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République Algérienne Démocratique et Populaire Ministère de l’Enseignement Sup

République Algérienne Démocratique et Populaire Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique Université Abderrahmane MIRA de Bejaia Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie Département des Sciences Alimentaires Mémoire de Fin de Cycle En Vue de l’Obtention du Diplôme d’Ingénieur d’Etat en Sciences Alimentaires Thème Effet de l’association de deux huiles essentielles de Thymus algeriensis(Boiss. Et Reut.) et d’Origanum glandulosum (Desf.) sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus. Présenté par Membres du Jury : Melle Nait Slimane Dalida Melle Zaddi Sonia Présidente : Mme BOUALI.N Promotrice : Mme OUKIL.N Examinateur : Mr CHIKHOUNE.A Examinateur : Mme BEDJOU.H Année : 2011- 2012 -Remerciements- Louange à Dieu le tout puissant de nous avoir donné courage et la patience pour réaliser ce travail. Nous tenons à remercier profondément notre promotrice M me OUKIL.N pour nous avoir encadré, en nous faisant bénéficier de ces connaissances, de son aide et de ces conseils. Qu’elle trouve ici l’expression de notre reconnaissance et de notre profond respect. Nous tenons à remercier chaleureusement les membres du jury : - Présidente : M me BOUALI.N - Examinateur : M rCHIKHOUN.A - Examinatrice : M me BEDJOU.H Un remerciement pour la technicienne de laboratoire microbiologie SAADIA pour son accueil et son soutient durant tout le travail au laboratoire. Enfin, nos remerciements s’adressent à toutes les personnes qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de ce travail. Dalida et Sonia. -Dédicaces- Je dédie ce modeste travail A mes parents en témoignage de ma profonde affection je leur suis reconnaissante pour leur soutien, amour et encouragements, leur fierté à mon égard serait la meilleure des récompenses. A mes grands parents. A la mémoire de ma grand-mère maternelle et mon grand père paternelle qu’ils reposent en paix. A mes frères que j’adore : Naim, Massi et Syphax. A mon adorable petite sœur Nissa que dieu la protège. A mes oncles, mes tantes et leurs enfants. A Farid pour son soutien et ses encouragements. A Souhila C2 A mes sœurs les filles de la chambre A04 ( Ikram, Seltana, Lydia, Seria, Sonia et Fatima). A mes amis (es) (Hafid, Tarik, Sabrina, Tina, Zouzou, Massissilia, Feta). A Sonia . A tous ceux que je connais. Dalida. -Dédicaces- En ce moment charnière dans ma vie, Je tiens à dédier ce modeste travail : A mes chers parents Symbole de reconnaissance et de remerciement sur tout ce qu’ils m’ont donné dans ma vie. A mes grands parents A la mémoire de mon grand-père paternelle, oncle Mouhand Et tante Malika qu’ils reposent en paix A mon très cher frère Mehdi, l’exemple de mon avance A mes sœurs Lamia, Samira, Taous A toute ma famille A mon promoteur A mon binôme A toute mes copines de chambre Farida, Houria, Nadia, Salma, Samia A tous mes amis et camarades Sonia. Sommaire Sommaire Dédicaces Remerciements Liste des figures Liste des tableaux Introduction…………………………………………………………………………………...1 Synthèse bibliographique Chapitre I : Généralités sur les huiles essentielles I-1- Définition et Classification des huiles essentielles………………………………………..2 I-2- Localisation des essences dans les végétaux et leurs propriétés physicochimiques…….3 I-3- Composition chimique des huiles essentielles……………………………………………4 I-4- Domaines d’utilisation…………………………………………………………………….6 I-5- Toxicité des huiles essentielles……………………………………………………………7 I-6- Extraction des huiles essentielles…………………………………………………………8 Chapitre II : activité antimicrobienne des huiles essentielles II-1- Association des huiles essentielles……………………………………………………...10 II-2- Activité liée à la composition chimique ………………………………………………..10 II-3-Mécanisme d’action des huiles essentielles……………………………………………...11 II-4-Techniques utilisées pour la détermination de l’activité antimicrobienne des huiles essentielles …………………………………………………………………………………...11 Chapitre III : Le thym et l’origan III-1- Le thym………………………………………………………………………………..14 III-1-1- Description et classification…………………………………………………………14 III-1-2- Répartition géographique……………………………………………………………15 III-1-3- Composition chimique ………………………………………………………………15 III-1-4- Propriétés et usage …………………………………………………………………..15 Sommaire III-2- l’origan……………………………………………………………………………….16 III-2-1- Description et classification…………………………………………………………16 III-2- 2-Répartition géographique……………………………………………………………16 III-2-3- Composition chimique……………………………………………………………….17 III-2-4- Propriétés et usage…………………………………………………………………...17 Partie pratique Chapitre I : Matériel et méthodes I-1- Matériel végétal………………………………………………………………………….18 I-2- Matériel biologique………………………………………………………………………19 I-3- préparation des extraits des huiles essentielles…………………………………………19 I-4- Etude de l’effet de l’association de deux huiles essentielles sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus ……………………………………………………………………...21 I-4-1- Préparation des dilutions de deux huiles essentielles et calcul des concentrations….21 I-4-2- Préparation des mélanges des deux huiles essentielles ……………………………...22 I-4-3- Préparation de l’inoculum Standard……………..……………………………………22 I-4-4- L’aromatogramme …………………………………………………………………….22 Chapitre II : Résultats et discussions II-1- Les extraits ……………………………………………………………………………...23 II-2- Effet des huiles essentielles du Thymus algeriensis et d’Origanum glandulosum sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus …………………………………………………..25 II-3- Effet de l’association des deux huiles essentielles sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus.................................................................................................................................28 Conclusion …………………………………………………………………………………...31 Références bibliographiques Annexes Liste des figures Figure N° Titre Page 1 Composés Terpénoides 4 2 la vanilline. 