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Poly tp s1 Classi ?cation bactérienne Etapes du diagnostic bactériologique ère séance de TP DCEM Section de Microbiologie Département des Sciences de Base B Faculté de Médecine de Tunis CPROGRAMME DE LA ère SEANCE h ?? h Présentation du topo à la salle de

Classi ?cation bactérienne Etapes du diagnostic bactériologique ère séance de TP DCEM Section de Microbiologie Département des Sciences de Base B Faculté de Médecine de Tunis CPROGRAMME DE LA ère SEANCE h ?? h Présentation du topo à la salle de Sta ? h ?? h Présentation des di ?érents milieux de culture liquides et solides utilisés en bactériologie h ?? h Préparation de l ? étalement pour la coloration de Gram Ensemencement d ? un germe pur sur gélose ordinaire h ?? h Réalisation de la coloration de Gram Lecture au microscope optique objectif CLES MILIEUX DE CULTURE Un milieu de culture est une préparation liquide ou gélosée au sein de laquelle des microorganismes peuvent se multiplier Il doit donc satisfaire les exigences nutritives du microorganisme étudié D ? une manière générale on distingue Les milieux ordinaires permettant la multiplication des germes peu exigeants et à multiplication rapide - Gélose nutritive ordinaire Bouillon ordinaire - Gélose Mueller Hinton MH utilisée pour l ? étude de la sensibilité d ? une bactérie aux antibiotiques Les milieux enrichis Ils sont obtenus en incorporant à un milieu de base adéquat des liquides ou suspensions riches en molécules organiques diverses a Gélose au sang frais GS L ? addition de sang frais au milieu de base permet d ? apporter des facteurs de croissance nécessaires à la croissance des streptocoques Il permet la lecture d ? un caractère important le type d ? hémolyse Ainsi les colonies peuvent être ? hémolytiques entourées d ? une zone claire d ? hémolyse signant l ? hémolyse totale des GR contenus dans la gélose hémolytiques entourées d ? une zone oue et verd? tre témoignant de l ? hémolyse partielle des GR contenus dans la gélose ou non hémolytiques b Gélose au sang cuit GC milieu enrichi préconisé pour l ? étude des Neisseria et Haemophilus in uenzae Les milieux sélectifs pour une espèce bactérienne sont des milieux satisfaisant les exigences nutritives et les conditions de développement particulières à cette espèce i Gélose Chapman Ce milieu contient un inhibiteur correspondant à de fortes concentrations en chlorure de sodium g l ce qui permet un isolement sélectif de Staphylococcus tolérant les fortes concentrations en NaCl On peut étudier la fermentation du mannitol par virage au jaune de l ? indicateur coloré le rouge de phénol autour des colonies ii Gélose Salmonella-Shigella SS Milieu sélectif permettant l ? isolement des Salmonella et Shigella Les inhibiteurs contenus dans ce milieu empêchent la pousse de toutes bactéries Gram et rendent di ?cile la croissance des bactéries Gram- autres que Salmonella et Shigella Le milieu contient du lactose pouvant être fermenté et contient du thiosulfate pouvant donner du H S Trois types de colonies peuvent être observés Colonies rouges lactose Colonies incolores lactose Colonies à centre noir H S iii Gélose Désoxycholate Lactose GDL gélose contenant du lactose et inhibiteurs des bactéries Gram Elle permet de rechercher le caractère utilisation du lactose ? Les bactéries fermentant le lactose formeront des colonies