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REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINESTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUP

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINESTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SUPERIEUR Université Constantine 1 Faculté des Science de la Nature et de la Vie Département de Biologie écologie végétale Mémoire présenté en vue de l’obtention du Diplôme de Master Domaine : Sciences de la Nature et de la Vie Filière : Biologie Végétal Spécialité : Métabolisme secondaire Etude des huiles essentielles de la plante mentha piperita et tester leurs effets sur un modèle biologique des infusoires Présentée et soutenu par : - ABADLIA Maroua -CHEBBOUR Aicha Hana Jury d’évaluation : Président du jury : CHIBANI SALIH Rapporteur : BOUCHIHA HANENE Examinateur : BOUCHIBI NACERA le : 22/06/2014 Année universitaire 2013/2014 Remerciement Je remercie Dieu tout puissant de m'avoir accordé la force, le courage et les moyens a fin de pouvoir accomplir ce modeste travail. . Je remercié le juré : Mrs Chibani Salih ainsi Mme Bouchibi Nacera pour avoir l’honneur de présider ce jury. Ce mémoire a été dirigé par Bouchiha Hanén. L’importance qu’elle accorda dès le début de ce travail, à l’étude de cas et à son interprétation, contribua pour beaucoup à la progression de ce mémoire. De ce fait, je tiens à lui adresser mes sincères remerciements et je voudrais également lui exprimer ma reconnaissance pour ses conseils, sa disponibilité et son soutien. Je voudrais ensuite exprimer toute ma gratitude, reconnaissance et remerciement à tous mes enseignants: Mme Bouchoukh Imen, Baaziz Wided pour leur soutient et leur aide. Je souhaite également exprimer ma reconnaissance aux personnes qui ont participé de prés ou de loin à la réalisation de ce travail, surtou Merci à tous et à toutes. CHEBBOUR AICHA HANA Remerciement En préambule à ce mémoire, je souhaitais adresser mes remerciements les plus sincères aux personnes qui m'ont apporté leur aide et qui ont contribué à l'élaboration de ce mémoire ainsi qu’à la réussite de cette formidable année universitaire. Je tiens à remercier sincèrement madame Hanen BOUCHIHA , qui, en tant que Directeur de mémoire, s'est toujours montré à l'écoute et très disponible tout au long de la réalisation de ce mémoire, ainsi pour l'inspiration, l'aide et le temps qu'il a bien voulu me consacrer et sans qui ce mémoire n'aurait jamais vu le jour. Mes remerciements s’adressent également à madame Wided BAZIZ, pour sa générosité et la grande patience dont il a su faire preuve malgré ses charges académiques et professionnelles. Je n'oublie pas mes parents pour leur contribution, leur soutien et leur patience. Enfin, j'adresse mes plus sincères remerciements à tous mes proches ma grande mère Mimi allah yarhamha mes frères Mehdi Tarek et Minou ma sœur Sabrina mes nièce Milina Jomana et Razan et mes amies Sara Asma Yasmine , qui m'ont toujours soutenue et encouragée au cours de la réalisation de ce mémoire. Merci à tous et à ABADLIA MAROUA Dédicace A la mémoire de mes grands parents. A mes très chers parents mes frères ma sœur mon fiancé Hamza mes amies je dédie ce mémoire . ABADLIA Maroua Dédicace A mes très chers parents mes frères mes amies mon cousin Karim je dédie ce mémoire. CHEBBOUR Aicha Hana Liste des abréviations AFNOR : Association française de normalisation. HE : huiles essentielles. u.m.a : unité de masse atomique. COV : composé organique volatile. CONV : composé organique non volatile. Cm : centimètres. G : grammes. Mg : milligramme. Ml : millilitre. Mn : minutes. J : jours. SM : souche mère. R : répétition. CPG : Chromatographie en Phase Gazeuse. CCM : chromatographie sur couche mince. IC50: Concentration d'antioxydant requise pour diminuer la concentration du DPPH• initiale de 50%. Vtc : Vitamine c. DPPH : (1,1- Diphenyl-2-picryhydrazyl). IR : indice de réfraction Liste des tableaux Tableau 01 : Importance de l'utilisation de la médecine traditionnelle dans le monde (Who, 2002).............................................................................5 Tableau 02 : classification et reproduction des champignons.................21 Tableau 03 : classification de la menthe poivrée.....................................32 Tableau 04 :l'aspect, la couleur et l'odeur de l'huile essentielle étudiée selon les normes.......................................................................................44 Tableau 05: résultat du rendement...........................................................44 Tableau 06 : résultat d’IR........................................................................45 Tableau 07 : résultat de la densité............................................................46 Tableau 08 : différence entre menthol et menthone................................47 Tableau 09: résultats des criblages des tanins et des flavonoïdes...........48 Tableau 10: Caractères macroscopiques des souches..............................49 Tableau 11 : Caractères microscopiques des souches.............................50 Tableau 12 : Diamètres (cm) des zones d'inhibition des huiles essentielle de Mentha piperita....................................................................................52 Tableau 13 : résultats de l’activité antioxydante.....................................53 Tableau 14 : résultats de l’activité antioxydante.....................................55 Tableau 15: le pourcentage d’inhibition antioxydante de vitamine C.....56 Tableau 16 : résultat de l’IC50 de H.E de mentha piperita......................57 Tableau 17: dosage des protéines.............................................................57 Tableau 18 : dosage des lipides...............................................................59 7 Liste des figures Figure1 : quelques plantes aromatiques.......................................................................4 Figure 2 : des médicaments à base d’He......................................................................8 Figure 3 : utilisation d’He dans la cosmétique............................................................9 Figure 4. Diversité des structures de sécrétion des huiles essentielles........................10 