5 3 Appareillage d’hydrodistillation. 8 4 Action des huiles essentielles et de leurs constituants sur la cellule bactérienne. 11 5 Photographie de la plante Thymus algeriensis utilisé. 18 6 Photographie d’Origanum glandulosum utilisée. 18 7 Photographie de l’appareil de Clevenger utilisée. 19 8 Huile essentielle du Thym. 20 9 Huile essentielle d’Origan. 20 10 Diamètres des zones d’inhibitions de la croissance d’Escherichia coli et Staphylococcus aureus en présence de l’huile essentielle du thym. 24 11 Diamètres des zones d’inhibitions de la croissance d’Escherichia coli et Staphylococcus aureus en présence d’huile essentielle d’Origan. 26 12 Diamètres des zones d’inhibitions de la croissance d’Escherichia coli et Staphylococcus aureus en présence du mélange d’huile essentielle d’Origan et du Thym sur. 27 Liste des tableaux Tableau N° Titre Page I Principaux composés de deux espèces du thym. 15 II Principaux composés de deux espèces de l’origan. 17 III Concentration des huiles essentielles du thym et de l’origan. 21 IV Résultats de l’activité antibactérienne de l’huile essentielle du Thym sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus. 24 V Résultats de l’activité antibactérienne de l’huile essentielle d’Origan sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus. 25 VI Résultats de l’activité antibactérienne du mélange de l’huile essentielle d’Origan et du thym sur Escherichia coli et Staphylococcus aureus 27 Introduction Introduction 1 Introduction La thérapie par les plantes est, sans doute, aussi ancienne que l’est la maladie, transmise en tous lieux de génération en génération. Les plantes sont de véritables pharmacies naturelles que la nature a établie sur cette terre afin d’entretenir notre santé, prévenir nos maux, voire les guérir. En dépit des progrès considérables de la chimie, de l’industrie pharmaceutique et de la médecine, les plantes médicinales n’ont rien perdu de leur importance.la pharmacie moderne continue à les utiliser comme matière première pour la préparation de certains médicaments, (Frantisek et Vaclar, 1973). Les plantes aromatiques et médicinales constituent une véritable source de molécules chimiques, (Benayad, 2008). Elles synthétisent des molécules odorantes qui constituent ce qu’on appelle, les huiles essentielles ou essences connues depuis longtemps pour leurs activités antiseptique et thérapeutique dans la médecine populaire, (Rhayour ,2002). Certaines bactéries manifestent, en outre, une résistance vis-à-vis des antibiotiques usuels, voire parfois une résistance totale .D’où l’intérêt de recherche de nouvelles substances d’origine naturelle incluant les plantes. Récemment un grand intérêt est porté aux propriétés antimicrobienne des plantes aromatiques extraits, particulièrement aux huiles essentielles, (Rasooli et Mirmostafa, 2003 ; Sartorato et al,. 2004 ; Schelz et al., 2006). Ainsi plusieurs études visant à démontrer l’activité antibactériennes des huiles essentielles ont été réalisées, (Tabanca et al., 2001 ; Sahine et al ., 2004 ; Bendahou et al., 2008). Le mécanisme d’action n’a pas été étudié au niveau moléculaire, (Yossa, 2010). L’étude de l’activité antimicrobienne des huiles essentielles semble d’autant plus intéressante que la flore algérienne est extrêmement riche en plantes aromatiques. Notre travail consiste à faire la récolte de Thymus algeriensis et de l’Origanum glandulosum, suivi d’une extraction d’huiles essentielles par hydrodistillatioin pour étudier l’effet de l’association de ces deux huiles sur une souche à Gram positif Staphylococcus aureus et une souche à Gram négatif Escherichia coli. Synthèse bibliographique Chapitre I Généralités sur les huiles essentielles 2 Chapitre I : généralités sur les huiles essentielles Reconnues pour leurs propriétés thérapeutiques, et utilisées depuis des millénaires en Chine, en Inde, en Moyen Orient, en Egypte, en Amérique et en Afrique, les huiles essentielles tombent dans l’oubli au moyen âge, (Zhiri et Baudoux, 2005). L’extraction par distillation à la vapeur d’eau naît à l’époque de la révolution industrielle et permet le développement des produits alimentaires et des parfums. L’aromathérapie moderne était née, toutefois malgré son efficacité, elle ne reçoit pas un grand accueil et cela à cause de la concurrence des produits chimiques de synthèses mais aussi de la mauvaise utilisation des huiles essentielles, (Zhiri et Baudoux, 2005). I-1-Définition et classification des huiles essentielles  Définition Le terme (essentiel) dérive de l’essence qui signifie l’odeur ou le gout .La flaveur et l’odeur spécifique de beaucoup de plantes sont reliées aux propriétés de ces substances, (Calsamiglia et al., 2007). Les huiles essentielles, appelées aussi essences, sont des mélanges de substances aromatiques produites par de nombreuses plantes et présentes sous forme de minuscules gouttelettes dans des feuilles, la peau des fruits, la résine, les branches, le bois. Elles sont présentes en petites quantités par rapport à la masse végétale : elles sont odorantes et très volatiles, c’est-à- dire qu’elles s’évaporent rapidement dans l’air, (Padrini et Lucheroni, 1996). IL est important de distinguer entre les huiles essentielles, les huiles fixes (huiles d’olive…) et les graisses contenues dans les végétaux. En effet :  Seules uploads/Geographie/ memoire-de-fin-de-cycle-theme.pdf