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Ecologie ma République Algérienne Démocratique et populaire Ministère de l ? enseignement supérieur de la recherche scienti ?que Université des sciences et de la technologie d ? Oran Mohammed Boudiaf Faculté des sciences de la nature et de la vie Départem

République Algérienne Démocratique et populaire Ministère de l ? enseignement supérieur de la recherche scienti ?que Université des sciences et de la technologie d ? Oran Mohammed Boudiaf Faculté des sciences de la nature et de la vie Département vivant et de l ? environnement Compte rendu de TP isolement de micro organisme a partir de di ?érence biotopes - Elaboré par MILOUDI MERIEM Tahar Yamina -Groupe -Section -Module écologie -Professeur LAMIA MERMOURI L ? année CIntroduction En microbiologie l ? isolement est une technique permettant de séparer les micro-organismes présents dans un mélange microbien La technique de l ? isolement présente deux applications - Dans le cadre d ? un mélange bactérien l ? isolement est utilisé au préalable de l ? étude du mélange L ? isolement permet ainsi de séparer les di ?érents membres du mélange et de les étudier de façon séparée - Dans le cadre d ? une culture pure une seule espèce cette technique permet de véri ?er sa pureté But Isoler et dénombrer des micro-organismes qui se trouvent dans les échantillons du sol et eau de mer par la méthode des dilutions tout en maintenant le plan de travail aseptique Principe l'isolement consiste à réaliser à partir d'un échantillon des suspensions dilution seront développés chaque germe sera à l'origine d'une colonie le comptage des colonies permet par une méthode de calcul simple d'estimer la quantité de germes contenue Matériel utilise -le bec bunsen -vortex -anse de platine ??pipettes pasteur ??pipettes gradué-les tubes en ver ?? papier absorbant-désinfectant eau javel ??boites pétri contenant les trois milieu de culture BG -sabouraud-GN -balance-eau de mer-sol ??bleu de méthylène-microscope optique-lame et lamelle-erlenmeyer fermé avec coton BG - huile d ? immersion- crayons-eau distillé stérile Mode opératoire -Précautions générales de travail Tous les objets utilisés doivent être stériles Les mains lavées à l ? alcool Le paillasse doit être lavé à eau de javel Le travail doit s ? e ?ectuer dans la zone de protection du bec bunsen à l ? abri des courants d ? air il faut amber les goulots des tubes et acons après leur ouverture et avant leur fermeture Les boites de pétri doivent être ouvertes en maintenant le couvercle à l ? oblique avec ouverture du coté de la amme Isolement sur milieu solide sol s - -Milieu sabouraud La gélose Sabouraud est un milieu d'utilisation générale permettant la croissance et l ? isolement d'une grande variété de levures et moisissures L'addition de chloramphénicol inhibe la croissance des bactéries Gram positif et Gram négatif - -Milieu GN gélose nutritif La Gélose Nutritive est un milieu largement utilisé pour la culture des micro-organismes peu exigeants Elle est recommandée dans de nombreuses méthodes standardisées d ? analyses des aliments des laitages de l ? eau et d ? autres produits C-a-Préparation de la gsoralumtmioen dmuèrsoel est introduit dans un tube contenant mL d ? eau distillée stérile Les échantillons sont homogénéisés par agitation au vortex pendant quelques minutes b- la dilution décimale Prélever ml