FIGURE 5 : Schémas des principales formes de squelettes carbonés des mono et sesquiterpènes (modifié d’après Dudareva, Néré et al. 2006)......................................13 FIGURE 6 : Appareillage utilisé pendant l’hydrodistillation d’huile essentielle........14 Figure 7 : Entraînement à la vapeur d’eau ascendante et descendante........................15 Figure 8 : L’extraction par solvants volatils.................................................................16 Figure 9 : structure des moisissures.............................................................................20 Figure 10 : Classification des champignons (Kwon Chung et Bennett, 1992)............22 Figures 11 : feuilles et fleurs de la menthe poivrée.....................................................32 Figure 12 : montage d’hydrodistillation (clèvenger)....................................................34 Figure 13 : le refractomètre..........................................................................................35 Figure 14 : Ph mètre.....................................................................................................36 Figure 15 : appareillages CPG....................................................................................37 Figure 16 : extrait mèthanolique de la menthe poivrée................................................38 Figure 17 : principaux matériels du dosage.................................................................41 Figure 18 : huiles essentielles extraite..........................................................................44 Figure 19 : graphe représente la CPG de L’He de la menthe poivrée..........................46 Figure 20 : CCM..........................................................................................................46 Figure 21 : molécules de menthol...............................................................................47 Figure 22 : résultat de criblage....................................................................................48 Figure 23 : évolution de l’activité antifongique..........................................................52 Figure 24 : courbes représentent l’évolution de l’activité antioxydante de la Vc et He en fonction de l’absorbance..........................................................................................54 Figure 25: Réaction d’un antioxydant avec le radical DPPH.......................................55 FIFURE 26 : Evolution d’activité antioxydante en fonction de différentes concentrations D’HE de la menthe...............................................................................55 Figure 27 : Evolution d’activité antioxydante en fonction de différentes concentrations de vitamine C...............................................................................................................56 Figure 29 : Evolution du taux de protéines totales en fonction des concentrations croissantes des champignons.......................................................................................58 Figure 30 : Evolution du taux de lipides totaux en fonction des concentrations Croissantes des champignons.......................................................................................59 Sommaire -Liste des abréviations -Liste des figures -Liste des tableaux INTRODUCTION..........................................................................................................1 Partie bibliographique : Chapitre 1 : plantes aromatique et huiles essentielles....................................................4 1.plante aromatique........................................................................................................4 1.1. Définition :...........................................................................................................4 1.2. Les plantes aromatiques en Algérie.....................................................................4 2. les huiles essentielles :.............................................................................................6 2.1. Définition:...........................................................................................................6 2.2-histoire et origine :...............................................................................................6 2.3. Marché des huiles essentielles :.........................................................................7 2.4. Domaines d’utilisation des huiles essentielles...................................................7 2.5. Localisation des huiles essentielles dans la plante............................................9 2.6. Composition chimique....................................................................................10 2.7. Propriétés physico-chimiques.........................................................................13 2.8. Procédés d’obtention des huiles essentielles...................................................14 2.9. Conservation des huiles essentielles...............................................................17 2.10. Critères de qualité..........................................................................................18 2.11. Méthodes d’identification chimique des huiles essentielles.........................19 Chapitre 2 : Les moisissures 1- Généralité.........................................................................................................20 2- Morphologie et structure..................................................................................21 3- Classification....................................................................................................21 4- Habitat et pouvoir pathogène............................................................................21 5- nutrition et reproduction...................................................................................22 5-1- Facteurs nutritifs........................................................................................23 5-2- Modes de reproduction.............................................................................23 6- Isolement des moisissures..............................................................................24 7- Identification des