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TP2 : Propriétés des enzymes http://www.polyenzyme.com/images/a-Amylase.jpg Une

TP2 : Propriétés des enzymes http://www.polyenzyme.com/images/a-Amylase.jpg Une enzyme est une protéine qui : - Accélère une réaction chimique (c’est un catalyseur) - Est spécifique (action et substrat) - Reste intacte en fin de réaction Mode opératoire global : 15 ml d’une solution d’amidon 1 ml d’eau distillée Tube 1 1 ml d’amylase 15 ml d’une solution d’amidon Tube 2 15 ml d’une solution de saccharose 1 ml d’amylase Tube 3 Puis prélèvement d’une goutte de chaque tube toutes les 2 min, pour réaliser un test à l’eau iodée. Rappel : l’eau iodée est ……………………….., elle se colore en ……………en présence d’amidon. Problématique : L’α-amylase est-elle une enzyme? Pour répondre à cette problématique, nous devons répondre à trois problèmes : Rappel : (glucose)n + eau glucose + (glucose)n-1 amylase Problème n°2 : L’α-amylase est- elle spécifique ? Problème n°3 : L’α-amylase reste-t-elle intacte en fin de réaction ? Problème n°1 : L’α-amylase accélère-t- elle la transformation de l’amidon en glucose ? jaune orangée bleu Problématique : L’α-amylase est-elle une enzyme? Pour répondre à cette problématique, nous devons répondre à trois problèmes : Rappel : (glucose)n + eau glucose + (glucose)n-1 amylase Problème n°2 : L’α-amylase est- elle spécifique ? Problème n°3 : L’α-amylase reste-t-elle intacte en fin de réaction ? 15 ml d’une solution d’amidon 1 ml d’eau distillée Tube 1 1 ml d’amylase 15 ml d’une solution d’amidon Tube 2 Reste du tube n°2 3 ml d’amidon Problème n°1 : L’α-amylase accélère-t-elle la transformation de l’amidon en glucose ? 15 ml d’une solution d’amidon 1 ml d’amylase Tube 2 1 ml d’amylase 15 ml d’une solution de saccharose Tube 3 L’α-amylase accélère la transformation de l’amidon en glucose. Le tube 1 reste bleu, l’amidon n’a donc pas été hydrolysé au contraire du tube 2 où il disparaît peu à peu. Le test glucose aurait du nous permettre d’observer l’apparition de glucose dans le tube 2 et pas dans le tube 1. L’amylase présente dans ce tube 2 a donc permis l’accélération de la réaction d’hydrolyse. Problème n°1 : L’α-amylase accélère-t-elle la transformation de l’amidon en glucose ? Hypothèse : Phrase affirmative qui répond au problème selon votre opinion. Mode opératoire : 15 ml d’une solution d’amidon 1 ml d’eau distillée Tube 1 1 ml d’amylase 15 ml d’une solution d’amidon Tube 2 Conséquences vérifiables : Résultats que l’on aimerait obtenir pour que notre hypothèse soit vraie. L’eau iodée en contact avec la solution du tube 2 passera du bleu au jaune orangé plus rapidement qu’au contact du tube 1. Résultats (observations) : Tube 1 Tube 2 Interprétations : - Valider ou invalider notre hypothèse - Explications, c’est-à-dire expliquer les résultats pour pouvoir répondre au problème. Conclusion : Réponse simple au problème (sans aucune explication nouvelle). L’α-amylase accélère la transformation de l’amidon en glucose. Comparaison des résultats avec le témoin. Choisir une expérience permettant de répondre au problème. Penser à un témoin. Le témoin est le tube qui a un seul facteur de différents avec les autres. Généralement le témoin est la modélisation la plus proche du phénomène naturel étudié, le point de départ avant la modification de tel ou tel facteur. Témoin Problème n°2 : L’α-amylase est-elle spécifique ? Hypothèse : L’α-amylase est spécifique. Mode opératoire : 15 ml d’une solution d’amidon 1 ml d’amylase Tube 2 15 ml d’une solution de saccharose 1 ml d’amylase Tube 3 Conséquences vérifiables : Le test au glucose devrait être positif en fin d’expérience dans le tube 2 et négatif dans le tube 3. Résultats : Tube 2 Test au glucose positif ? Tube 3 Test au glucose négatif Interprétations : Le test au glucose étant positif dans le tube 2 en fin de réaction et l’amidon ayant disparu (test à l’eau iodée jaune orangé), l’amylase permet l’hydrolyse de l’amidon en glucose. Le test au glucose est négatif pour le tube 3, l’amylase ne permet donc pas l’hydrolyse du saccharose. L’amylase serait donc spécifique de l’hydrolyse de l’amidon en glucose. Conclusion : L’α-amylase semblerait être spécifique. Remarques : - Pour ceux dont le test au glucose du tube 2 est resté négatif. - Nous ne pouvons pas vraiment conclure quant à la spécificité de l’α-amylase. Problème n°3 : L’α-amylase reste-t-elle intacte en fin de réaction ? Hypothèse : L’α-amylase reste intacte en fin de réaction. Mode opératoire : Reste du tube n°2 3 ml d’amidon Glucose + amylase (intacte?) Remarque : Témoin ? Résultats : Tube 2 Interprétations: L’amidon disparaît de nouveau assez rapidement, l’α-amylase facilite donc toujours son hydrolyse en glucose. Elle est donc intacte. Remarque : - Nous ne pouvons pas vraiment conclure. Conclusion : L’α’amylase semble intacte en fin de réaction. Conséquences vérifiables : La couleur de l’eau iodée en contact avec le nouveau tube 2 va de nouveau passer du bleu au jaune orangé. Conclusion générale : L’α-amylase semble accélérer spécifiquement l’hydrolyse de l’amidon en glucose, tout en restant intacte en fin de réaction. L’α-amylase semble donc être une enzyme. uploads/Finance/ tp2-proprietes-des-enzymes.pdf