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ﺍﻟﺠﻤﻬﻮﺭﻳﺔ ﺍﻟﺠﺰﺍﺋﺮﻳﺔ ﺍﻟﺪﻳﻤﻘﺮﺍﻁﻴﺔ ﺍﻟﺸﻌﺒﻴﺔ République Algérienne Démocratique et P

ﺍﻟﺠﻤﻬﻮﺭﻳﺔ ﺍﻟﺠﺰﺍﺋﺮﻳﺔ ﺍﻟﺪﻳﻤﻘﺮﺍﻁﻴﺔ ﺍﻟﺸﻌﺒﻴﺔ République Algérienne Démocratique et Populaire ﻭﺯﺍﺭﺓ ﺍﻟﺘﻌﻠﻴﻢ ﺍﻟﻌﺎﻟﻲ ﻭﺍﻟﺒﺤﺚ ﺍﻟﻌﻠﻤﻲ Ministère de l’enseignement supérieur et de la recherche scientifique Université des Frères Mentouri Constantine Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie ﺟﺎﻣﻌﺔ ﺍﻻﺧﻮﺓ ﻣﻨﺘﻮﺭﻱ ﻗﺴﻨﻄﻴﻨﺔ ﻛﻠﻴﺔ ﻋﻠﻮﻡ ﺍﻟﻄﺒﻴﻌﺔ ﻭﺍﻟﺤﻴﺎﺓ Département de de Biochimie et Biologie Cellulaire et Moléculaire ﻗﺴﻢ ﺍﻟﻜﻴﻤﻴﺎء ﺍﻟﺤﻴﻮﻳﺔ ﻭ ﺍﻟ ﺒﻴﻮﻟﻮﺟﻴ ﺎ ﺍﻟﺨﻠﻮﻳﺔ ﻭ ﺍﻟﺠﺰﻳﺌ ﻴﺔ Mémoire présentée en vue de l’obtention du diplôme de Master Domaine : Sciences de la Nature et de la Vie Filière : Sciences Biologiques Spécialité : Biochimie Appliquée N° d’ordre : N° de série : UIntitulé : Jury d’évaluation : Président : Kitouni Rachid Maitre-assistant classe A- Université des Frères Mentouri, Constantine 1 Encadreur : Nour Bouanimba Maitre de conférences A - Université des Frères Mentouri, Constantine 1. Examinateur : Harouni Sofiene Maitre- assistant classe A- Université des Frères Mentouri, Constantine 1. Année universitaire 2017 - 2018 Etude phytochimique et evaluation de l’activité antioxydante de Romarin (Rosmarinus officinalis) Présenté et soutenu par : Boumadjen Roufeida Le 01/07/2018 Kimouche Sara Remerciement Nous tenons tout d’abord à remercier DIEU le tout puissant et miséricordieux qui nous a donné la force et la patience d’accomplir ce modeste travail. Nous tenons à exprimer toute nos connaissances à Mr Nour Bouanimba maitre de conférence A l’université Mentouri Constantine pour sa générosité, sa gentillesse, son encouragement, son soutien et de nous avoir fait confiance tout au long de la préparation de ce travail, qu’il trouve ici toute nos gratitude et nos sympathie. Un grand merci à Mr Kitouni Rachid, Maitre-assistant classe A à l’université de Constantine pour l’honneur qu’il nous a fait en acceptant de présider ce Jury. Nous sommes également reconnaissantes à Mr Harouni Soufiene maitre de conférences à l’université pour avoir accepté d’être membres de ce jury. Nos reconnaissances vont également, à Mr Kendouli Chouaib pour tout son aide, pour le temps qui nous a consacré pendant toute la durée de ce travail, nous garderons en mémoire vos grandes qualités, tant humaines, qu’intellectuelles, votre gentillesse et votre souci pour le travail bien. Nos derniers remerciements et ce ne sont pas les moindres, vont à toute l’équipe de Laboratoire de Biochimie de l’université Mentouri, et tous ce qui ont contribués de près ou de loin pour l’aboutissement de ce travail. Dédicace Je dédie ce modeste travail : A la mémoire de mon père et sœur Sihem A ma source de bonheur, la prunelle de mes yeux d’être la plus chère dans le monde, La femme la plus patiente aucun mot ne peut exprimer mon respect et mon amour ma chère mère avec sa grande tendresse. A mes chers sœurs Keltoum, Meriem, Amira et son fils Adem A mes chers frères : Mohammed, Ilyes, Abdelkrim Je dédie aussi ce modeste travail : A mes très chers sœurs cousines et mes chers tantes, tous les membres de la famille et à toute personne qui m’ont encouragé ou aidée au