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La République Algérienne démocratique et populaire Ministère de L’enseignement

La République Algérienne démocratique et populaire Ministère de L’enseignement supérieur et de la recherche scientifique Centre universitaire (Salhi Ahmed De Naama) Département des sciences de la Nature et de Vie Le thème : Série de TP pour le module de Systématique des procaryotes Travail réalisée par : Benfriha Mohammed Issam Groupe : 02 Sous la direction de : Amrouche TP/01 : Analyse le produit laitier Introduction : Matériel : Bec benzen-une pissette d’eau distillée-une pipette pasteur-un tube à essai (+ un bouchon)-boite de pétri-l’anse de platine-écouvillons-L’anse de platine. echantillons (laite)- Vortex-incubateur-leau pepton- les milieu de cultur ( bp pca vrbl )- rapapport. Technique : Stérilisation du site expérimental à l’eau de javel,rapprocher de bac benzène et après mise le flam en bleu, en prendre 7 tube a essai stérile, apres avec une pipette graduée en rempli 9ml de l`eau physiologie dans chaque tube, dans Le 1 er tube en ajoute par pipette graduée 1 ml de laite aprés en dépose le tube dans le vortex pour mélange, pour prépare la soulition mére . en dilue la soulition mére jusq`un 10*(6), prendre par un micropipette 0,1 ml de soulition mére et dépose dans le 2 eme tube (10*-1) aprés dépose le tube en vortex et mélange, prendre par un micropipette 0,1 ml de le 2eme tube (10*-1) et dépose dans le 3 eme tube (10*-2) aprés dépose le tube en vortex et mélange, prendre par un micropipette 0,1 ml de le 3eme tube (10*-2) et dépose dans le 4 eme tube (10*-3) aprés dépose le tube en vortex et mélange, prendre par un micropipette 0,1 ml de le 4eme tube (10*-3) et dépose dans le 5 eme tube (10*-4) aprés dépose le tube en vortex et mélange, prendre par un micropipette 0,1 ml de le 5eme tube (10*-4) et dépose dans le 6 eme tube (10*-5) aprés dépose le tube en vortex et mélange, prendre par un micropipette 0,1 ml de le 6eme tube (10*-5) et dépose dans le 7 eme tube (10*-6) aprés dépose le tube en vortex et mélange. Germe aerobie : prendr un boite de pétri bien stérile et met le milieu PCA dans cette boite apérs Laisser solidifier , aprés a l`aide d`un micropipette prendr un 0,1 ml de la 7 eme tube (10*-6) et en ajoutte dans la boite pétri aprés étalé avec un pipette pasteur, alors flambe la pipette jusqu`a ce que tu pernnes forme L, aprés étalé de tout la surface et ferme la boite pétri. enfin. en met la boite pétri dans l'incubateur à 30 pendant 24h/48h/72h. Staphylococcus (BP) : prendr un boite de pétri bien stérile et met le milieu BP dans cette boite apérs Laisser solidifier , aprés cprendr un 0,1 ml de la 3 eme tube (10*-2) et en ajoutte dans la boite pétri aprés étalé avec un pipette pasteur, alors flambe la pipette jusqu`a ce que tu pernnes forme L, aprés étalé de tout la surface apres tourne la boite a 60' et comance étalement et ferme la boite pétri . enfin. en met la boite pétri dans l'incubateur à 37 pendant 24h. colifoprm fécaux (VRBL): prendre un boite de pétri vide dépose d`un cette boite 1 ml de 3 eme tube (10*-2) par une pipette graduée, aprés ca en ajoutte le Milieu VRBL dans cette boite, aprés en melange la boite a forme 8. (hadii m3erftch khbrini bch nsa7e7ha) salmonelles (S.S): Enrichissement: prendre un tube qui contient 9 ml de l`eau peptoné aprés à L`aide d`un pipette graduée prendre 1 ml de laite et dépose dans le tube apres dépose le tube dans le vortax pour bien mélange.aprés depose le tube dans l'incubateur à 37 pendant 24h. 2eme jours: Aprés 24 H de l'incubation on prendre1 ml de cette tube (l`eau peptoné ) par une pipette graduée, et on dépose dans le tube de rappaport. enfin, met le tube dans l'incubateur à 37 pendant 24. Isolment: 3 eme jours: Aprés 24 H de l'incubation de tube D`enrichissent on prendre un boite qui contient le milieu MacConkey apres a l`aide d`un micropipette preleve un 0,1 ml de rappaport et dépose dans le boite apres par une pipette pasteur en encemenci sur la boite par la technique de(,,,,,,,,,,,,,,,,, hadi tanii)! enfin, met la boite dans l'incubateur à 37 pendant 24h. Remarque: Il faut incuber le milieu et l`eau piptoné pour les tester avant lutiliser pou avoir de résultats strictes. Résultats : Après la période d'incubation, on compte les colonies visibles par le compteir des colonies et on trouve les resulta suivant: FMAT(GA) : boite 01: 320 boite 02: 242 boite 03: 268 boite 04: 57 boite 05: 29 Staphylococcus (BP) : boite 01: 0 boite 02: 14 boite 03: 0 boite 04: 132 boite 05: 08 colifoprm fécaux (VRBL): boite 01: 0 boite 02: 0 boite 03: 0 boite 04: 0 boite 05: 0 salmonelles (S.S): observation de coulonie sur le milieu SS Inerprétation: Germe aerobie(PCA) : Nombre/ml : 242+268+57+29/ (1,1×0,1) ×10*(-6) = 596/(0,11×10*(-6)) = 5,41×10*(9) UFC/ml. (UFC : Unités Formant Colonies). Staphylococcus (BP) : Nombre/ml :132/ (1,1×0,1) ×10*(-2) =132/(0,11×10*(-2)) = 1,2×10*(5) UFC/ml. (UFC : Unités Formant Colonies). colifoprm fécaux (VRBL): salmonelles (S.S): présence de salmonelles Conclusion : Ces analyses nous permettent de déterminer la validité du produit satisfisant ou non satisfisant (contaminé par ces micro-organismes) pour préserver la santé du consommateur. D’après les résultats, nous concluons que ce produit est invalide. uploads/Geographie/ tp-02-amrouche-proudit-laitier.pdf