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REPUBLIQUE TUNISIENNE MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR, DE LA RECHERCHE SC

REPUBLIQUE TUNISIENNE MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR, DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE ET DE LA TECHNOLOGIE UNIVERSITE DE MONASTIR Institut Supérieur des Sciences Appliquées & Technologie de Mahdia MEMOIRE DE PRO MEMOIRE DE PRO MEMOIRE DE PRO MEMOIRE DE PROJ J J JET DE FIN D’ETUDES ET DE FIN D’ETUDES ET DE FIN D’ETUDES ET DE FIN D’ETUDES Pour l’obtention du DIPLÔME DE LICENCE APPLIQUEE Spécialité Production alimentaire et nutrition Sujet Mécanismes de protection des plantes de pois par des polysaccharides extraits d’une souche de Rhizobium contre Orobanche crenata Réalisé par Khairi Hanene & Temani Randa Khairi Hanene & Temani Randa Khairi Hanene & Temani Randa Khairi Hanene & Temani Randa Soutenu, le 28 mai devant le jury composé de: Dr. Ghada MENSI Assistant à l'ISSAT-M Président Dr. KHOUAJA Fattouma Maître Assistant à l'ISSAT-M Encadreur Dr. MABROUK Yassine Assistant au CNSTN Co- Encadreur Année Universitaire 2008 Année Universitaire 2008 Année Universitaire 2008 Année Universitaire 2008/2009 /2009 /2009 /2009 Temani.R & Khairi.H 2008/2009 Dédicace de RANDA Je dédie ce mémoire A mes chers parents Chadli & Ta Chadli & Ta Chadli & Ta Chadli & Tajia jia jia jia Nulle dédicace ne saurait exprimer mes sentiments, ma reconnaissance et mon profond attachement. Pour tous l’amour que vous m’avez donnés Pour tous les sacrifices que vous avez consentis pour nous, Je vous dédie ce mémoire en témoignage de mon amour éternel et ma gratitude infinie. Que Dieu vous prête une bonne santé et une longue vie. A mes sœurs Râfette, Rawed, Raya, Raouia Râfette, Rawed, Raya, Raouia Râfette, Rawed, Raya, Raouia Râfette, Rawed, Raya, Raouia Vous m’avez toujours soutenue et aidée Merci pour tous ce que vous avez fait Que Dieu soit avec vous et vous permet de réaliser tous ce que vous voudrez A mon adorable oncle Ahmed Ahmed Ahmed Ahmed Et A Et A Et A Et A Ma tante Fatma Fatma Fatma Fatma Ma tante Ommelkhir Ommelkhir Ommelkhir Ommelkhir et Maymouna Maymouna Maymouna Maymouna Et Et Et Et à à à à touts mes amis touts mes amis touts mes amis touts mes amis Que dieu vous bénisse et soit avec vous tout au long de votre vie Temani.R & Khairi.H 2008/2009 Dédicace de HANENE Je dédie ce travail à toutes les personnes qui m’ont toujours aimée, supportée, conseillée, poussée à m’améliorer, dont le mérite, les sacrifices et les qualités humaines, on fait de moi ce que je suis aujourd’hui et m’ont permis de vivre ce jour ; Mon extraordinaire mère, Mon éxcéptionnelle père, Mes très chèrs frères : Karim Karim Karim Karim, qui possède la plus grand coeure Wajdi Wajdi Wajdi Wajdi, Helmi Helmi Helmi Helmi et Saif Saif Saif Saif Mes tous petits frères : Aziz Aziz Aziz Aziz et Arij Arij Arij Arij leur chère maman, Ma sage tante, mes cousins et toute la famille. A l’exceptionnelle, l’unique, la voix de ma conscience, au plus beau cœur qui m’a toujours supporté, protégé et qui aucun mot ne puisse décrire mes sentiments d’amour ; Khairi Khairi Khairi Khairi. . . . A tous mes amis : l’incroyable, le rare et celle qui mérite le titre d’ami avec excellence, Ali Ali Ali Ali. La tendre mon adorable Halima Halima Halima Halima, ma chère et même très chère Ines Ines Ines Ines, ma binome Randa Randa Randa Randa, la minione Mouna Mouna Mouna Mouna, qui possède la belle gosse Nahla, Nahla, Nahla, Nahla, les deux belles jumeaux Marwa Marwa Marwa Marwa et Mariem Mariem Mariem Mariem. . . . Tous mes camarades ; Mouhamed, Abir, Ferdaws, Wissal, Afef, Arwa, Anis, Nidhal, Yassine et Sabrine. MERCI POUR VOUS TOUS. MERCI POUR VOUS TOUS. MERCI POUR VOUS TOUS. MERCI POUR VOUS TOUS. Remerciements La rédaction de ce mémoire nous donne l’occasion de remercier toutes les personnes qui ont participé et contribué au bon déroulement de ce mémoire. Nous tenons à exprimer, en premier lieu, nos plus vifs remerciements à Monsieur Adel Adel Adel Adel Trabelsi, Trabelsi, Trabelsi, Trabelsi, Directeur Général du Centre National des Sciences et Technologies Nucléaires (CNSTN), pour avoir accordé notre accès au CNSTN. Nous tenons à remercier vivement Monsieur Yassine Mabrouk Yassine Mabrouk Yassine Mabrouk Yassine Mabrouk, Assistant au CNSTN, pour avoir accepté de diriger ce projet de fin d’étude, pour son encadrement, pour avoir mis à notre disposition les moyens expérimentaux nécessaires au bon déroulement de ce projet mais aussi et surtout pour ses qualités humaines et scientifiques toujours en toute modestie, sa passion et sa confiance qu’il a bien voulu nous accorder tout au long de ce travail. Nous tenons à remercier vivement Madame Fattoum Khouaja Fattoum Khouaja Fattoum Khouaja Fattoum Khouaja, Maitre Assistante en Institut Supérieur des Sciences Appliquées et Technologie de Mahdia (ISSAT M), d’abord pour avoir accepté d’encadrer et de co-diriger ce travail, pour sa disponibilité à répondre à tous nos soucis, pour avoir mis à notre disposition les moyens nécessaires, aussi pour sa bonne humeur mais surtout pour ses implications tant humaines que scientifiques. Nous tenons aussi à exprimer notre profonde gratitude à Mlle Sonia Mejri Sonia Mejri Sonia Mejri Sonia Mejri, assistante au CNSTN, pour son assistance jamais démentie et son aide au niveau de la partie expérimentale mais aussi pour avoir été si compréhensive et si généreuse avec ses conseils. Nous tenons à exprimer l’honneur qui nous est fait par les membres de jury en acceptant de juger notre travail. Qu’ils trouvent ici notre reconnaissance et notre respect. Que celles et ceux, qui par leurs actions, leurs témoignages et leurs concessions ont contribué à la réalisation de ce travail, trouvent ici le témoignage de notre reconnaissance. Sommaire I In nt tr ro od du uc ct ti io on n g gé én né ér ra al le e.............................................................................................. 2 S Sy yn nt th hè ès se e b bi ib bl li io og gr ra ap ph hi iq qu ue e........................................................................................ 1 1. Présentation des légumineuses......................................................................... 