long de mes études. A mon binôme SARA A tous mes collègues de la promotion de Master 2 Biochimie Appliquée de la faculté des sciences de la vie et de la nature de l’université des frères Mentouri, et je leurs souhaite beaucoup de réussite, A tout ce que j’aime sans lesquels tout ceci n’aurait aucun sens… Rofeida Dédicace Je dédie ce travail aux deux êtres les plus chers au monde qui ont donné sens à mon existence : Mes chers parents, ma mère Zeineb, et mon père Mbarek, Aucune dédicace ne saurait exprimer mon respect, mon amour éternel et ma considération pour les sacrifices que vous avez consenti pour mon instruction et mon bien. J’espère que par ce modeste travail, je vous rends un peu de ce sentiment de fierté que j’éprouve d’être votre fille, et qu’il sera le fruit de vos innombrables sacrifices. Puisse DIEU, le très haut, vous accorde santé, bonheur et longue vie. A mes très chéres sœurs, Rym, Nadia, Amel, Khadidja, Saida et leurs petits poussins pour leur soutien moral et leur amour. A mes chers amis Joujou, Heithem, Ryma, Mimi, Nada, Meriem…. A mon binôme Bibia pour tout son soutien durant les moments les plus difficiles ; A toute ma famille ; A tous mes collègues de la promotion de Biochimie Appliquée ; A toutes les personnes qui ont contribué à mon éducation, mon enseignement et ma formation. Sara Sommaire Remerciement Liste des abréviations Liste des figures Liste des tableaux Introduction générale 1 Synthèse bibliographique Partie 01 Plantes médicinales et principe actif 1. Définition de la phytothérapie 3 1.1. La phytothérapie en Algérie 4 2. Définition des plantes médicinales 4 3. Définition du principe actif 5 4. Métabolites secondaires 5 4.1. Les composés phénoliques 6 4.1.1. Classification 6 A. Les acides phénoliques 7 a. Les acides hydroxybenzoïques 7 b. Les acides hydroxycinnamiques 7 B. Les flavonoïdes 8 C. Les coumarines 8 D. Les tanins 9 a. Les tanins hydrolysables 9 b. Les tanins condensés 9 E. La lignine 10 4.2. Les alcaloïdes 10 4.3. Terpènes et stéroïdes 11 Partie 02 Stress oxydatif 1. Le stress oxydatif 13 1.1. Origine du stress oxydatif 14 2. Les radicaux libres 14 2.1. Origine des radicaux libres 14 2.1.1. Sources exogènes 14 2.1.2. Sources endogènes 15 3. les types des espèces réactives d’oxygène ERO 16 3.1. l’anion superoxyde O2 16 3.2. Peroxyde d’hydrogène H2O2 16 3.3. Radical hydroxyle OH 16 3.4. Autres espèces réactives de l’oxygène 17 4. Origine cellulaires des espèces réactives de l’oxygène 17 5. Conséquences du stress oxydatif 18 6. antioxydant et système de défense 19 6.1. Système endogène 20 A. Antioxydant enzymatique 20 a. Superoxyde dimutase (SOD) 20 b. La catalase (CAT) 20 c. La glutathion peroxydase (GPX) 20 B. Antioxydant non enzymatique 21 6.2. Système exogène 21 A. Les oligo-éléments 21 B. Les vitamines 22 a. La vitamine E (alpha tocophérol) 22 b. LA vitamine C (acide ascorbique) 22 c. Les caroténoïdes 23 d. Les composés phénoliques 23 Partie 03 2tude botanique de Rosmarinus Officinalis 1. présentation botanique et géographique de la famille des Lamiacées 24 2. Historique 24 3. Etymologie 25 3.1. Nom vernaculaire 25 4. Classification botanique 25 5. Description botanique 26 6. Habitat 27 