sérums et engendrer des résultats erronés. • Plasma : Utiliser du plasma prélevé selon des techniques standard de ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique. L'héparinate de lithium (avec ou sans gel séparateur), l'héparinate de sodium et l'EDTA peuvent être utilisés comme anticoagulants. S'assurer que la centrifugation est adéquate pour éliminer les plaquettes sanguines. Centrifuger selon les instructions du fabricant des tubes pour garantir la séparation correcte du plasma des globules rouges. 2 Pour connaître le volume total d'échantillon requis, se référer au paragraphe PARAMETRES DE DOSAGE de cette notice et au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Conservation des échantillons Sérum et plasma : Analyser des échantillons frais dans la mesure du possible. Eviter des cycles de congélation/décongélation répétés afin de minimiser les risques de dégradation des protéines. Température Durée maximale de conservation Bibliographie 2 à 8 °C 3 jours 10, 11 -20 °C 2 mois 10 -70 °C 1 an* 12 *Décongeler durant la nuit entre 2 et 8 °C. Guder et coll.10 recommandent de conserver les échantillons congelés à -20 °C en respectant les durées maximales de conservation indiquées ci-dessus. Dans la pratique, les laboratoires cliniques se voient cependant obligés d'établir une plage de température avoisinant -20 °C pour la conservation des échantillons. Cette plage peut être déterminée soit à partir des spécifications du fabricant de congélateurs, soit sur la base des procédures de uploads/s1/apo-b-pdf 1 .pdf