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DETERMINATION des formes circulantes de la bilirubine et variations physiopatho

DETERMINATION des formes circulantes de la bilirubine et variations physiopathologiques BIOCHIMIE CLINIQUE MEMBRES DU GROUPE II FOTSO DZUNA Lloyd Venceslas MAGNE KAMTO Albertine ALACTIO TANGUEU Vanessa Ornella NGUEMDJO Nickelle Vanessa YOMI NANA Vanessa Flora NKENGA NJATCHIE Dolly 1 PLAN INTRODUCTION GENERALITES METHODES DE DETERMINATION DE LA FORME DE BILIRUBINE CIRCULANT VARIATIONS PHYSIOLOGIQUES DE LA BILIRUBINE VARIATIONS PHYSIOPATHOLOGIQUES DE LA BILIRUBINE 2 INTRODUCTION La bilirubine est un pigment de couleur jaune qui provient de la dégradation de l’hémoglobine. Localisation: principalement dans la Bile produite par les cellules de la rate et de la moelle osseuse Existe sous deux (02) formes: BILI LIBRE ou INDIRECTE ou NON CONJUGUEE (toxique) BILI DIRECT ou CONJUGUEE BILI TOTALE= BILI LIBRE + BILI CONJUGUEE Bilirubinémie normale: 3-12 umol/l. 3 GENERALITES Synthèse de la bilirubine 5 6 Pourquoi prescrire un dosage de la bilirubine ? Le dosage de la bilirubine est prescrit en cas de jaunissement de la peau ou quand un dysfonctionnement du foie ou de la vésicule biliaire est suspecté. 7 METHODES DE DETERMINATION DE LA FORME DE BILIRUBINE CIRCULANT Détermination de la bilirubine par Diazotation Methode Acide Sulfanilique Recherche dans les urines (bandelettes réactives) Méthode colorimétrique 8 Exploration fonction biliaire: Pigments biliaires Bilirubine libre= insoluble= non diazotable par la réaction de Van Den Berg. Nécessité d’une solubilisation (Caféine, Méthanol….) Bilirubine Indirecte. Bilirubine Conjuguée= Soluble= diazotable par la réaction de Van Den Berg Bili Directe 9 Méthode Colorimétrique Principe La Bilirubine directe est couplée avec de l’acide sulfanylique diazotisé pour former une coloration azoïque. Ce test utilise une méthode point final et un étalonnage 2 points. PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS ET PREPARATION Sérum, plasma hépariné ou plasma EDTA. Les échantillons sont stables pendant 3 jours à température ambiante et à l’abri de la lumière. 10 Détermination de la bilirubine par Diazotation Principe La bili totale est dosée en présence de caféine selon une réaction de diazotation avec l’acide sulfanilique diazoté. Par ailleurs le dosage de la bili conjuguée se fait en absence de caféine. Prélèvement des échantillons et préparation Patient à jeun depuis 10 heures Sérum, plasma recueillis sur heparinate de lithium Conservation 20°C pendant 3 mois à l’abri de la lumière 11 VARIATIONS PHYSIOlogiques DE LA BILIRUBINE Sang du cordon 8-25 mg/L 14-45 µmol /L Nouveau-né 12 heures < 60 mg/L < 100 µmol /L Nouveau-né 24 heures < 84 mg/L < 140 µmol /L Nouveau-né 48 heures 114 mg/L < 190 µmol /L 3 à 5 jours < 150 mg/L < 255 µmol /L 1re semaine 25-120 mg/L 45-200 µmol /L 2e semaine 10-110 mg/L 17-190 µmol /L 3e semaine 6-30 mg/L 10-50 µmol /L 4e semaine 3-15 mg/L 5-25 µmol /L Enfant, adulte 3-10 mg/L 5-17 µmol /L Valeurs Normales de la Bili Totale Bilirubine libre (indirecte) Enfant, adulte 2-7 mg/L 3-12 µmol /L Bilirubine conjuguée (directe) Enfant, adulte 1-3 mg/L 2-5 µmol /L 13 Plusieurs facteurs peuvent faire varier le taux de bilirubine dans le sang : •le sexe : les valeurs sont plus élevées chez l’homme (+ 20 %) ; •la grossesse : on observe une diminution progressive lors des 2 premiers trimestres ; •la prise de certains médicaments. La bilirubine augmente avec les diurétiques et la rifampicine. Elle diminue avec les inducteurs enzymatiques (phénobarbital), le clofibrate, le fénofibrate et l’acide acétyl- salicylique. 14 VARIATIONS PHYSIOPATHOLOGIQUES DE LA BILIRUBINE Taux de bilirubine libre indirecte élevé d’une anémie hémolytique (destruction massive des globules rouges) liée à la maladie de Minkowski-Chauffard, un déficit en G6PD, des hémoglobinopathies, un accident de transfusion, une incompatibilité foeto-maternelle, des hémolyses toxiques, médicamenteuses, infectieuses ou parasitaires. D’un déficit en conjugaison (un problème au niveau de l’étape qui permet l’excrétion de la bilirubine dans la bile) lié au syndrome de Crigler-Najjar, la maladie de Gilbert, ou la jaunisse du nouveau-né. 15 Taux de bilirubine conjuguée directe élevé Une augmentation de la bilirubine conjuguée directe peut être le signe : d’un syndrome de Dubin-Johnson ; d’un syndrome de Rotor ; d’une cholestase (diminution ou disparition de l’écoulement de la bile, qui provoque une accumulation de bile dans les voies biliaires) extra-hépatique d’une cholestase intra-hépatique 16 MERCI POUR VOTRE ATTENTIO N uploads/s3/ determination-des-formes-circulantes-de-la-bilirubine-et.pdf