2 2. Le pois ............................................................................................................... 2 2.1 Importance de la culture de pois ................................................................ 3 2.2 Les ennemies du pois.................................................................................. 5 3 L’orobanche ........................................................................................................ 5 3.1 Distribution géographique............................................................................ 6 3.2 Cycle biologique .......................................................................................... 6 3.3 Moyens de lutte ............................................................................................ 7 M Ma at té ér ri ie el l & & M Mé ét th ho od de es s ............................................................................................. 10 1. Matériel biologique.......................................................................................... 11 2. Protocole expérimentale ................................................................................. 11 2.1 Étude de l’effet des polysaccharides sur le parasitisme du pois par orobanche crenata ............................................................................................ 11 2.2 Etude biochimique des mécanismes de défense induits chez le pois ........ 14 R Ré és su ul lt ta at ts s e et t D Di is sc cu us ss si io on n............................................................................................ 16 1. Effet des polysaccharides sur le développement de l’Orobanche..................... 17 1.1 Effet sur la germination des graines de l’O. Crenata ................................... 17 1.2 Effet des polysaccharides sur l’attachement d’O.crenata sur les racines des plantes de pois .................................................................................................. 19 2. Etude de la variation des activités enzymatiques............................................. 20 2.1 Activité de la POX....................................................................................... 20 2.2 Activité de la PPO...................................................................................... 21 C Co on nc cl lu us si io on ns s & & p pe er rs sp pe ec ct ti iv ve es s .................................................................................. 24 R Ré éf fé ér re en nc ce es s b bi ib bl li io og gr ra ap ph hi iq qu ue es s................................................................................ 26 A An nn ne ex xe es s................................................................................................................... 30 Listes d’abréviations µg : microgramme. µL : microlitre µm : micrométre. µmol : micromole BSA : Bovine Serum Albumin KCal : Kilocalorie. CNSTN : Centre National des Sciences et Technologies Nucléaires. DO : Densité Optique EDTA: Ethylene-Diamine-Tetraacetic acid EPS : Exopolysaccharides. g : gramme. h : heure. INRAT: Institut National de la Recherche Agronomique de la Tunisie ISSAT-M : Institut Supérieur des Sciences Appliquées et Technologies de Mahdia. L : litre. LPS : lipopolysaccharides M : mol. MF : matière fraiche mg : milligramme. min: minute. ml: millilitre. mM : millimolaire nm : nanomètre O. Crenata: Orobanche crenata. O. Foetida: Orobanche Foetida. POX : Peroxydase. PPO : Polyphénoloxydase. rpm : Rotation Par Minute UI : unité internationale. YEM: Yeast Entract mannitol. Liste des illustrations Listes des figures Fig. 1: Le pois (Pisum sativum)……………………………………………………………………….2 Fig. 2: a : Orobanche crenata, b : parcelle de fèverole infestée par Orobanche foetida……..4 Fig. 3: cycle biologique d’O.crenata………………………………………………………….6 Fig. 4: dispositif de stérilisation des graines de pois…………………………………….........9 Fig. 5: dispositif de stérilisation des graines d’O.crenata………………………………........10 Fig. 6: le système de Co-culture ……………………………………………………………..12 Fig. 7: variation de la germination des graines du parasite en foction des traitements……... …………………………………………………………………………….15 Fig. 8: Différents stades de développement de l’O.Crenata...........................................16 Fig. 9: Variation d’activité POX en UI/mg de protéines en fonction des traitements…..........18 Fig. 10: Variation d’activité PPO en UI/mg de protéines en fonction des traitements...19 Fig. 11 : Variation des teneures en phénols solubles en fonction des traitements……..21 Liste des Tableaux Tableau1 : Valeur nutritionnelle moyenne pour 100 g de pois………………………………..3 Tableau 2 : effet des polysaccharides sur le nombre d’attachement d’orobanche à la racine des plantes de pois………………………………………………………………………………...17 Temani.R uploads/Geographie/ a-pdf.pdf