moisissures...........................................................................24 7-1- Identification morphologique....................................................................25 7-2- Identification génétique.............................................................................25 Chapitre 3- Activités biologiques des huiles essentielles 1- Activité antioxydante..........................................................................................26 2- Activité antibactérienne......................................................................................26 3- Activité antifongique..........................................................................................26 4- Activité pharmacologique...................................................................................26 5-Toxicité des huiles essentielles...........................................................................29 PARTIE MATERIEL ET METHODE 1- Matériel végétal................................................................................................32 1-1- la menthe.........................................................................................................32 1-2- Classification botanique.................................................................................32 1-3-description botanique.......................................................................................32 1-4- caractéristiques médicinales et utilisation......................................................33 2- Extraction des huiles essentielles 2-1- Technique de l’hydrodistillation..............................................................33 2-2- Procédé d’extraction...............................................................................33 2-3-Conservation de l’huile essentielle obtenue.............................................34 4 Analyse physique....................................................................................................34 4-1- le rendement..............................................................................................34 4-2- I ‘indice de réfraction...................................................................................35 4-3- Mesure de pH...............................................................................................35 4-4- Mesure de densité.....................................................................................36 5- Analyse chimique....................................................................................................36 6 - Criblage 6-1-Principe..........................................................................................................37 6-2- Macération...................................................................................................37 7- Analyses biologique 7-1- Activité antifongique..................................................................................38 7-2- Activité antioxydante..................................................................................40 8 - Dosage des protéines et lipides.............................................................................41 PARTIE 3 RESULTATS ET DISCUSSION 1 L’huile essentielle....................................................................................................44 2- Analyse physique............................................................................................44 2-1- Le rendement...........................................................................................44 2-2- L’indice de réfraction..............................................................................45 2-3- Ph............................................................................................................45 2-4- La densité................................................................................................45 3- Analyse chimique par CPG..............................................................................46 4- Criblage des flavonoïdes et des tanins................................................................48 5- Activités biologique................................................................................................49 5-1- Activité antifongique...............................................................................49 5-2- Activité anti-oxydante..............................................................................53 6- Dosage des protéines et lipides...............................................................................57 - Conclusion générale..................................................................................60 - Références...................................................................................................65 - Annexes.......................................................................................................68 Introduction : Depuis des milliers d'années, l'humanité a utilisé diverses plantes trouvées dans son environnement, afin de traiter et soigner toutes sortes de maladies, ces plantes représentent un réservoir immense de composés potentiels attribués aux métabolites secondaires qui ont l'avantage d'être d'une grande diversité de structure chimique et ils possèdent un très large éventail d'activités biologiques. Cependant l'évaluation de ces activités demeure une tâche très intéressante qui peut faire l'intérêt de nombreuses études. [3] Actuellement, les plantes aromatiques possèdent un atout considérable grâce à la découverte progressive des applications de leurs huiles essentielles dans les soins de santé ainsi que leurs utilisations dans d'autres domaines d'intérêt économique. Leurs nombreux usages font qu'elles connaissent une demande de plus en plus forte sur les marchés mondiaux. [3] La popularité dont jouissent depuis longtemps les huiles essentielles et les plantes aromatiques en général reste liée à leurs propriétés médicinales en l'occurrence les propriétés anti-inflammatoires, antiseptiques, antivirales, antifongiques, bactéricides, antitoxiques, insecticides, tonifiantes, stimulantes, et calmantes. uploads/Geographie/ etude-des-huiles-essentielles-de-la-plante-mentha-piperita-et-tester-leurs-effets-sur-un-modele-biologique-des-infusoires.pdf