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Examen catalyse enzymatique 2020 2021

Examen de Catalyse Enzymatique h Sans document Sans calculatrice Master Chimie ?? ère session Exercice Un article très récent décrit une méthode bactérienne de dégradation des phtalates publiée dans Environmental Pollution Volume March Il s ? intitule An e ?cient phthalate ester-degrading Bacillus subtilis Degradation kinetics metabolic pathway and catalytic mechanism of the key enzyme ? et est signé de Youqiang Xu Xiao Liu Jingrong Zhao Huiqin Huang Mengqin Wu Xiuting Li Weiwei Li Xiaotao Sun Baoguo Sun Voici les interactions observées par modélisation moléculaire entre le diisobutyl phtalate et l ? enzyme GTW Identi ?er chaque interaction précisément en matérialisant précisément les atomes impliqués dans l ? enzyme à pH physiologique Justi ?er Données Leucine Alanine Glycine Serine Acide Glutamique pKaR Histidine pKaR Tyrosine pKaR Les auteurs ont identi ?é les di ?érentes étapes de la dégradation ci-contre Nous allons seulement nous intéresser à la réaction catalysée par l ? hydrolase au début du processus C A quelle catégorie d ? hydrolase cette enzyme est-elle associée Sachant que la sérine est l ? acide aminé clé de la catalyse de cette réaction d ? hydrolyse proposer un mécanisme enzymatique pour cette réaction Exercice La réaction de déphosphorylation suivante a été utilisée comme modèle dans J Chem Educ ?? pour étudier l ? activité de la phosphatase alcaline de b ?uf APase EC fournie par Sigma Les graphiques suivant ont été fournis par l ? auteur Velocity dependence on substrate concentration with ?g mL enzyme - mM substrate diamond plus mM phosphate inhibitor square in MTris pH The reaction was monitored at nm for production of the p-nitrophenolate ion Expliquer la ou les expérimentations conduisant à ces résultats Quelle est l ? intérêt de la représentation B Quel est l ? intérêt de travailler dans le tampon Tris M pH Déterminer approximativement les Km et Vm de l ? enzyme Expliquer votre méthode C Après avoir identi ?é l ? inhibiteur indiquer quel type d ? inhibition est observé ici Déterminer approximativement le Kmapp en présence de cet inhibiteur Exercice L ? article J Phys Chem B ?? publié par Bose et al est illustré par le schéma d ? une transformation de la cellulose alors que le schéma décrit une valorisation du glucose en HMF ACS Catal ?? NB HEMA tris- -hydroxyethyl methylammonium methylsulfate Quel est l ? intérêt d ? utiliser la cellulose pour produire du glucose L ? hydrolyse enzymatique de la cellulose par une cellulase n ? est pas triviale Expliquer L ? enzyme catalyse cette réaction dans un milieu di ?érent d ? un tampon De quoi s ? agit-il Quel est l ? intérêt de travailler dans ce milieu plutôt qu ? en milieu aqueux Quelle est la principale voie de valorisation industrielle du glucose aujourd ? hui Le glucose est ici isomérisé en fructose puis deshydraté one pot en HMF L ? isomérisation est assimilable au mécanisme de l ? aldose cétose isomérase transformant l ? -hydroxy aldéhyde en ? céto-alcool CHO CH