7. Récolte 27 8. Composition chimique 28 9. Usage 29 9.1. Usage interne 29 9.2. Usage externe 29 10. précaution 30 Chapitre 02 Partie expérimentale Matériels et méthodes 1. Matériels 31 2. Méthodes 33 2.1. Méthodes d’extraction 32 A. Broyage 33 B. Macération 33 2.2. Criblage phytochimique 35 2.2.1. Saponines 35 2.2.2. Alcaloïdes 35 2.2.3. Composés réducteurs 35 2.2.4. Tanins 35 2.2.5. Tanins vrais 36 2.2.6. Quinones 36 2.2.7. Stérols et triterpènes 36 2.2.8. Flavonoïdes 36 2.2.9. Flavonoïdes glycosides 36 2.2.10. Phénols 36 2.3. Dosage colorimétrique 37 2.3.1. Dosage des polyphénols totaux 37 2.3.2. Dosage des flavonoïdes 37 2.4. Les activités biologiques in vitro 38 2.4.1. Evaluation de l’activité antixydante par le DPPH 38 2.4.2. Pouvoir réducteur par la méthode de FRAP 39 Résultats et discussions 1. Screening phytochimique 41 2. Dosage des polyphénols totaux 43 3. Dosage des flavonoïdes totaux 44 4. Evaluation de l’activité antioxydante par le DPPH 46 5. Pouvoir de réduction par la méthode de FRAP 48 Conclusion générale et perspective 51 Références bibliographique Résumé Liste des abréviations AG : acide gallique AlCl3 : Trichlorure d’aluminium CAT : Catalase DPPH: 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl DO : densité optique ERO: Espèce Réactive de l’oxygène Etho : Ethanol Fe2+ : Ions ferreux Fe3+ : Ions ferriques FeCl3 : Chlorure de fer GPx : Glutathion peroxydase. GSH : Glutathion réduit GSHPx : glutathions peroxydases H : Hydrogène. H2O : Eau H2O2 : Le peroxyde d’hydrogène HCl : Acide chlorohydrique IC50 : Concentration nécéssaire pour inhiber 50% du radical DPPH K3Fe (CN) 6 : Ferricyanure de Potassium. LOO• : Radical peroxide MeOH: methanol MS : matiére séche NADPH : Nicotinamide adénine dinucléotide phosphate NaOH : Sodium hydroxyde NH4OH : Hydroxyde d’ammoniaque OMS : Organisation Mondiale de la Santé R•: Radical d’acide gras R2 : coefficient de corrélation SOD : Superoxyde dimustase UV : Ultra-violet Que : Quercétine. Mg EAG/g d’extrait : milligramme d’équivalent acide gallique par gramme d’extrait. Unités °C : Degré Celsius g : Gramme L: Litre Ml : millilitre Mg : Milligramme Min : Minute H : heure mm : Millimètre Mol : Mole μl : Microlitre nm : Nanomètre Liste des figures Figure I.1 Structure de base des composés phénoliques 6 Figure I.2 Structure des acides phénoliques 7 Figure I.3 Structure de base des flavonoïdes 8 Figure I.4 Structure de coumarines 9 Figure I.5 Structure des tanins hydrolysables 9 Figure I.6 Structure des tanins condensés. 10 Figure I.7 Structure de la lignine. 10 Figure I.8 Structure de base des alcaloïdes. 11 Figure I.9 Structure de base d’une unité isoprène. 11 Figure I.10 Structure de base de stérol 12 Figure I.11 Déséquilibre de la balance entre antioxydants et pro- oxydant 13 Figure I.12 Origine des radicaux libres 15 Figure I.13 Représentation schématique de la chaîne respiratoire mitochondriale 17 Figure I.14 Principales circonstances pathologiques s'accompagnants d'un stress oxydants 18 Figure I.15 Action des antis oxydants au cours du métabolisme des dérivés uploads/Litterature/ etude-phytochimique-et-evaluation-de-l-x27-activite-antioxydante-de-romarin-rosmarinus-officinalis.pdf