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Ft 7 denombrement levures et moisissures

Mme Abdellaziz épouse Zemmal Akila M A A FSB USTHB FICHE TECHNIQUE N Dénombrement des levures et moisissures sur gélose Sabouraud au chloramphénicol Utilisation La gélose de Sabouraud au chloramphénicol est recommandée pour l ? isolement des levures et des moisissures surtout lorsque les prélèvements sont fortement contaminés par des bactéries Composition Pour litre de milieu o Peptone pepsique de viande ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? g o Glucose ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? g o Chloramphénicol agent sélectif ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? g o Agar agar bactériologique ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? g pH du milieu prêt à l ? emploi à C agent sélectif Principe La croissance rapide des levures et moisissures est favorisée par la présence des peptones source d ? azote et du glucose source d ? énergie Le chloramphénicol antibiotique thermostable à large spectre antibactérien inhibe le développement des bactéries à Gram négatif et à Gram positif Le pH acide est défavorable au développement bactérien contrairement aux mycètes Technique voir schéma Préparation des dilutions décimales voir ?che technique Ensemencement en surface ou en nappe voir ?che technique n Incubation en aérobiose à C pendant à jours avec lecture quotidienne Lecture Levures Colonies moyennes de couleur crème d ? aspect crémeux et de forme semi-bombée Moisissures Colonies ?lamenteuses de couleurs variées selon le type de moisissure Dénombrement dénombrer séparément les levures et les moisissures dans les bo? tes contenant entre et colonies Faire la moyenne des bo? tes pour la même dilution Appliquer la loi de Kass N m x v x D UFC de levure ou moisissure ml ou gr N le nombre d ? unités formant une colonie m la moyenne des bo? tes V le volume ensemencé D la dilution correspondant aux bo? tes choisies Remarques D ? autres antibiotiques ou antibactériens peuvent également être additionnés à la gélose Sabouraud pour plus de sélectivité comme la Gentamycine l ? actidionne ou cycloheximide ? ? D ? autres milieux sont couramment utilisés tel que le milieu OGA gélose glucosée à l ? oxytetracycline CMme Abdellaziz épouse Zemmal Akila M A A FSB USTHB gr ml ml Préparation des dilutions décimales Fromage ml TSE ml Dilution - Dilution - Ensemencement en surface Dilution - Dénombrement UFC UFC UFC m UFC Incubation C - jours UFC UFC UFC UF ? C UFC UFC m UFC Comptage Des colonies m UFC Appliquer la loi de Kass N m x V x D Choisir la moyenne située entre et colonies m La dilution qui correspond à la série de tubes de m est - Le volume ensemencé V ml N x x - N UFC de levures moisissures gr ou ml C